单克隆抗体在大肠杆菌诊断中的应用

大肠杆菌的致病性可分为产肠毒素性大肠杆菌(ETEC),肠道致病性大肠杆菌(EPEC),肠道侵袭性大肠杆菌(EIEC)和肠道出血性大肠杆菌四大类。其中ETEC是引起幼畜腹泻的主要病原体,它的致病性取决于ETEC在宿主小肠上皮细胞上定居的能力和产生肠毒素的能力,两者缺一不可。ETEC定居于小肠上皮细胞能力是因为具有定居因子或称为粘着素,现已发现的动物源性粘着素主要为K_(99),K_(88),F_(41),987P。另外,ETEC还能     

我国预防幼畜腹泻大肠杆菌基因工程菌苗的研究现状

肠毒素性大肠杆菌(ETEC)引起新生幼畜(仔猪、犊牛、羔羊)腹泻在国内外都很普遍,是导致幼畜死亡的主要原因之一.ETEC的致病环节主要有两个方面:一是肠毒素,有不耐热性肠毒素(LT)和耐热性肠毒素(ST),可促使肠腔积液,引起腹泻;二是粘着素(定居因子).粘着素抗原是细菌细胞膜上长出的菌毛状结构,它们是由蛋白亚单位经装配而成,不同的菌株产生不同的粘着素抗     

表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白工程菌株的免疫原性研究

已构建的能表达大肠杆菌K88ac-ST1-LTB融合蛋白的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)及其表达产物经动物试验证实没有毒性反应。用从IPTG诱导的工程菌中提取的包涵体或经甲醛灭活的工程菌制成抗原，免疫小鼠，结果免疫小鼠至少能抵抗2MLD的大肠杆菌强毒株C83902（K88ac,ST^ ,L^ )的攻击，用提取的包涵体免疫家兔后，采集的血清能够中和天然ST1的毒性，这表明构建的工程菌株BL21（DE3）（pXKST3LT5)可以作为预防幼畜大肠杆菌性腹泻基因工程菌苗的候选株。     

核酸疫苗研究进展

核酸疫苗是将编码某种抗原蛋白的外源基因（ＤＮＡ）与质粒重组后,直接导入动物细胞内,并通过宿主细胞的转录系统合成抗原蛋白,诱导宿主产生对该抗原蛋白的免疫应答,以达到预防和治疗疾病的目的。因此,核酸疫苗又称基因疫苗。由于其不需要任何化学载体,故又称裸ＤＮ...     

产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原基因的克隆与核苷酸序列分析

将含产气荚膜梭菌α毒素基因的质粒ｐＫＭＡ１００用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,经１．５％琼脂糖凝胶电泳分离、透析袋电洗脱法回收０．９５ｋｂα毒素基因片段,再将载体ｐＥＴ－２８ｂ（＋）用ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切,然后将处理好的ｐＥＴ－２８ｂ（＋）与０．９５ｋｂ的α毒素基因片段通过Ｔ４ＤＮＡ连接酶进行粘性末端连接,转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄⅢ双酶切分析和核苷酸序列分析,证明重组质粒ｐＸＥＴＡ１含有产气荚膜梭菌α毒素基因。确定了α毒素基因的全部核苷酸序列,并证明其具有正确的阅读框架。     

人结核分枝杆菌热休克蛋白70基因启动子的序列分析

卡介苗（ｂａｃｉｌｕｓｃａｌｍｅｔｅ－ｇｕｅｒｉｎ，ＢＣＧ）是一种应用广泛的活的减毒性结核菌苗，具有低毒性、免疫力持久、对热稳定等特性［１］。目前国内外学者正致力于运用基因重组技术，将ＢＣＧ发展成一种新型重组活载体疫苗［２，３］。本研究克隆了人结核分...     

仔猪大肠杆菌K88ac—ST1—LTB三价基因工程灭活苗的研究

产肠毒素性大肠杆菌所致的仔猪黄、白痢在我国广大养殖地区流行十分广泛 ,发病率和死亡率都很高 ,即便是病愈存活的仔猪 ,其生长发育和生产性能指标也会受到严重影响 ,给养猪业造成了极其严重的经济损失。我们利用基因工程技术将大肠杆菌菌毛Ｋ88ａｃ抗原基因与肠毒素ＳＴ1和ＬＴＢ 基因融合在一起 ,获得了高效表达Ｋ88ａｃ -ＳＴ1-ＬＴＢ 融合蛋白的基因工程菌株所表达的产物 ,既保持了Ｋ88ａｃ菌毛抗原和ＬＴＢ 肠毒素良好的免疫原性 ,又赋予了ＳＴ1的免疫原性 ,同时在构建过程中 ,通过定点突变使ＳＴ1丧失了原有的生物毒性 ,这样就可以从…     

单克隆抗体技术在兽医细菌学中的应用

自1975年Kohler和Milstein创立淋巴细胞杂交瘤技术以来,单克隆抗体(McAb)已在生物学和医学领域显示了极其广阔的应用前景。目前McAb的应用主要集中在动物疾病的诊断、治疗、预防、理论性研究以及纯化和鉴定抗原等方面,临床应用尚有一定困难。近年来McAb技术在兽医细菌学方面取得了重大进展,而且有的McAb制剂已应用于临床,取得了巨大的社会效益和经济效益。