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为了高效分离纯化并获得结构完整的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),用于PRRSV的形态学研究、动物免疫以及制备高质量疫苗,本试验在Marc-145细胞中增殖PRRSV HuN4株,经超滤浓缩后,分别采用氯化铯密度梯度离心方法和凝胶层析技术纯化PRRSV。结果显示,与氯化铯密度梯度离心相比,凝胶层析纯化可以得到纯度更高、结构更完整的病毒粒子。将凝胶层析纯化得到的PRRSV免疫小鼠制备多抗,间接免疫荧光试验(IFA)结果显示,多抗血清可与PRRSV发生特异性反应;酶联免疫吸附试验(ELISA)结果显示,抗体效价可达到1∶25 600以上,纯化的病毒具有良好的免疫原性。结果表明,应用凝胶层析技术可得到高纯度、结构完整的PRRSV粒子,且纯化后PRRSV能够诱导良好的免疫应答,本试验结果可为PRRSV的纯化提供参考。 相似文献
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猪繁殖-呼吸综合征活疫苗对仔猪的安全性试验 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验用猪繁殖-呼吸综合征(PRRS)活疫苗和国内分离的PRRS强毒CH—1a株接种PRRS阴性的断奶仔猪,分别在接种后的3、7、14d各剖杀1头,取各脏器分别做冰冻切片和病理切片观察。用间接免疫荧光法检测各脏器PRRS病毒的分布。结果表明,PRRS活疫苗在免疫初期,抗原主要分布在脾脏、淋巴结,其次是肾脏和肺脏,少见于肝脏和心脏,第14d时在脾、淋巴结和肾脏有一定量的抗原,而肺脏相比则数量很少,肝脏和心脏未检到PRRS病毒抗原的存在,表明接种PRRS活疫苗随着时间的推移抗原分布呈下降趋势。而强毒抗原分布以脾脏最多,依次是肾脏、肺脏、淋巴结、肝脏、心脏,接种后第14d仍能在各脏器检到PRRS病毒抗原。病理组织学检测结果表明,活疫苗产生以下颌淋巴结、脾脏增生为特征的免疫应答,组织损伤轻微,对肺的病变较少,且仔猪生长良好。强毒则引起以大面积的肺泡隔增宽为特点的间质性肺炎和微循环障碍的病理变化,淋巴小结、脾脏滤泡发生崩解与周围界限不清,个别淋巴细胞核浓缩,组织损伤严重。本试验表明弱毒疫苗对仔猪是安全的。 相似文献
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猪链球菌对红霉素耐药性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
从发病猪体内分离、鉴定猪链球菌,采用肉汤稀释法和纸片琼脂扩散法筛选对红霉素耐药的猪链球菌,用双纸片法确定耐药株的耐药表型,通过聚合酶链反应检测对红霉素耐药的基因ermb/mefA。猪链球菌对红霉素的耐药表型为cMLS表型,即同时对克林霉素耐药。在3株红霉素耐药株中扩增到ermb基因,其余未能检测到ermb或mefA基因。 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪圆环病毒2型混合感染研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
1病原简介
猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的,以母猪的繁殖障碍、哺乳仔猪的高死亡率及呼吸症状为特征的一种传染病。PRRSV是有囊膜的单股正链RNA病毒,属于动脉炎病毒科动脉炎病毒属。该病1987年在美国首先发生,随后在世界各主要养猪国家流行。按其遗传差异和抗原性差异,可分为欧洲型(A群)与美洲型(B群)。该病毒的基因组全长约为15kb,含有8个开放阅读框架(ORFs),其中ORF1a和ORF1b编码病毒非结构蛋白,ORF2-ORF7编码病毒的结构蛋白。我国1996年由郭宝清等首次报道该病,研究证明其为美洲型。PRRS在我国大部分地区均有流行,造成巨大的经济损失。 相似文献
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禽白血病/肉瘤病毒群特异性抗原P^gag27的分离和纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
本试验用差速离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒,并以SDS法裂解病毒,用SDS-PAGE分析AMV结构蛋白成分,最后选用水平板式电泳系统,经SDS-PAGE比较大量地分离了P^gag27。用Dot-ELISA和琼脂扩散试验检验其抗原活性,并且用SDS-PAGE测定其分子量和纯度,结果表明,提纯的病毒蛋白具有抗原活性,且达到电泳纯。 相似文献
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本试验用差束离心和非线性蔗糖密度梯度离心法从感染雏鸡血浆中分离和提纯了禽成髓细胞性白血病病毒(AMV)。并以SDS法裂解病毒,用SDS-PAGE分析AMV结构蛋白成分,最后选用(LKB)水平板式电泳系统,经SDS-PAGE比较大量地分离提纯了Pgag27。用Dot-ELISA和琼脂扩散试验检验其抗原活性,并且用SDS-PAGE测定其分子量和纯度。结果表明,提纯的病毒蛋白具有抗原活性,且达到电泳纯。 相似文献