紫花苜蓿MsSQE1的克隆及对皂甙合成的功能分析

【目的】鲨烯环氧酶（squalene epoxidases,SQE）是苜蓿皂甙合成途径中的一种限速酶,与苜蓿皂甙的合成密切相关。通过对苜蓿鲨烯环氧酶（MsSQE1）基因的克隆及在苜蓿中过表达,探究鲨烯环氧酶对皂甙合成的作用机制。【方法】以模式植物蒺藜苜蓿鲨烯环氧酶基因序列设计引物,同源克隆苜蓿MsSQE1。对MsSQE1进行生物信息学分析;通过基因枪轰击技术,使MsSQE1在洋葱表皮瞬时表达,进行亚细胞定位。利用qRT-PCR方法分析该基因在根、茎、叶中的表达水平,以及在紫外辐射、ABA和GA₃条件下的表达模式。在茉莉酸甲酯（MeJA）的诱导下,分析MsSQE1的转录水平,及对苜蓿皂甙含量的影响。利用根癌农杆菌转化体系,获得过表达MsSQE1的阳性转基因植株,并测定转基因植株的皂甙含量。【结果】克隆了MsSQE1的cDNA序列,开放阅读框1 578 bp,编码525个氨基酸,等电点为8.59。同源性比对分析,其氨基酸序列与蒺藜苜蓿中SQE1氨基酸序列同源性为98.6%,与拟南芥的同源性为80%。亚细胞定位显示,MsSQE1可能定位于细胞膜。组织特异性表达分析显示,MsSQE1在叶中的表达量最高,茎中次之,根中的表达量最低。在紫外辐射、ABA和GA₃的诱导表达显示,紫外辐射诱导24 h,叶中表达量最高; GA₃（50 μmol·L ^-1）和 ABA（100 μmol·L ^-1）处理,均为8 h叶中表达量最高;MeJA处理能诱导MsSQE1表达量上调的同时苜蓿总皂甙含量也随着MsSQE1表达的上调而增加。分析过表达MsSQE1转基因苜蓿和转空载体苜蓿株系发现,MsSQE1的表达水平和总皂甙含量均升高,其中MsSQE1的表达水平是对照的3.11—9.45倍,总皂甙含量比对照提高14.26%—28.05%,暗示MsSQE1是苜蓿皂甙合成途径中的一种关键调节酶。【结论】从豆科牧草紫花苜蓿中克隆了MsSQE1并进行功能分析。在苜蓿中过表达MsSQE1能增加苜蓿总皂甙含量,暗示MsSQE1的表达影响苜蓿皂甙的生物合成,可能对皂甙的合成有重要的调节作用。     

蒺藜苜蓿MtCYP450基因的克隆及功能分析

分析了豆科模式植物蒺藜苜蓿中MtCYP450的表达特性和对胁迫处理的反应。该基因编码508个氨基酸,蛋白分子量为58.31kDa,等电点为6.85。序列比对发现MtCYP450与狭叶羽扇豆和大豆中的2个CYP450家族94亚家族蛋白同源性较高,因此,MtCYP450属于细胞色素P450的CYP94亚家族。荧光定量PCR结果显示MtCYP450在叶中表达最高,茎中次之,根中最少。在胁迫处理(200mM NaCl、5%PEG、100μM ABA和100μM MeJA)8~12h后,叶片中MtCYP450基因表达量显著上升,表明该基因受逆境和生长调节剂诱导表达。T2代超表达MtCYP450基因拟南芥在PEG和MeJA处理后MtCYP450表达量均上升;对异源超表达拟南芥的生长情况分析显示转基因拟南芥在NaCl(125mM)处理后根长是野生型的1.63倍,表明MtCYP450基因增强了拟南芥根系的抗盐性。因此,MtCYP450基因可能对植物抵抗非生物胁迫具有重要作用。     

水稻施用青海氯化钾的肥效比较

经验三年田间试验证实,国产青海省的盐桥牌氯化钾的水稻产量效应与加拿大和独联体产的氯化钾肥之间的差异不显著,为开发利用国产氯化钾提供了依据。     

蜂胶与口腔健康

蜂胶是工蜂从植物幼芽或树干破损部位采集到树脂后，混入其上颚腺分泌物和蜂蜡形成的胶状物。一般情况下，每群蜂每天只能生产约0．2克蜂胶。蜜蜂将蜂胶涂于整个蜂巢，蜂胶有“天然抗生素”之称。蜂胶具有广泛的生物学和药物学作用，目前已被用于全身疾病及口腔疾病的防治，本文就其在防治口腔常见疾病的研究综述如下。     

粤北采茶音乐的教育普及策略研究

粤北采茶音乐作为我国民俗音乐的重要组成部分,一直以来在民间广泛传唱。生产力水平的不断提高,以人工为主的传统茶叶种植模式,逐渐被机械生产代替,采茶音乐的创作和传承受到前所未有的挑战。采茶音乐教育作为保护采茶音乐创作和传承的一种重要形式,也逐渐被社会各界重视。基于此,本文从采茶音乐的发展价值为切入点,总结了发展采茶音乐教育的必要性,从中找出制约采茶音乐教育发展的关键因素。另外,还以粤北采茶音乐的教育普及为样本,对采茶音乐教育普及提出了策略。     

海拔对盐源烤烟主要化学成分及中性致香物质含量的影响

以云烟87为材料,在盐源4个不同海拔烟区（1 600、1 800、2 000、2 400 m）进行烤烟大田栽培,研究了四川凉山烟区海拔对烤烟主要化学成分及中性致香物质的影响。结果表明,烟区海拔对烤烟主要化学成分及中性致香物质有明显影响,随海拔的升高,烟叶烟碱、总氮、苯丙氨酸类降解产物、棕色化反应产物、西柏烷类降解产物、中性致香物质总量等先升高后下降,其中烟碱、总氮、苯丙氨酸类降解产物、棕色化反应产物、中性致香物质总量的峰值出现在海拔2 000 m烟区,西柏烷类降解产物峰值出现在海拔1 800 m烟区;烟叶还原糖、总糖先下降后升高,最低点出现在海拔2 000 m烟区。     

初探模拟教学在电子实习教学中的应用

模拟教学法,已在职业学校的文化课和专业基础课中应用广泛,但在技能实习课中还鲜有研究。本文探讨了模拟教学法的涵义、在中职学校电子实习课教学中的应用,力求探索适合电子实习课、有利于培养学生的综合职业能力的新模式。     

不同预处理对紫楠种子萌发的影响

对紫楠种子的萌发进行探究,从铺垫物、种壳条件、赤霉素条件、紫外线条件、菌群条件、光条件、热激等7个方面进行。通过不同预处理对种子萌发产生的不同影响,掌握紫楠种子萌发的特性以及存在的差异性。研究表明,铺垫物为棉花相比较滤纸而言更保湿保温,可以促进种子萌动速度;种壳为紫楠种子萌发最大的限制条件;80mg/L浓度的赤霉素会抑制种子萌发;紫外线照射对于种子萌发率影响不大但萌发出的芽较多为红芽;菌群的存在会不利于种子的存活;光照是萌芽种子进行光合作用的首要条件;30℃下热激对种子有损害。本研究以期为紫楠的繁育提供基础性数据。     

设施蔬菜应用秸秆生物反应堆技术

近年来随着设施蔬菜面积的不断发展,生产上采用传统栽培模式,长期连作、过量施入化肥、导致土壤板结、退化、有机质含量降低、根腐病等土传病害日趋严重,使蔬菜产品质量和产量不断下降,效益下降。此外,冬春季节地温低,土传病害严重、二氧化碳不足又是制约海城市棚菜生产的瓶颈问题。而应用秸秆生物反应堆技术,可以提高地温、增加二氧化碳浓度,提高作物抗病性,对推进无公害生产,保持设施蔬菜