猪瘟疫苗微载体悬浮培养生产工艺试验

为优化猪瘟病毒(CSFV)的BT细胞悬浮培养工艺以提高CSFV抗原含量,采用2 L生物反应器对BT细胞的最佳接种密度、CSFV的最佳接种剂量进行了摸索和优化,采用优化的工艺参数,进行了BT细胞5倍消化放大工艺验证,同时对比了BT细胞悬浮培养工艺与转瓶培养工艺增殖CSFV的差异。结果表明,在3 g/L微载体浓度下,采用1.5×10~5个/mg的细胞初始接种密度,培养72 h可获得最佳细胞密度;采用MOI(感染复数)为0.5的接种剂量可收获≥106.8FAID_(50)/mL的CSFV抗原;BT细胞从2 L到10 L生物反应器的5倍消化放大工艺验证试验,3批细胞培养96 h均能达到4.0×10~6个/mL以上;悬浮培养工艺增殖的CSFV抗原含量约是转瓶培养工艺的15倍。以上试验为猪瘟疫苗的生物反应器规模化生产奠定了基础。     

一株H3N2亚型猪流感病毒株的分离鉴定及对猪的感染性研究

为探究猪流感病毒(SIV)黑龙江分离株的基本特性,本研究将2007年从黑龙江省某猪场采集的鼻拭子样品接种10日龄SPF鸡胚进行病毒分离,经微量血凝试验、HA和NA基因RT-PCR扩增并测序确定其病原特异性,与Gen Bank已登录的序列进行比对分别分析HA和NA基因序列的同源性,进行动物回归试验确定该分离病毒对猪的致病力。结果显示,接种鼻拭子样品的SPF鸡胚尿囊液有凝集鸡红细胞的活性,经RT-PCR扩增出H3和N2目的基因片段,HA基因序列(HM765432)与A/swine/Korea/CAS07/2005(H3N2)(EU798791)的HA基因序列同源性为98%,NA基因序列(HM765434)与A/swine/Korea/CAS09/2006(H3N2)(EU798832)的NA基因序列同源性为98%,结果表明分离株为H3N2亚型SIV。动物回归试验结果显示,该分离病毒能够使80%猪发病,且与临床发病猪的症状类似,表明该分离病毒对猪具有较强的致病力,有望成为H3N2亚型SIV疫苗效力评价用效检病毒株。     

兽用生物制品中支原体的污染来源及检测预防控制措施

兽用生物制品是一类特殊的动物保健品,是控制和消灭动物传染病,保障动物及人类健康的重要武器之一。若兽用生物制品被支原体污染,制品的质量和安全将会受到严重影响,同时会造成巨大的经济损失。结合生产实际对兽用生物制品支原体污染的主要来源和支原体污染的检测方法进行了介绍,制定了科学合理的预防控制措施,以期为确保兽用生物制品无支原体污染,质量安全可靠提供参考。     

高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(TJM-F92株)微载体悬浮培养疫苗比较研究

为了改进高致病性猪繁殖与呼吸综合征(HP-PRRS)疫苗培养工艺,对HP-PRRSV微载体悬浮培养(TJM-F92株)活疫苗的抗原生产工艺、疫苗的安全性及免疫效力等方面进行研究,并与转瓶培养工艺进行比较。结果表明:微载体悬浮培养工艺生产HP-PRRSV(TJM-F92株)优于转瓶培养工艺,其病毒含量比转瓶培养工艺高约10倍,且批间差异小;HP-PRRSV微载体悬浮工艺活疫苗(TJM-F92株)安全性与转瓶培养工艺活疫苗相比无显著差异,均安全;4批活疫苗细菌、支原体、外源病毒检测合格,病毒含量、真空度和剩余水分均符合标准,但免疫效力明显优于转瓶培养工艺活疫苗。说明从疫苗工业化生产及产品质量控制方面来衡量,微载体悬浮培养工艺比转瓶培养工艺更具有优势。     

猪流行性腹泻病毒SD201604株的分离鉴定及致病性研究

本研究旨在获得猪流行性腹泻病毒（PEDV）分离株,并对其致病性进行研究。应用Vero细胞从山东某猪场腹泻病料中进行病毒分离,通过细胞病变、免疫荧光试验、电镜观察和RT-RCR进行鉴定,并对分离株的S基因序列进行分析;应用10^3.5 TCID₅₀/mL分离株口服接种3日龄仔猪并观察临床症状和病理变化;用不同滴度的分离株分别口服接种3日龄仔猪（3 mL/只）,统计各组仔猪的死亡率,确定最小致死量。结果显示,成功分离到1株PEDV,命名为PEDV SD201604株。该分离毒株能在Vero细胞上增殖,产生细胞病变,传代至F6代时病毒滴度可达10^3.5 TCID₅₀/mL,免疫荧光试验和RT-RCR检测均为PEDV阳性。电镜观察可见直径大小约为100 nm的病毒粒子,有明显的囊膜和纤突,具有PEDV病毒粒子典型的形态特征,确定分离株为PEDV。S基因序列分析显示,分离株为国内流行的PEDV变异株。动物回归试验结果显示,口服感染该分离株的5头3日龄仔猪全部出现典型的PED临床症状和病理变化,其中3头死亡。最小致死量试验结果表明,口服感染3 mL病毒含量为10^4.5 TCID₅₀/mL的分离株可使仔猪全部死亡。本试验结果可为PEDV的分离鉴定及生物学研究提供参考与借鉴。     

新格局下兽用生物制品产业发展现状及策略

在国际形势和新冠疫情的影响下，中国畜牧养殖业面临新的挑战和压力，倒逼行业由高速发展向高质量发展转变。兽用生物制品产业是畜牧业健康发展的重要保障，如何立足新发展格局做好产业发展的转型和升级值得思考和探索。虽然我国兽用生物制品产业具有长足的发展空间，但还存在产业结构不合理、产品创新同质化、产品评测体系不够科学及市场竞争无序等隐患。针对上述现状，从提升产业创新能力、加强上下游产业链合作、提升产业数字化、加强生物安全防控、提升人才梯队建设等方面提出解决策略。