绵羊卵丘/颗粒细胞周期时相同步化处理的流式细胞仪分析

体外培养绵羊卵丘/颗粒细胞,传2～3代后,分别经低温冷藏处理6h和血清饥饿培养3d,流式细胞仪检测分析异倍体细胞检出率和处理组与对照组的细胞周期时相百分比。本培养系统各组均未检出异倍体细胞;低温冷藏处理组、血清饥饿处理组与对照组处于G0/G1期时相细胞百分比分别为93.3%±2.1%、92.4%±1.02%和84.5%±2.27%。试验结果表明,低温冷藏处理与血清饥饿培养都能很好地使绵羊卵丘/颗粒细胞同步于G0/G1期。     

巢式PCR检测乳中布氏杆菌

本研究建立了检测乳中布氏杆菌omp22基因的巢式PCR方法,经过反复操作验证该检测方法有较好的重复性和稳定性。对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌、棒状杆菌、绿脓杆菌等羊常见菌及羊基因组检测阴性,表明此方法有很好的特异性。该方法有较强的敏感性,羊乳中布氏杆菌的检测灵敏度可达到40CFU/mL乳汁。     

体外培养的绵羊卵丘/颗粒细胞周期特征分析

作者探讨了体外培养的绵羊卵丘/颗粒细胞在不同生长状态、不同传代次数的细胞周期特征。流式细胞仪分析结果显示:第3代和第13代细胞生长至50%~60%汇合、70%~80%汇合和完全汇合时处于G0/G1期细胞的比例分别为76.6%±1.7%、83.4%±1.65%、84.53%±2.27%和66.8%±1.84%、72.8%±2.09%、76%±3.41%。低代细胞处于G0/G1期的比例显著高于高代细胞(P<0.05),高汇合度的细胞处于G0/G1期的比例显著高于低汇合度的细胞(P<0.05)。这表明核移植时选用低代高汇合度的培养细胞为宜。