猪伪狂犬病毒和猪细小病毒双重PCR方法的建立及初步应用

目的本研究旨在建立一种适用于临床样品和动物源性生物制品中猪伪狂犬病毒和猪细小病毒同时检测的双重PCR技术。方法针对猪伪狂犬病毒(PRV)的gE基因和猪细小病毒(PPV)的VP2基因的保守区域分别设计引物。结果经条件优化后,所建立的双重PCR方法能特异性地检测出样品中的PRV(581bp)和PPV(202bp)。结论本方法具有良好的特异性、敏感性和稳定性,适用于临床样品中对PRV和PPV的同时检测,也可用于猪源性生物制品的检测。     

猪A群轮状病毒BJ株的分离与鉴定

轮状病毒是引起幼龄动物和儿童病毒性腹泻的主要病原,轮状病毒的分离鉴定为该病的流行病学调查和分子生物学特性研究奠定了基础。本研究采集北京某猪场腹泻发病仔猪肠内容物,将其接种MA104细胞,分离得到一株能产生明显细胞病变的病毒。对分离毒株进行胶体金、实时荧光定量RT-PCR和免疫荧光等方法鉴定,并对分离毒株的VP4、VP6和VP7基因进行测序及序列分析。结果表明,分离毒株为猪A群轮状病毒。按照A群轮状病毒的最新分类方法,确定该分离株VP4、VP6和VP7基因的基因型分别为P[13]型、I5型和G11型。因此,将该分离株命名为Rotavirus A pig/China/BJ/2015/G11P[13]。     

一例仔猪水肿病的实验室诊断

(一)发病情况河北省某猪场饲养母猪150头,2013年4月初,断奶仔猪陆续出现急性死亡,多在断奶后40～60日龄发病,发病率为10%,病死率达到90%以上。(二)临床症状主要症状有精神沉郁,食欲下降,口流白沫,轻度腹泻,后期便秘,体温无明显变化。发病仔猪均有神经症状,表现肌肉震颤,不时抽搐,四肢泳动,共济失调,盲目前进或做转圈运动。面部、眼睑及颈部有水肿,死前后躯麻痹。结膜高度充血,90%的仔猪在表现症状后不久     

规模猪场猪瘟免疫失败调查及免疫程序优化

为调查规模猪场猪瘟的免疫效果,选取北京市3个规模猪场,每场随机抽取10头仔猪分别在25、60日龄和90日龄采血分离血清,检测猪瘟抗体.A、B、C3个猪场的母源抗体阳性率分别为100％,50％,0％;2次免疫后抗体阳性率分别为10％,90％,90％.由于猪场A猪瘟免疫失败,对其免疫程序进行了优化,将首免时间推迟至50日龄.优化免疫程序后2次免疫后抗体阳性率达到70％.结果表明,母源抗体阳性率直接影响猪瘟疫苗对仔猪的免疫效果,仔猪母源抗体降至50％左右进行猪瘟免疫可取得比较理想的结果.本研究为规模猪场结合仔猪母源抗体水平制定合理猪瘟免疫方案提供了较好的参考.     

2009年我国部分猪群输血传播病毒感染情况调查

为调查输血传播病毒(TTV)在我国猪群中的感染状况,本研究对2009年采自29个省市的1990份猪血清样品进行了TTV1、TTV2的双重PCR方法检测,并对结果进行了统计分析.结果表明,我国猪群中TTV总的感染率为63.37％(1261/1990),其中TTV1感染率为55.88％(1112/1990),TTV2为32.91％ (655/1990),TTV1和TTV2双重感染率为25.43％(506/1990).进而对样品的地区性分布特征、样品来源等影响因素进行分析,表明我国猪群中TTV感染率以东北地区最高,西北地区最低.样品来源不是影响感染率的关键因素.     

2014年我国猪病流行特点及防控措施

2014年,我国常见猪病中重大动物疫病如口蹄疫、猪瘟、猪繁殖与呼吸综合征等较为稳定;猪流行性腹泻、猪伪狂犬病呈散发态势;猪丹毒、副猪嗜血杆菌病、链球菌病、传染性胸膜肺炎、猪痢疾等条件性传染病发病逐渐增多。本文从引起消化系统疾病、繁殖障碍性疾病、呼吸系统疾病的传染病三个方面概述了2014年我国主要猪病的流行特点及防控措施。     

2009年我国猪群中猪圆环病毒2型感染情况调查

为了解我国猪群中猪圆环病毒2型（Porcine circovirustype2，PCV2）的感染情况，分析感染与猪年龄的关系，本试验于2009年在我国28个省市的71个中小规模场、22个屠宰场和62家散养户采集了2905份猪血清样品，用PCR法对PCV2进行检测。结果显示，检出阳性血清429份，阳性率为14．8％。在被调查的场／P中，86．4％屠宰场、52．1％中小规模场和58．1％散养户为PCV2感染阳性，其中48．6％的PCV2阳性中小规模场的群阳性率低于10％。分析中小规模场PCV2感染情况和猪年龄之间的关系发现，在5个年龄组中，2～4周龄组未检出PCV2感染，5周龄以上各组均检出PCV2感染，其中11～14周龄组和15～26周龄组阳性率较高，高于5～7周龄组和8～10周龄组。     

我国种猪主要垂直传播性疫病流行态势分析及控制策略探讨

种源疫病控制是生猪疫病防控工作的基础。本文以全国重点原种猪场监测数据、生猪屠宰场监测数据为基础,结合相关分子流行病学调查结果,系统分析了我国种猪主要垂直传播性疫病的流行态势、主要原因和控制策略,以期为我国进一步完善种猪疫病控制提供依据。     

猪圆环病毒2型10JS-2株的分离与全基因组序列分析

本试验从江苏某猪场采集猪血清,进行猪圆环病毒2型(PCV2)的检测和分离,根据GenBank中登录的PCV2全基因组序列,设计1对特异性引物,扩增PCV2全基因组,并且进行序列测定和分析。发现一株PCV2 10JS-2的基因组全长为1779 nt,在病毒复制起始区域含有11个碱基的插入。在GenBank中对含有11个碱基插入的毒株序列进行BLAST发现,有两株PCV2(AY321993和EF565360)也有11个碱基的插入,但是与10JS-2比较,插入的碱基和插入的位置不同。遗传进化分析显示10JS-2属于PCV2a基因型,AY321993和EF565360属于PCV2b基因型,因此推断10JS-2可能是由PCV2a基因型的毒株在复制起始区域发生碱基插入形成的。这是首次发现此类PCV2毒株。     

非洲猪瘟病毒微芯片荧光PCR快速检测技术的建立及初步应用

非洲猪瘟缺乏安全有效的疫苗,其防控有赖于及时、准确的诊断和消毒灭源.本研究在对非洲猪瘟病毒(Afri-can swine fever virus,ASFV)B646L基因序列进行分析的基础上设计引物、探针,建立了基于微芯片的ASFV免提取荧光PCR检测技术.特异性试验结果显示,微芯片PCR可用于我国不同地区ASFV毒株...