双葛止泻口服液微生物限度检查方法学验证

建立了双葛止泻口服液的微生物限度检查方法。根据2015年版《中华人民共和国兽药典(二部)》通则1102非无菌产品微生物限度检查:微生物计数法,以及通则1103非无菌产品微生物限度检查:控制菌检查法和通则1104非无菌兽药微生物限度标准进行方法适用性试验。结果表明,采用薄膜过滤法对样品进行需氧菌总数、霉菌和酵母菌计数方法适用性试验,试验组与菌液对照组的比值为0.5~2,采用常规法进行控制菌检查方法适用性试验,试验组检出阳性试验菌。所建立的方法可作为双葛止泻口服液微生物限度的检查方法。     

头孢泊肟酯片体外溶出曲线研究

建立头孢泊肟酯片溶出度测定方法,通过比较自制头孢泊肟酯片与参比制剂的溶出曲线,评价两种制剂体外溶出行为是否一致。测定自制制剂及参比制剂在盐酸溶液(pH=1.5)、甘氨酸-氯化钠-盐酸溶液(pH=3.0)、醋酸盐缓冲液(pH=4.0)、磷酸盐缓冲液(pH=6.8)的溶出曲线,并通过计算相似因子(f₂)评价溶出曲线的相似性。在4种溶出介质中,3批自制制剂与参比制剂溶出曲线均相似。本研究建立的溶出试验方法能有效控制自制头孢泊肟酯片的质量,自制制剂与参比制剂体外溶出行为基本一致。     

HPLC法同时测定双葛止泻口服液中绿原酸和葛根素的含量

[摘 要] 建立了同时测定双葛止泻口服液中绿原酸和葛根素含量的测定方法。采用高效液相色谱（HPLC）法,使用Waters XBridge C18（250 × 4.6 mm,5 μm）色谱柱,流动相为乙腈-0.4%磷酸溶液梯度洗脱;检测波长为315 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为30 ℃。结果表明,绿原酸浓度在0.008242~0.1030 mg/mL的范围内,与峰面积线性关系良好（r = 1.0000）,平均回收率为99.1%（n = 6）,RSD为1.8%;葛根素浓度在0.02296~0.2871 mg/mL的范围内,与峰面积线性关系良好（r = 1.0000）,平均回收率为98.7%（n = 6）,RSD为1.6%。该方法简单、准确、专属性强,可用于双葛止泻口服液中绿原酸和葛根素的质量控制。     

高效液相色谱法测定双葛止泻口服液中绿原酸的含量

[目的]建立并验证双葛止泻口服液中绿原酸的含量测定方法。[方法]采用Agilent ZORBAX SB-C_(18)(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸水溶液梯度洗脱;检测波长为327 nm;流速为1.0 mL/min;柱温为25℃。[结果]绿原酸进样量在0.082 5～0.825 0μg与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 9),平均回收率为104.0%,RSD为0.4%。[结论]该方法简便、准确、专属性强,可用于双葛止泻口服液中绿原酸的质量控制。     

双葛止泻口服液抑菌剂用量筛选与抑菌效力研究

通过抑菌效力研究确定了双葛止泻口服液中抑菌剂的合理添加量。根据《中国兽药典》2015年版一部附录“1121抑菌效力检查法”要求,以金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、白色念珠菌和黑曲霉为试验菌株,建立双葛止泻口服液抑菌效力检查方法,对不同苯甲酸钠含量的双葛止泻口服液进行抑菌效力测定,筛选出供试品中抑菌剂合理添加量。结果表明,0.3%的苯甲酸钠对微生物生长繁殖具有良好的抑制作用,且为最低有效剂量。因此,0.3%的苯甲酸钠可作为双葛止泻口服液的抑菌剂用量。     

黄芪甲苷提取方法优化

[目的]优化黄芪药材中黄芪甲苷提取方法。[方法]采用单因素试验对提取方式、提取溶剂、提取次数进行考察,采用HPLCELSD法测定黄芪甲苷含量。[结果]黄芪药材中黄芪甲苷最优提取方法为每次用50倍的50%甲醇加热回流提取2次,每次1 h。[结论]该试验所建立的方法操作简单、准确可靠、重现性好,为黄芪饮片及制剂中黄芪甲苷的提取及含量测定提供参考。     

UPLC法同时测定苦参功劳颗粒中苦参碱和盐酸小檗碱的含量

建立超高效液相色谱法(UPLC)同时测定苦参功劳颗粒中苦参碱和盐酸小檗碱含量的方法。采用Acquity BEH C18(2.1 mm×100 mm, 1.7μm)色谱柱，以甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾溶液(用磷酸调节pH值至3.0)为流动相，梯度洗脱，流速为0.2 mL/min,柱温为30℃,检测波长为214 nm。苦参碱和盐酸小檗碱分别在12.04～48.17μg/mL、13.18～52.71μg/mL浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，相关系数(r)分别为1.0000、0.9999;准确度考察中苦参碱和盐酸小檗碱平均加样回收率分别为99.6%(RSD=1.0%,n=6)、98.9%(RSD=1.0%,n=6)。该方法具有良好的专属性、精密度及准确度，且操作简便、环境友好，可用于苦参功劳颗粒的质量控制。     

加味平胃口服液提取工艺研究

【目的】 确定加味平胃口服液的提取工艺。【方法】 采用L₉（3⁴）正交试验法对提取工艺进行研究。对含有挥发油的药材进行挥发油提取，药渣再混合其余药材进行水煎煮提取。在挥发油提取工艺中首先进行饮片粒度考察，选择合适的饮片大小，在此基础上选定溶剂倍量（A）、浸泡时间（B）和煎煮时间（C）3个因素，每个因素各取3个水平，进行正交试验；以挥发油的提取量为评价指标，对组方中苍术、厚朴、陈皮、木香和枳壳的挥发油提取工艺进行探索研究，并进行3次工艺验证。在水煎煮提取工艺中选定溶剂倍量（A）、煎煮时间（B）和提取次数（C）3个因素，每个因素各取3个水平，进行正交试验；以柚皮苷含量和苦参总碱含量（苦参碱+氧化苦参碱总含量）作为评价指标，对水煎煮提取工艺进行探索研究，并进行了3次工艺验证。【结果】 饮片粒度筛选结果显示，1~2 cm的饮片更合理。影响挥发油提取因素大小为煎煮时间（C）>浸泡时间（B）>溶剂倍量（A），挥发油提取工艺为8倍水，煎煮10 h；影响水煎煮提取因素大小为提取次数（C）>煎煮时间（B）>溶剂倍量（A），水煎煮提取工艺为8倍水，煎煮1.5 h，提取3次。【结论】 本研究通过试验验证得出了加味平胃口服液提取的具体方法、流程等，该工艺提取效率高、制备过程稳定可靠，可达到量产的工艺标准，具有重要的实用价值。