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转基因生物检测技术研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
转基因技术的发展,促进了转基因生物(genetically modified organisms,GMO)的数量、多样性不断增加,给GMO检测工作提出了新的挑战,同时也促进了GMO检测方法的发展。GMO检测新方法突破了传统方法中一次只能分析一个靶目标的限制,新方法一次可以检测多个靶目标,向高通量检测的方向发展。作者对最新报道的GMO检测方法作一概述,主要包括实时荧光PCR多靶分析方法,锁式探针-基因芯片方法、液相芯片方法,多重PCR-毛细管电泳方法,生物发光检测方法,以及为GMO检测提供方法决策的支持系统(DSS、GMO示踪)等。 相似文献
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建立牛结核病的γ-干扰素(BovIFN-γ)免疫学检测方法。本研究利用rBovIFN-γ抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,通过淋巴细胞杂交瘤技术及间接ELISA筛选制备抗BovIFN-γ的单克隆抗体,在McAb及多克隆抗体的基础上建立双抗体夹心ELISA,并进一步优化ELISA反应条件。结果表明,获得一株能稳定分泌抗BovIFN-γ McAb的杂交瘤细胞株A12E9,分泌单克隆抗体腹水效价为1∶107,属于IgG1亚类,具有良好的特异性;所建立的双抗体夹心ELISA方法,BovIFN-γ最低检测限为40 ng/mL,与其他蛋白不发生交叉反应,表现出良好的特异性。该方法为建立牛结核病的γ-干扰素诊断方法奠定了基础。 相似文献
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牛干扰素单克隆抗体的制备与初步鉴定 总被引:1,自引:1,他引:0
通过IPTG诱导的大肠埃希菌表达重组牛干扰素-γ融合蛋白(BovIFN-γ),利用GlutathioneSepharose 4 Fast Flow亲和层析柱进行融合蛋白的纯化,纯化后的融合蛋白BovIFN-γ作为抗原免疫Balb/c小鼠,经5次免疫后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,间接ELISA筛选,有限稀释法克隆亚克隆获得分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株,并通过ELISA方法对其抗体效价、特异性、亚类及稳定性进行鉴定。获得一株稳定分泌BovIFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞株A12E9,细胞培养上清和腹水效价可达1∶3 200和1∶160 000。 相似文献
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