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旨在建立一种以重组酶聚合酶扩增技术(RPA)为基础的快速检测方法,用于小鹅瘟病毒的快速检测。小鹅瘟是一种常见的水禽传染病,严重危害我国养鹅业的健康发展。为了快速准确对小鹅瘟进行诊断,减少该病的危害,本研究以小鹅瘟病毒VP3基因保守片段为靶点,利用重组酶聚合酶扩增技术(RPA)建立了一种准确高效的小鹅瘟病毒RPA恒温快速检测方法,并对检测方法的灵敏度、特异性进行评价,并与传统PCR和传统RT-PCR方法进行比较。结果表明,该检测方法具有较高的灵敏度,可检测到10 copies/μL的病毒核酸;具有良好的特异性,只特异性地扩增鹅细小病毒,而与鹅副黏病毒、鹅源鸭瘟病毒、小鹅流行性感冒病毒、鹅副伤寒病毒、大肠杆菌和曲霉菌均未发生交叉反应;同时该方法重复性检测的变异系数低于6%,具有很好的重复性。阳性符合试验表明该检测方法与荧光定量PCR符合率为99%。该方法可以很好地应用于小鹅瘟的大规模临床样本检测,为小鹅瘟病毒的高通量检测和流行病学调查提供技术手段。 相似文献
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我国是养鸡大国,鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征一直是危害我国养鸡业的重要传染病,目前防治这几种病的联苗尚不多见。用单苗防疫费时费力,而且多次免疫会对鸡群造成一定的应激,使生产性能下降。 相似文献
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香菇多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化及信息传导的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
实验研究了香菇多糖对肉鸡脾淋巴细胞转化率及细胞内信息分子一氧化氮(NO)、Ca2 及cAMP、cGMP的影响。发现香菇多糖能剂量依赖性促进脾淋巴细胞转化率及细胞内NO、Ca2 浓度,当作用时间为20min时,能增加cAMP和cGMP浓度,而当作用时间为60min,对cAMP和cGMP浓度无显著影响。以上结果提示,香菇多糖能显著提高脾淋巴细胞免疫功能,其作用是通过改变细胞内信息传导实现的。 相似文献
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HBx小鼠肿瘤细胞株的建立及初步鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
目的建立稳定、高效的HBxAg体外表达细胞株,以便进一步研究HBX基因和HBxAg的致癌作用及机理。方法用RT-PCR技术扩增出了HBX的cDNA,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1中,通过脂质体介导将pcD-NA3.1-HBX转染到小鼠肿瘤细胞株(EL4)中。结果RT-PCR及蛋白质印迹的实验结果表明,HBX基因在小鼠肿瘤细胞EL4细胞中得到了表达。结论本研究成功构建了表达HBx的小鼠肿瘤细胞株,为进一步研究HBX基因和HBx的致癌作用及机制奠定了实验基础。 相似文献