桉树精油在家禽生产中的应用研究进展

桉树精油是从桉树枝叶中提取的天然、挥发性和芳香性化合物的混合物，主要化学成分为1, 8-桉树脑、α-蒎烯、茨烯、柠檬烯等，具有抗菌杀菌、消炎、驱虫杀虫和提高机体免疫力等生物活性。桉树精油具有天然、无残留的特点，可作为一种良好的饲料添加剂应用于养殖生产中。桉树精油或桉树叶粉可以提高家禽的生长性能、蛋品质、疫苗免疫抗体水平，可以驱杀体内寄生物，提高抗应激能力，也可用于环境消毒和杀灭体外寄生物。文章介绍了桉树精油组分、生物活性及其在家禽生产中的应用研究进展，以期为桉树精油后续在动物生产中更深入地应用研究提供参考。     

猪IL-2真核表达质粒构建及对PRRSV-ORF5基因疫苗免疫佐剂作用的研究

本研究应用真核表达载体pcDNA3.1（＋）和猪白细胞介素2（IL-2）基因成功构建了IL-2的真核表达质粒（pcDNA-IL-2）,探讨了pcDNA-IL-2作为分子免疫佐剂对猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）ORF5基因疫苗（pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5）免疫猪的增强作用。经间接ELISA法、MTT比色法及流式细胞仪分别对pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪、pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪、pcDNA3.1（＋）空载体和灭菌水免疫对照猪的血清抗PRRSV抗体IgG、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4^＋和CD8^＋细胞比例进行检测,结果表明pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪的IgG含量、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4^＋和CD8^＋细胞比例与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪相比有显著差异（P〈0.05）。说明pcDNA-IL-2能显著增强pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫猪的体液和细胞免疫应答,可作为PRRSV基因疫苗的良好佐剂。     

应激诱发猪混合感染的诊治报告

2005年12月下旬，荆州某肉猪场存栏土种肉猪800多头，因转群、运输、天气骤变等原因诱发出现以高热，颈部皮肤点状出血，四肢、臀部发红，唇部皮肤先发红，后发绀，死前皮肤苍白为主要症状的疾病．发病率17．89％，死亡率19．12％，经诊断为应缴诱发的慢性猪瘟、附红细胞体病和弓形体病的混合感染。经过综合治疗，取得了较好的效果，现将诊治情况报告如下：     

不同剂量猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导仔猪细胞免疫的研究

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5基因疫苗(pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5)分别以200 ug,100 ug和50 ug 3种剂量肌肉注射免疫21日龄仔猪,同时设空载体对照和生理盐水空白对照.于免疫后7 d、15d、30d、45d、60d和70d采用流式细胞仪(FACS)和淋巴细胞增殖试验(MTT法)分别对免疫猪外周血中CIM+、CD8+T淋巴细胞数和淋巴细胞的转化功能进行检测.结果表明3个不同剂量的pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫仔猪后均能诱导产生良好的细胞免疫应答,实验组与对照组比较差异极显著(p<0.01)或显著(p<0.05).大剂量基因疫苗免疫仔猪的外周血T淋巴细胞的增殖能力及CD4+、CD8+百分含量高于中剂量和小剂量基因疫苗免疫的仔猪,表现出一定的量效关系.     

荷斯坦奶牛性控冻精与常规冻精应用效果比较分析

试验选择河北某奶牛场荷斯坦奶牛成母牛389头和月龄、体重适中的青年牛345头，随机分成两组，其中试验组有青年牛173头、成母牛208头，对照组有青年牛172头、成母牛181头；分别采用性控冻精和常规冻精配种，配种后60d内检查其受胎率，产后统计其母犊率；同时收集奶牛场1～12月使用性控冻精配种的所有青年牛每月的受胎率，产母犊率，流产率等数据。结果表明，青年牛和成母牛的性控冻精受胎率分别较常规冻精低11.34%(P <0.05)、10.03%(P <0.05)，同时青年牛的性控冻精受胎率较成母牛性控冻精受胎率高10.10%(P <0.05)，青年牛和成母牛的性控母犊率分别较常规冻精高43.65%(P <0.01)、39.91%(P <0.01)；通过对整个牛场青年牛4605头全年性控冻精受胎率观察，季节性对奶牛受胎率有一定影响，夏季7、8、9月份受胎率较低一些，但全年差异不显著，季节性对流产率影响不大，差异不显著。性控冻精用于奶牛繁殖具有较好的经济效益，特别是在青年牛中的应用具有较高的受胎率和产母犊率。     

动物寄生虫病学实验教学的探索与实践

实验教学是动物寄生虫病教学的重要组成部分,是将专业基础理论联系生产实际,培养、训练学生的实际操作能力、独立分析问题和解决问题能力的重要环节。近年来,在动物寄生虫病实验教学的改革过程中,长江大学动物科学学院动物寄生虫病课程组对动物寄生虫病学实验教学改革进行了积极的探索和实践,取得了较好的教学效果。     

基因枪与肌肉注射猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗诱导小鼠体液及细胞免疫的比较研究

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗（pcDNA—PRRSV—ORF5）以不同免疫途径（基因枪和肌肉注射）免疫BALB／c小鼠，以PBS和空载质粒pcDNA3．1（＋）为对照，采用流式细胞仪（FACS）、淋巴细胞增殖试验（MTT法）及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测。结果表明，pcDNA—PRRSV-ORF5基因疫苗接种小鼠后外周血对ConA有明显的反应性，试验组与对照组比较差异极显著（P〈0．01）或显著（P〈0．05），CD4^＋T淋巴细胞数在免疫后7d高于对照组（P〈0．01），CD8^＋T淋巴细胞在免疫后28d高于对照组，不同途径基因疫苗接种小鼠后均诱导小鼠产生PRRSV特异性IgG。在诱导细胞免疫方面，基因枪和肌肉注射各组间无明显差异；在诱导体液免疫方面，基因枪法优于肌肉注射。研究表明制备的pcDNA—PRRSV—ORF5基因疫苗免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的体液和细胞免疫应答，基因枪法较肌肉注射更能诱导体液免疫应答的产生。     

人工感染PRRSV仔猪肺和子宫细胞凋亡的电镜观察

应用透射电子显微镜对仔猪感染猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)后不同时期肺和子宫凋亡细胞的超微形态结构进行了观察。结果表明，PRRSV可诱导宿主肺和子宫发生典型的细胞凋亡，表现为细胞的超微形态结构随着病毒感染进程出现不同的特征性变化，早期(感染后第8h至第3d)凋亡细胞多表现为细胞体积缩小，细胞质密度增强，染色质浓缩，核仁解体，内质网扩张；中期(感染后第5d至第9d)凋亡细胞体积显著缩小，细胞膜突起，线粒体增多，有凋亡小体形成；晚期(感染后第10d以后)凋亡细胞形态多表现为凋亡小体降解和消失，少数凋亡细胞在凋亡晚期表现为坏死细胞。肺细胞凋亡主要发生于肺巨噬细胞和肺泡上皮细胞，子宫细胞凋亡主要发生于子宫内膜细胞和内膜腺细胞。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗肌肉注射诱导小鼠的细胞免疫

将猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF5基因疫苗（pcDNA—PRRSV—ORF5）以50、100、200μg 3个剂量肌注免疫BALB／c小鼠，以PBS和空载体质粒pcDNA为对照，采用流式细胞仪（FACS）、淋巴细胞增殖试验（MTT法）分别时小鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋ T淋巴细胞数和淋巴细胞转化功能进行了检测。结果，3个剂量的pcDNA—PRRSV—ORF5接种小鼠后，其外周血都对ConA有明显的反应性。试验组与对照组比较差异极显著（P〈0．01）或显著（P〈0．05），CD4^＋ T淋巴细胞数在免疫后7d高于对照组（P〈0．01），CD8^＋ T淋巴细胞在免疫后28d高于对照组，大剂量基因疫苗免疫小鼠的细胞免疫应答高于中、小剂量。结果表明，pcDNA—PRRSV—ORF5免疫小鼠能够诱导机体产生良好的细胞免疫应答，并表现一定的剂量依赖性。     

寡核苷酸探针原位检测石蜡切片中PRRSV核酸

根据GenBank收录的美洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ATCCVR-2332株ORF6和ORF7基因序列，用O1igo软件设计并合成大小为37bp的寡核苷酸探针，经生物素标记后，成功建立了原住检测石蜡组织切片中PRRSV核酸的方法。该探针能检测到56PgPRRSV核酸的RT—PCR产物DNA，能特异检测出PRRSV核酸及其PCR产物，而对猪瘟病毒（HCV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪乙脑病毒（JEV）的核酸呈阴性反应。应用该方法检测PRRSVSC-1株人工感染的28日龄仔猪，在感染后7d即可在肺脏、肾脏、扁桃体、胸腺、肺门淋巴结、十二指肠和大脑检测到PRRSV核酸。该法可用于仔猪PRRSV感染的诊断和组织中核酸的定位及分布研究，也可用于甲醛固定组织的回顾性诊断。