猫多能性基因慢病毒表达载体的构建与鉴定

从含有猫Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc的质粒中获取目的基因,将目的基因与携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒载体LV5进行定向连接,构建慢病毒表达载体LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4、LV-c-Myc,将其连接产物分别转化至细菌感受态细胞中,经筛选阳性克隆、酶切鉴定后测序,通过lipofectamine2000介导转染293T细胞对慢病毒进行包装并测定病毒滴度,探讨猫多能性基因Oct4、Sox2、Klf4及c-Myc慢病毒载体的构建与包装。结果表明:经双酶切鉴定及测序分析,成功构建并包装出LV-Oct4、LV-Sox2、LV-Klf4及LV-c-Myc慢病毒载体,基因测序结果与目标序列完全一致,且病毒滴度均达到107 TU·mL-1以上。说明成功地构建了猫多能性基因慢病毒表达载体,获得稳定产生慢病毒颗粒的包装细胞株。     

猫实验动物标准化的研究进展及探讨

猫作为实验用动物在医学、生物学等研究领域的应用越来越广泛,在某些实验中,如降压实验、作为弱视动物模型及高眼压动物模型等方面具有不可替代的作用。随着国内科研对猫使用量的增多,实验用猫多是从商贩或"收购型饲养场"购买,其来源混杂,遗传、年龄、微生物和寄生虫等携带情况不明,实验重现性差,实验结果存在未知因素的影响。我国在猫标准化方面建设缓慢,已经无法适应实验动物学科的发展及人们对实验动物伦理与福利的需求。本文结合吉林省实验用猫使用情况,对猫实验动物标准化的研究进展及应用前景进行探讨。     

秋水仙素条件优化及其对牛卵细胞c-mos基因表达水平的影响

为探讨秋水仙素对牛卵母细胞产生细胞膜突起的最适条件与对减数分裂纺锤体组装起重要调控作用的母源基因c mos表达量的影响,设计如下试验:比较试验组(Deme+ sucrose处理)与对照组1(Deme单独处理)和对照组2(sucrose单独处理)的卵母细胞细胞膜突起率变化.用荧光定量检测最适合秋水仙素浓度处理的卵母细胞与空白组和对照组母源基因c-mos基因表达量的差异.结果表明,用0.6 mg/L秋水仙素+0.05 mol/L蔗糖处理牛卵母细胞1h细胞膜突起率达72.0％,要显著高于对照组1(13.0％)和对照组2(P＜0.05);0.6 mg/L秋水仙素浓度优于其他质量浓度(P＜0.05).秋水仙素加蔗糖处理的卵母细胞的母源基因c-mos表达高于蔗糖处理组和空白组c-mos基因的表达(P＜0.05).     

新农科背景下研究生“动物繁殖理论与生物技术”课程的教学改革

“动物繁殖理论与生物技术”作为农业领域硕士研究生的一门主干专业必修课，是学生从事专业相关工作的基础。随着时代的发展和科技的进步，动物繁殖理论与技术不断更新，要求教师在教学过程中不断扩充新知识、新技术，从而不断提高研究生的知识储备。为了切实提高“动物繁殖理论与生物技术”课程教学质量，文章从丰富教学内容、提高教师业务能力、多样化教学模式、完善教学效果评价体系方面进行探讨，以期取得更好的教学效果。