拟南芥TUA2参与ABA胁迫下的种子萌发过程

【目的】利用反向遗传学研究拟南芥TUA2与ABA途径相关基因的相互关系以及对种子萌发的影响。【方法】采用PCR、Tail PCR和RT-PCR技术对来自ABRC的T-DNA插入TUA2突变体进行插入位点的鉴定和转录活性的分析;利用转基因技术获得TUA2超表达植株;检测了含不同浓度ABA的MS培养基中各突变体和TUA2超表达植株的种子萌发;通过RT-PCR检测了突变体中ABA途径相关基因HAB、ABI1、RD22和P5CS的表达变化。【结果】突变体tua2-1和tua2-2的T-DNA插入位点均位于TUA2的启动子区,且二者的TUA2表达量均升高。在含有ABA（0.8 μmol•L-1）的MS培养基中,突变体和转基因等5个株系的种子萌发延迟,播种第5天萌发率在6%-18%,相同条件下的野生型种子萌发率为76%;ABI1和HAB在TUA2超表达体中的表达明显低于野生型,受ABA诱导后被诱导表达的程度也远低于野生型。【结论】TUA2可能参与了ABA信号途径对种子萌发过程的调节。     

拟南芥磷酸肌醇特异性磷脂酶CAtPLC15亚型基因的组织表达定位

采用PCR扩增的方法,得到AtPLC151 380 bp的启动子片段,构建了带动报告基因GUS表达的双元载体,转化拟南芥并筛选阳性转基因植株。通过组织化学染色分析AtPLC15基因在拟南芥中的表达情况,结果显示AtPLC15基因在拟南芥幼苗的子叶、下胚轴、根尖和柱头处有表达,在成熟花药中表达量极少,而在幼苗子叶和根尖中有极高的表达量。对该基因的功能有了新的认识,为阐述其功能机理提供了重要研究基础。     

生物学研究性学习教学模式的建构

研究性学习是新课程改革中的重要内容,它旨在培养学生的创新精神,提高学生的综合素质。介绍了研究性学习的含义特点,研究性学习的组织形式,研究性学习教学模式建构的背景、指导思想、教学目标,教学模式及操作程序,并以生物学研究性实验教学为例具体对研究性教学给予了指导性建议。     

拟南芥微管蛋白TUA2基因表达载体的构建及亚细胞定位

本研究以拟南芥(Arabido psis thaliana.Columbia ecotype)为材料,运用PCR方法从其基因组中扩增得到了TUA2基因的序列,将其连接到表达载体GV3101上,构建成双元载体.把该质粒用基因枪转化法转化洋葱表皮,激光共聚焦显微镜观察显示,TUA2基因在细胞膜上表达.该结果为进一步研究TU...     

乙烯在植物中的信号转导

乙烯是所有植物激素中结构最简单的一种,它对植物的代谢调节可贯串其整个生活周期.作为信号物质,它的生物合成主要由ACC合成酶和ACC氧化酶调控.通过对拟南芥中一系列乙烯反应的突变体的分析,人们掌握了很多在乙烯信号转导中发挥作用的生化组分.乙烯受体与细菌的双组分调节系统结构相似,乙烯与之结合后,调节与Raf激酶极为相似的CTR1,进而将信号传递给下游的EIN2.EIN3是一个转录因子,可结合到与乙烯反应相关的基因的启动子的特殊序列上,激活这些基因并使其转录,从而使植株出现与乙烯反应相关的诸多表型特征.     

《细胞生物学》实验的教学改革初探

为了使实验教学更加符合理论教学的实际需要、充分配合课堂教学,对《细胞生物学》实验的教学实验内容进行调整优化,加大了实验教学学时比重。通过对实验组合和结构进行优化,适时安排问题与讨论时间,培养了学生的科学兴趣、激发了学生的学习欲望,充分调动了学生的学习积极性。在实验过程中积极运用现代化电教手段辅助教学,理论与实验操作技巧并重。同时,积极申请经费来源,努力提高自身优势,向开放性实验室的建设迈进。     

拟南芥AtCCaP2基因缺失突变体的鉴定及表型观察

本研究拟利用反向遗传学研究AtCCaP2基因的功能。通过PCR及RT-PCR的方法筛选和鉴定了拟南芥AtCCaP2基因的T-DNA插入突变纯合体atccap2,该纯合体AtCCaP2基因表达缺失。RT-PCR分析显示该基因在拟南芥雌雄蕊等生殖器官中有较多的表达。通过对生长表型的观察发现atccap2突变体出现早花现象,抽薹时间较野生型早3d,显示该基因可能参与了拟南芥的早花表型。     

拟南芥种子萌发及幼苗生长对干旱和NaCl胁迫的响应

为获得胁迫因子处理拟南芥的最佳浓度及其生长的临界胁迫浓度,以期进一步采用拟南芥基因缺失突变体,以PEG模拟干旱胁迫和NaCl作为盐胁迫因子,在室内培养条件下探讨了拟南芥种子萌发、幼苗生长、根长及渗透调节物质丙二醛和脯氨酸含量的变化。结果发现:干旱和高盐胁迫影响种子萌发的半抑制浓度分别为10%(PEG-6000)和150 mmol/L;幼苗生长的临界值分别为25%(PEG-6000)和250 mmol/L NaCl。随着干旱胁迫和NaCl胁迫程度的增加,丙二醛及脯氨酸的含量均明显增加。表明随着胁迫条件的加重,拟南芥幼苗质膜受到氧化性伤害,并通过合成脯氨酸等渗透调节物质的机制对胁迫因子产生响应。