一种快速简便高通量筛选重组克隆的方法

介绍了一种极其简单、快速、廉价、可靠的从cDNA文库或者转化平板上高通量筛选重组质粒的方法.将细菌培养液或者转化平板上的单菌落直接用1％SDS一步裂解,琼脂糖凝胶快速电泳,根据DNA迁移速率判断是否重组质粒.裂解上清液可以稀释后直接用作PCR模板,扩增出目的基因.利用这种方法可以在短短的几个小时内完成几百个重组质粒的筛选.     

玉米CCCH基因家族鉴定及分析

CCCH锌指蛋白与植物生物和非生物胁迫、生长发育及抗病性密切相关。以玉米为材料,应用在线工具与公共数据库,共鉴定出63个CCCH基因,命名为Zm CCCHs,进一步对玉米与水稻、拟南芥、小立碗藓的CCCH基因进行生物信息学分析。结果表明:玉米的CCCH家族基因在染色体上呈不均匀分布,蛋白质氨基酸序列长度在110～962 aa之间。Zm CCCHs基因具有相对保守的结构,即包含CCCH结构域、WD40结构域、C2H2结构域、C3HC4结构域,CCCH蛋白结构中含有2个α螺旋和4个β折叠结构域。进化树分析表明玉米CCCH蛋白与水稻CCCH蛋白序列具有较高的同源性。上述结果为深入研究该基因家族的功能与表达调控提供了参考信息。