一种快速简便高通量筛选重组克隆的方法 |
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引用本文: | 董冰雪,李玉英,叶壮清,耿三春,李运会,宋雅菲,刘伟.一种快速简便高通量筛选重组克隆的方法[J].江苏农业科学,2012,40(6):41-42. |
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作者姓名: | 董冰雪 李玉英 叶壮清 耿三春 李运会 宋雅菲 刘伟 |
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作者单位: | 南阳师范学院生命科学与技术学院,河南南阳,473061 |
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基金项目: | 河南省科技攻关计划(编号:112102210385);南阳师范学院高层次人才科研启动费(编号:zx20110007) |
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摘 要: | 介绍了一种极其简单、快速、廉价、可靠的从cDNA文库或者转化平板上高通量筛选重组质粒的方法.将细菌培养液或者转化平板上的单菌落直接用1%SDS一步裂解,琼脂糖凝胶快速电泳,根据DNA迁移速率判断是否重组质粒.裂解上清液可以稀释后直接用作PCR模板,扩增出目的基因.利用这种方法可以在短短的几个小时内完成几百个重组质粒的筛选.
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关 键 词: | 重组质粒 高通量筛选 一步裂解 DNA迁移速率 PCR |
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