基于核糖体DNA第二内部转录间隔区(ITS2)序列鉴定四季青及其近缘种和混伪品

中药材四季青(Ilicis Chinensis Folium)的基原植物冬青(Ilex chinensis)是重要的园林观赏物种。利用DNA条形码技术可以快速、准确鉴定四季青及其近缘种和混伪品。本研究以冬青、铁冬青(Ilex rotunda)、秤星树(Ilex asprella)、枸骨(Ilex cornuta)和女贞(Ligustrum lucium)等37份植物样本为实验材料,提取全基因组DNA,扩增核糖体DNA第二内部转录间隔区(internal transcribed spacer 2,ITS2)序列并进行双向测序。测序结果利用Codon Code Aligner 4.2.7进行序列拼接,获得高质量ITS2序列。同时从Gen Bank中获得28条冬青的同属近缘种以及混伪品女贞、四川山矾(Symplocos setchuensis)的ITS2序列。基于隐马尔科夫模型(hidden Markov model,HMM)注释5.8S和28S,获得完整的ITS2区域,进而应用MEGA6.0(molecular evolutionary genetics analysis)进行冬青种间和种内序列分析,计算种内种间K2P(Kimura 2-parameter)遗传距离,构建邻接树(neighbor-joining tree,NJ tree)。结果表明,琼脂糖凝胶电泳得到清晰明亮的均一条带,说明利用通用的ITS2引物可以成功扩增到用于测序的PCR产物。通过PCR产物测序、数据处理和序列分析可知,冬青种内ITS2长度经过比对后为239 bp,全部样品的种间ITS2比对后长度为269 bp。冬青种内有4个变异位点以及6个单倍型,种间有143个变异位点,远远多于其种内变异位点。MEGA6.0分析结果表明,种间最小K2P遗传距离(0.094)大于种内最大K2P遗传距离(0.013)。邻接树显示,女贞和四川山矾分别以100%的自展支持率分别聚类,表现出良好的单系性,冬青属物种聚为一大支。冬青在冬青属下可以单独聚为一支,可以进行区分。冬青属其他物种以同一亚属聚为一支。研究结果表明,作为一种快速、准确、简便的分子生物学鉴定方法,ITS2可以应用于冬青及其近缘种和混伪品的鉴定,同时对于准确鉴定冬青属物种亦有巨大潜力,可为冬青属植物在临床上的用药安全和开发应用提供科学依据。     

巨菌草不同生长时间的常规营养成分及氨基酸含量测定

为了解巨菌草不同生长时间的营养变化规律,分别在生长90d、130d、170d和210d时进行取样,测定其常规营养成分及氨基酸含量。结果表明:粗蛋白含量在90d时最高,为9.19%,并随生长时间的延长极显著下降(P0.01);粗纤维、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量均随生长时间的延长而增加,中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维含量90d、130d均与170d和210d间差异极显著(P0.01),而170d与210d中性洗涤纤维间差异显著、酸性洗涤纤维间差异不显著(P0.05);无氮浸出物含量随生长时间延长变化差异不大(P0.05)。总氨基酸含量随生长时间的延长而下降,在90d时总氨基酸含量最高,为7.069%;总氨基酸/粗蛋白、总必需氨基酸/总氨基酸均呈现高-低-高变化趋势。     

福建省狼尾草属种质资源RAPD鉴定分析

采用RAPD标记分析了18份狼尾草属种质的遗传多样性及亲缘关系,结果表明:19条引物在18份材料中共扩增出207条条带,其中176条具有多态性,多态比率85％,各引物扩增条带数为6～15条不等,遗传距离的变幅为0.0819～1.011,平均为0.4713;遗传相似系数变幅为0.4907～0.9352,平均为0.6871.聚类结果表明:遗传距离以0.7为值大致可以分为4类:巨菌草、热研4号王草、桂草1号王草、桂牧1号杂交象草、紫象草聚为一类;杂交狼尾草和细茎象草分别单独聚为一类;剩余的品种聚为第四类.     

辅酶Q10改善LPS诱导小鼠急性肺损伤的效应分析

本研究旨在探究辅酶Q10(coenzyme Q10, CoQ10)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)致小鼠急性肺损伤的保护作用及机制。选取8周龄的健康雄性C57BL/6小鼠72只，随机均分为6组：空白对照组(CON组，100μL玉米油)、CoQ10干预组(CHQ组，50 mg·kg^-1 CoQ10)、模型组(LPS组，100μL玉米油+LPS)、低剂量CoQ10处理组(LDQ组，2 mg·kg^-1 CoQ10+LPS)、中剂量CoQ10处理组(LMQ组，10 mg·kg^-1 CoQ10+LPS)和高剂量CoQ10处理组(LHQ组，50 mg·kg^-1 CoQ10+LPS)。通过灌胃的方式连续给予小鼠不同剂量的CoQ10或玉米油14 d,然后鼻内滴入50μL 1 mg·mL^-1 LPS溶液建立小鼠急性肺损伤模型。24 h后，处死小鼠，摘取左肺称重并烘干，计算肺组织湿干质量比(W/D);检测肺泡灌洗液(BALF)蛋白浓度、肺组织丙二醛(MDA)含量、活性氧(...