血散薯内生真菌的分离鉴定及其抗菌活性研究

从血散薯(Stephania dielsiana Y.C.Wu)中寻找活性内生真菌,为血散薯植物资源的保护及活性天然产物的开发提供依据,对其茎、叶中内生真菌进行分离鉴定,并研究其抗菌活性。结果表明,从血散薯茎、叶中共分离得到38株内生真菌,其中31株经形态学结合分子生物学的方法鉴定表明,其归为14个不同的属,包括链格孢属(Alternaria)、炭团菌属(Hypoxylon)、枝孢属(Cladosporium)、茎点霉属(Phoma)、镰刀属(Fusarium)、Stagonosporopsis、Ascomycete、毛壳菌属(Chaetomium)、拟盘多毛孢属(Pestalotiopsis)、弯孢霉属(Curvularia)、短梗霉属(Aureobasidium)、Annulohypoxylon、小光壳属(Leptosphaerulina)、刺盘孢属(Colletotrichum)。其中,优势属为链格孢属和茎点霉属。基于前期对峙拮抗预试验结果,选取14株内生真菌进行发酵培养,并测定其对9种植物病原真菌和10种动物病原细菌的抗菌活性。结果表明,内生真菌发酵产物粗提物对供试病原菌具有不同程度的抑制作用。其中,7株内生真菌(叶-8、Y-66、YB-12、J-12、J-34、J-36、J-55)的粗提物对5株或5株以上供试植物病原真菌具有明显抗菌活性。叶-8、J-12分别对玉米大斑病菌、金橘砂皮病菌表现出最佳的抗菌活性,EC_(50)值分别为0.063 1、0.006 2 mg/mL;J-34对甘蓝黑斑病菌、甘蔗凤梨病菌表现出最佳的抗菌活性,EC_(50)值分别为0.018 1、0.004 2 mg/mL。10株内生真菌的粗提物对金黄色葡萄球菌均具有抑制作用,MIC值介于0.500～10.000 mg/mL,4株内生真菌的粗提物对大肠杆菌具有抗菌活性,MIC值介于0.156～4.000 mg/mL。上述结果表明,血散薯茎叶中存在丰富的内生真菌资源,且其次生代谢产物具有广谱抗菌活性。     

华灰莉木提取物对柑橘全爪螨的杀螨活性

以华灰莉木为试材,采用溶剂冷浸法提取植物成分,溶剂液-液萃取法对植物成分进行初步分离,Potter喷雾法测定杀螨活性,研究华灰莉木提取物和初步分离物对柑橘全爪螨的影响。结果表明:华灰莉木叶和枝条甲醇提取物对柑橘全爪螨雌成螨有较高的触杀毒力,致死中浓度(LC50)分别为5.5334g/L和3.9682g/L。叶的杀螨活性物质主要集中在水萃取物中,属于极性强的物质;枝条的杀螨活性物质主要集中在石油醚萃取物中,属于极性弱的物质。叶提取物的水萃取物和枝条提取物的石油醚萃取物对柑橘全爪螨雌成螨的LC50分别为3.2970g/L和1.7372g/L。     

53种植物提取物对褐飞虱的杀虫活性测定

用点滴法测定了53种植物66种提取物对褐飞虱的触杀活性。48h校正死亡率大于80％的植物提取物有10种,校正死亡率为50％～80％的植物提取物有10种。进一步测定了有触杀活性的12种植物提取物对褐飞虱的触杀毒力,其中银杏（Ginkgo biloba）叶、厚果鸡血藤（Millettia pachycarpa）种子、广西地不容（Stephania kwangsiensis）块根、黄连（Coptisc胁船瑚括）根的触杀毒力高,LD50值分别为0．0129,0．2519,1．5794和2．0578μg/头。     

53种植物提取物对褐飞虱的杀虫活性测定

用点滴法测定了53种植物66种提取物对褐飞虱的触杀活性.48 h校正死亡率大于80%的植物提取物有10种,校正死亡率为50%～80%的植物提取物有10种.进一步测定了有触杀活性的12种植物提取物对褐飞虱的触杀毒力,其中银杏(Ginkgo biloba)叶、厚果鸡血藤(Millettia pachycarpa)种子、广西地不容(Stephania kwangsiensis)块根、黄连(Coptis chinensis)根的触杀毒力高.LD50值分别为0.012 9,0.251 9,1.579 4和2.057 8μg/头.     

罗默碱对梨锈病菌抑制机理的初步研究

以生长速率法测定罗默碱对梨锈病菌菌丝生长的抑制作用,以倍比稀释法测定罗默碱最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MFC),以外渗电导法测出罗默碱对梨锈病菌菌丝体细胞膜渗透性的影响,并且测定了罗默碱对菌体可溶性蛋白含量的影响,探讨罗默碱对梨锈病菌的抑制活性及抑制机理。结果表明:罗默碱对梨锈病菌有较强的抑制活性,且浓度越高,抑制作用越强,其MIC为0.25 g/L,MFC为0.5 g/L;用0.2 g/L的罗默碱处理梨锈病菌菌丝体,结果显示其细胞膜的相对渗透率为53.49%,高出对照21.82%;用0.2 g/L的罗默碱处理梨锈病菌菌丝体,其蛋白质含量为2.5 mg/g,对蛋白质合成的抑制率为60.06%。说明罗默碱对梨锈病菌具有较强的抗菌作用;可影响梨锈病菌菌丝体细胞膜的渗透性和可溶性蛋白的含量。     

不同球孢白僵菌菌株生物学特性与其对家蚕致病力的关系(英文)

[目的]探讨球孢白僵菌菌株的生物学特性与其对家蚕致病力的关系,为家蚕白僵病的防治提供科学依据。[方法]从我国各地收集6个白僵菌杀虫剂,并以广西养蚕区采集3个僵蚕样品,对从中分离纯化的菌株进行形态观察和分子鉴定,同时对家蚕进行致病力测定,比较各菌株菌落直径、产孢量、胞外蛋白酶产生水平等生物学特征指标的差异。[结果]获得的9个分离菌株均为球孢白僵菌(Beauveria bassiana Vuillemin);各菌株对家蚕都有较强致病力,且致病力有一定差异;各菌株菌落生长直径、产孢量及胞外蛋白酶活性均存在较大差异,并与其对家蚕的致病力之间存在相关关系。[结论]各菌株产孢量和胞外蛋白酶活性与其对家蚕的致病力之间存在显著正相关。     

血散薯块根内生真菌Periconia igniaria Stdif10发酵产物的生物活性研究

Periconia igniaria Stdif10是从血散薯块根中首次分离得到的内生真菌,为了解该内生真菌的生物学活性,采用滤纸药膜法、菌丝生长速率法和带药培养基涂布法分别测定了该菌发酵产物不同溶剂萃取物的抗虫活性、抗真菌活性、抗细菌活性。结果表明,发酵产物的石油醚萃取物表现出较好的抗虫和抗菌活性。其中,对玉米象具有显著的触杀活性,处理72 h的LC_(50)值为2.295 1 mg/cm~2。石油醚萃取物对玉米象还具有较好的驱避活性,处理48 h后在3.932、7.863、15.726 mg/cm~2 3个浓度梯度下对玉米象的驱避率均大于62%。石油醚萃取物对辣椒炭疽病菌、水稻胡麻叶病菌、茶轮斑病菌、甘蓝黑斑病菌、甘蔗凤梨病菌、烟草黑胫病菌、玉米大斑病菌、金橘砂皮病菌、贡柑链格孢菌9种供试植物病原真菌具有不同程度的抑制作用,其中对辣椒炭疽病菌、烟草黑胫病菌、金橘砂皮病菌3种病原真菌具有较好的抗菌活性,处理72 h的EC_(50)值分别为0.117 3、0.071 6、0.054 7 mg/mL。石油醚萃取物对产气肠杆菌、铜绿假单孢菌、大肠杆菌、普通变形杆菌、伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、炭疽杆菌10种动物病原细菌具有显著的抗菌活性,处理24 h的MIC值为0.125～0.500 mg/mL。上述结果表明,血散薯内生真菌Periconia igniaria Stdif10次生代谢产物具有显著的抗虫和广谱的抗菌活性,且石油醚萃取物活性最佳(活性物质极性较低)。     

广西地不容内生真菌疣孢漆斑菌DBR-11的抑菌活性

为了研究广西地不容内生真菌的抑菌活性,从广西地不容块根中分离纯化出18株内生真菌,采用拮抗试验测定了其对10种植物病原真菌的抑制活性,发现疣孢漆斑菌DBR-11对多数供试菌有很好的抑制活性。进一步测定了DBR-11菌株发酵产物的抑菌活性,发现发酵产物的乙酸乙酯萃取物对病原菌的抑制活性较高,质量浓度为5 g/L时,对10种植物病原真菌的抑菌率均在90%以上,有效中浓度(EC50)为0.007 2~0.446 5 g/L,其中对烟草黑胫病菌的毒力最高,EC50值为0.007 2 g/L;发酵产物的乙酸乙酯萃取物质量浓度为2 g/L时,72 h对15种供试动物病原菌中的7种能完全抑制,最低抑制浓度(MIC)为0.062 5~0.25 g/L,其中对痢疾志贺氏菌的抑制活性最高,MIC值为0.062 5 g/L。DBR-11发酵产物乙酸乙酯萃取物有广谱的抗菌活性,具有潜在的应用价值。     

广西银杏冰雪灾害调查及治理技术

2008年1-2月广西银杏产区遭受历史上罕见的冰雪灾害,银杏树主侧枝因雨雪结冰重压断裂的损伤较大,调查结果表明:(1)海拔100～400 m的断裂损伤轻微;(2)海拔401～600 m的银杏大树断裂损伤率为100%,单株主侧枝断裂损伤在50%以上的为2.302 5万株,占银杏大树的30.46%;银杏幼树断裂损伤率为75%～100%,单株主侧枝断裂损伤在50%以上的为142.225万株,占银杏幼树的13.17%;(3)海拔601 m以上的断裂损伤严重,断裂损伤率达100%,其中,银杏大树单株主侧枝断裂损伤在50%以上的为1 037株,占该海拨株数的96%,是银杏大树的1.37%,银杏幼树单株主侧枝断裂损伤均在80%以上,为28.34万株,占该海拨株数的100%,是银杏幼树的2.62%.通过调查分析,提出了银杏冰雪灾害的治理技术.     

石菖蒲提取物及其初步分离物的抑菌活性研究

[目的]研究石菖蒲对动物病原菌的抗菌活性。[方法]采用滤纸片法和带药培养基涂布法测定了中药植物石菖蒲茎和叶甲醇提取物对13种动物病原菌的抑菌活性;采用液-液萃取法对石菖蒲茎提取物的抑菌活性成分进行初步分离,并测定各萃取物的抑菌活性。[结果]用带药培养基涂布法测定,石菖蒲茎提取物对表皮葡萄球菌、藤黄微球菌、溶壁微球菌、蜡样芽孢杆菌、痢疾志贺氏菌、伤寒杆菌、巨大芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌9种供试菌有较好的抑菌作用,其最低抑制浓度（MIC值）分别为1.5、2.5、3.5、2.0、1.5、2.5、2.5、3.5、2.5g/L,对变形杆菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和白色念珠菌4种病原菌在样品浓度为10g/L时无抑菌活性;石菖蒲叶提取物的抑菌活性较差,在浓度为10g/L时,对痢疾志贺氏菌和蜡样芽孢杆菌在72h有抑菌活性,对其余供试菌无抑菌活性。用滤纸片法测定,结果与用带药培养基涂布法基本一致,但抑菌圈较小。用1.0g/L的各萃取物样品处理供试病原菌72h,正丁醇萃取物对9种供试病原菌有抑菌作用,石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和水萃取物无抑菌作用。[结论]中药植物石菖蒲对多种动物病原菌具有抑菌活性,茎的抑菌活性高于叶,抑菌活性物质主要存在于正丁醇萃取物中。