甲基硫茵灵及其代谢物在不同种植模式黄瓜和土壤中的残留

采用液质联用仪比较分析了3个不同种植区域（江苏南京、广西南宁和湖南长沙）露地和大棚两种种植条件下黄瓜和土壤中甲基硫菌灵及其代谢物多菌灵的残留动态,同时对黄瓜中的最终残留量进行了比较分析。施药后,甲基硫菌灵在黄瓜和土壤中均能很快转化为多菌灵[施药后1 d甲基硫菌灵未检出（〈0.01 mg·kg-1）],多菌灵在露地黄瓜和土壤中的原始沉积量均低于大棚。3个试验点露地黄瓜中的半衰期分别为2.3、1.4 d和1.4 d,在大棚黄瓜中的半衰期分别为2.6、1.7 d和2.0 d。在3个试验点露地土壤中的半衰期分别为1.6、1.7 d和2.3 d,在大棚土壤中的半衰期分别为2.3、2.0 d和2.3 d。最终残留试验在最后一次施药后1 d采样时,大棚、露地黄瓜中的甲基硫菌灵均未检出（〈0.01 mg·kg-1）,多菌灵在3个试验点露地黄瓜中的最终残留量为0.014~0.162 mg·kg-1,而在3个试验点大棚黄瓜中的最终残留量为0.121~0.561 mg·kg-1。参照我国所制定的黄瓜中多菌灵的MRL（0.5 mg·kg-1）,露地种植方式下所有处理黄瓜中甲基硫菌灵代谢物多菌灵的最终残留量均符合国家标准的规定,但大棚种植方式下其残留量有超标的风险。     

白术黑斑病菌对甲基硫菌灵和腐霉利的抗性检测及对咪鲜胺敏感性基线的建立

黑斑病是影响白术种植的主要病害之一,2015—2017年从浙江省磐安、天台、新昌和嵊州4地采集、分离得到137株白术黑斑病菌Alternaria alternata,采用菌丝生长速率法检测其对甲基硫菌灵和腐霉利的抗性。结果表明:供试的黑斑病菌群体 (n = 137) 对甲基硫菌灵的高水平抗性频率为77.4%,中等水平抗性频率为22.6%,未检测到敏感菌株;对腐霉利的抗性频率为20.4%,含21株低水平抗性菌株和7株中等水平抗性菌株。7种杀菌剂的室内毒力测定结果表明:咪鲜胺对白术黑斑病菌的活性最高,EC₅₀值为0.15 mg/L。供试的137株白术黑斑病菌对咪鲜胺的EC₅₀值分布在0.05~0.87 mg/L之间,平均EC₅₀值为 (0.29 ± 0.11) mg/L,可作为敏感性基线。     

香荚兰镰刀菌根腐病药剂毒力测定及幼根接种防治试验

在ＰＤＡ含毒介质上的试验表明,苯莱特（５０％ＷＰ）、多菌灵（５０％ＷＰ）、甲基托布津（７０％ＷＰ）抑菌效果最好,稀释３０万倍的药液对尖孢镰刀菌抑菌率分别为１００％、９１．９％、６７．９％,而粉锈灵（１５％ＷＰ）３０００倍液,抑菌率仅为７０．１％;苯莱特、粉锈灵１５００倍液对腐皮镰刀菌抑菌率仅为９４．４％和１４．０％。苯莱特和粉锈灵对尖孢镰刀菌的抑菌效果明显高于腐皮镰刀菌。抑菌圈法试验,多菌灵、苯莱特５００～１０００倍液对腐皮菌的防效又优于尖孢镰刀菌,而粉锈灵对２种镰刀菌均不产生抑菌圈。香荚兰幼根接种药效试验,粉锈灵对尖孢镰刀菌防效最好（５６．６％）,多菌灵、甲基托布津次之（５１．６％、５０．９％）,而苯莱特较差（４０．４％）。粉锈灵１０００倍液浸泡１ｈ和盆栽施药,均对香荚兰幼根产生药害。     

杀菌剂对沙打旺种子萌发和幼苗生长的短期影响

病害是导致沙打旺(Astragalus adsurgens)草地产量下降的主要原因之一。本研究用杀菌剂对沙打旺种子进行预处理,在培养皿和盆栽两种培养条件下模拟沙打旺种子在自然环境中受到不同病原真菌侵染后的萌发和生长状况,探讨杀菌剂预处理的作用和效果。结果表明,人工接种病原菌后,经杀菌剂处理的种子,其发芽率,植株的株高、根长和干重较无菌水处理种子显著提高(P0.05),而发病率、死亡率和平均病情指数则相应地显著降低(P0.05)。不同杀菌剂的防治效果有所不同,在多菌灵、代森锰锌和甲基托布津3种杀菌剂中,代森锰锌预处理防治效果最好。     

赤霉病杀菌剂混合比例的单形重心设计研究

采用单形重心设计法研究了多菌灵、三唑酮、甲基硫菌灵不同混合比例防治小麦赤霉病。在抑菌率大于80%的约束条件下,从3种供试药剂任意两种混合的方案中筛选出27种优化混合比例。     

高效液相色谱法测定水稻及土壤中甲基硫菌灵和多菌灵

建立了一种同时测定甲基硫菌灵和多菌灵在水稻(Oryza sativa L.)及土壤中残留量的高效液相色谱分析方法.样品用丙酮与水混合液提取,经弗罗里硅土柱净化后,采用SunFireTM C18色谱柱,甲醇-水(50∶50,V/V)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量5μL,在270 nm波长下测定.甲基硫菌灵和多菌灵在0.10～10.00 mg/L间回归方程分别为:y=1.216 3+4.909 7x、y=3.351 2+8.770 0x,相关系数分别为0.998 8、0.998 4;水稻中甲基硫菌灵和多菌灵平均回收率分别为79.31％ ～93.26％、86.87％ ～95.17％,相对标准偏差分别为3.08％～7.71％、3.49％～7.86％;土壤中甲基硫菌灵和多菌灵平均回收率分别为89.48％～92.60％、96.50％～101.30％,相对标准偏差分别为5.25％～7.72％、4.05 ％～7.15％.该分析方法简单、快速、灵敏,具有良好的准确度和精密度,适用于常规分析.     

杀菌剂对甘薯致病菌Hypocrea sp. SP-4和Rhizopus stolonifer SP-1生长影响研究

为了研究杀菌剂对甘薯致病菌Hypocrea sp. SP-4和Rhizopus stolonifer SP-1生长的抑制效果,本文从腐烂的甘薯块根中分离到的匍枝根霉SP-1（Rhizopus stolonifer SP-1）和Hypocrea sp. SP-4的孢子接种在含有不同杀菌剂浓度的PDA培养基上,在13℃和28℃条件下培养。同时也将2种孢子接种在甘薯块根上,进行培养观察。结果表明：2株真菌低温条件下,在不含杀菌剂的培养皿上的生长速度明显比28℃条件下要缓慢些;甲基托布津和多菌灵对Hypocrea sp. SP-4和R.stolonifer SP-1生长抑制的稀释度分别为1000倍和500倍。在28℃条件下,2种杀菌剂对Hypocrea sp. SP-4都有良好的抑制效果,但对R.stolonifer SP-1抑制率,甲基托布津只有21%,多菌灵则有58%。在用杀菌剂抑制甘薯块根侵染的过程中还发现,甘薯块根在没有创伤的情况下,2株真菌在低温条件下不会引起腐烂,说明它们是通过伤口侵染甘薯块根的。综合几个指标可以得出：适度低温和避免甘薯块根出现伤口能够减少甘薯块根被真菌侵染。     

三种农药对龟纹瓢虫细胞色素P450基因表达的影响

为探究棉田常用杀菌剂、除草剂、植物生长调节剂对龟纹瓢虫的潜在影响,选取甲基硫菌灵、精喹禾灵、缩节胺对其成虫进行胁迫处理,分析其繁殖力与存活率变化及解毒酶的转录响应。经缩节胺、甲基硫菌灵和精喹禾灵处理后,龟纹瓢虫繁殖力和存活率均无显著性变化。从龟纹瓢虫基因组中鉴定出CYP307A1、CYP314A1、CYP345D2、CYP6BQ22、CYP9Z1和CYP9Z4共六个P450基因,蛋白序列结构分析发现其分别编码510、421、353、314、343和385个氨基酸,均包含P450结构域,且前三者属于CYP3家族、后二者属于CYP9家族,CYP6BQ22属于CYP6家族。利用实时荧光定量PCR技术检测了在不同农药处理下的上述基因表达量变化,结果表明,经甲基硫菌灵处理后,CYP307A1和CYP6BQ22表达量显著上调;经精喹禾灵处理后,CYP307A1、CYP345D2和CYP6BQ22表达量显著上调,CYP9Z1和CYP9Z4表达量显著下调;经缩节胺处理后,CYP307A1和CYP9Z1表达量显著上调。综上所述,虽然龟纹瓢虫经三种农药处理后生物学数据无显著性变化,但均可使部分P450基因表达上调,可能会促进龟纹瓢虫的解毒代谢效应。该研究为探究农药对龟纹瓢虫的潜在影响及其抗药性提供了重要证据。     

苹果轮纹病菌对甲基硫菌灵的敏感性基线

采用菌丝生长速率法测定了苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)对甲基硫菌灵的敏感性。结果显示,EC50处于0.206 7~9.066 5 mg/L之间,平均为3.883 6±2.097 9 mg/L,与甲基硫菌灵对5个野生海棠菌株的EC50平均值3.041 3±0.296 5 mg/L无明显差异。正态检验表明,76个苹果轮纹病菌菌株对甲基硫菌灵的敏感性符合近似正态分布,山东省未出现产生抗药性的苹果轮纹病菌菌株,EC50平均值3.883 6±2.097 9 mg/L可作为苹果轮纹病菌对甲基硫菌灵的敏感性基线。     

长期施药果园中的苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵的敏感性

为了监测果园中苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵敏感水平的变化,采用菌丝生长速率法测定了采集自山东烟台地区和北京市昌平区,有较长施药史苹果园中的苹果轮纹病菌对戊唑醇和甲基硫菌灵的敏感性。结果表明:戊唑醇对连续施用戊唑醇5年、每年施药1~2次的果园中苹果轮纹病菌的EC_(50)为0.017 4~0.114 3μg/mL,即该类果园中苹果轮纹病菌对此药的敏感性仍然保持在较高水平,与野生菌株的敏感性非常接近,没有出现敏感性分化的抗药亚群体;甲基硫菌灵对连续施用甲基硫菌灵10年、每年施药2次的果园中苹果轮纹病菌的EC_(50)为0.846 4~4.677 4μg/mL,果园中苹果轮纹病菌与野生菌株相比EC_(50)平均值约上升3.15倍,最低值和最高值分别是已报道敏感性基线的1.19倍和6.59倍,没有出现敏感性发生显著分化的抗药性亚群体。