弱感光型优质杂交水稻新组合金龙优176

金龙优176是中国种子集团有限公司三亚分公司和肇庆学院利用不育系金龙A与恢复系中种恢176配组而成的弱感光型杂交水稻新组合。具有抗稻瘟病、米质优、耐寒性中等、丰产性好等特点,2018年7月通过广东省农作物品种审定委员会审定。     

利用组织培养技术研究枣和酸枣耐盐性

以“金丝小枣”、“泗洪大枣”和酸枣枣头枝为试材,研究了基本培养基含NaCl 0、25、75mmol/L对它们初代培养、继代培养、生根培养效果的影响及多代转接培养后的耐盐性变化.结果表明,培养基中NaCl含量为25 mmol/L对3种试材微茎段组培繁殖效果影响甚微,但NaCl含量达75 mmol/L则产生显著抑制作用;抑制作用的主要表现在不同培养阶段有所不同,总体上对根系生长发育的影响大于对地上部分的影响;无论在何种培养阶段,3种试材的耐盐性均为酸枣＞金丝小枣＞泗洪大枣;盐胁迫下随培养代数增多,3种试材的耐盐性均表现出增强趋势,耐盐性提升幅度枣大于酸枣,耐盐性弱的泗洪大枣的提升幅度大于耐盐性强的金丝小枣.     

基质配比对野生花卉状元红扦插繁殖的影响

为研究不同插穗基质对状元红[Clerodendrum japonicum(Thunb.)Sweet]扦插生长的影响,采用黄泥和腐殖质混合配比对野生花卉状元红进行扦插试验。结果表明,7种不同基质的扦插苗生根率、生根个数、根长、新梢长之间存在明显差异。高比例腐殖质混合基质扦插苗生根效果最佳,黄泥∶腐殖质=1∶3(V∶V)的混合基质最适合状元红插穗的生长,因此建议在生产上推广应用。     

韭菜干尖病综合防治试验

以蓼江村韭菜和太空绿韭两个韭菜品种为试验材料,研究了不同栽培方法对韭菜干尖症状的影响.研究结果表明:采用种子繁殖、夏季两次收割相隔期为25～28 d时适时采收、每隔5d轮喷防病药安克和阿米西达各1次、同时进行遮荫和水旱轮作,可起到明显预防韭菜干尖病的作用.     

H7 亚型禽流感病毒 HA 蛋白在Sf9 中的表达与纯化

【目的】真核表达 H7 亚型禽流感病毒（Avian influenza virus, AIV）HA 蛋白,为进一步制备 H7 亚型 HIV 亚单位疫苗,评价其免疫原性提供基础。【方法】首先根据草地贪夜蛾卵巢细胞（Spodoptera frugiperda clone 9, Sf9）的密码子偏嗜性,优化并合成 H7 亚型 AIV 的 HA 序列,将其克隆至穿梭质粒 pFastBac1 中;接着将重组HA基因的杆状病毒质粒转染至 Sf9 中,通过间接免疫荧光和 Western blots 试验鉴定重组病毒是否拯救成功;再通过 SYBR green 染料法荧光定量 PCR 试验,建立基于 gp64 基因的杆状病毒 qPCR 定量方法,筛选出在 Sf9 中表达 HA 重组蛋白的最佳感染复数和孵育时间;最后通过 His 镍株亲和纯化 HA 重组蛋白。【结果】表达 H7 亚型 AIV HA 蛋白的重组杆状病毒在 Sf9 盲传 3 代后,Sf9 开始出现肿胀、脱落、死亡等细胞病变,表明重组杆状病毒拯救成功;通过间接免疫荧光和 Western blots 试验发现,Sf9 内出现可与 HA 重组蛋白特异性结合的绿色荧光信号,特异性结合的 HA 重组蛋白条带大小约 70 kD 左右,与预期相符,且 HA 重组蛋白可与 H7 亚型 AIV 阳性血清反应,表明 HA 重组蛋白表达成功;以构建的 pUC19-gp64 质粒为标准,建立基于 gp64 基因的杆状病毒qPCR 检测方法,该方法在 1×103~1×108 copy/μL 间呈现良好的线性关系,标准曲线的相关系数 R2=0.993;利用qPCR 检测方法对杆状病毒液滴度进行定量,并通过 Western blots 试验筛选 HA 蛋白表达的最佳感染复数和孵育时间,结果显示以 10 MOI 的比例接种 Sf9,孵育 72 h,蛋白表达效果最好;通过 His 镍株亲和纯化 HA 重组蛋白,蛋白浓度为 0.268 mg/mL,鸡红细胞凝集效价为 4 log2。【结论】本试验在 Sf9 中成功表达并纯化 H7 亚型 AIV HA 蛋白,并建立与之相应的杆状病毒荧光定量 PCR 检测方法,可为进一步评价 H7 亚单位疫苗的免疫原性提供参考。     

净能体系在肉鸡应用中的研究进展

能量是肉鸡各种生命活动的基础,也是肉鸡饲料中价格占比最高的元素,主要源于日粮中碳水化合物、脂肪和蛋白质的化学能。准确评估肉鸡能量需要量和日粮成分能量水平在肉鸡营养和生产中具有重要的科研和经济价值。代谢能（ME）体系是目前用于家禽饲料原料能值评定的成熟体系,在家禽营养和配方中被广泛使用。但和净能（NE）体系相比,代谢能体系忽略了饲料中不同原料成分摄食和消化过程中的热增耗（HI）差异对原料能值评价的影响,降低了原料能值评定的准确性。因此,作者结合国内外肉鸡净能相关研究进展,重点就肉鸡净能测定方法、肉鸡原料净能预测方程和影响肉鸡净能体系应用因素等方面进行综述讨论,以期为净能体系在肉鸡生产中的应用提供参考。     

砧木品种对蓝莓植株生长发育和 果实产量及品质的影响

为提高斯巴坦蓝莓在中国长江三角洲地区的生态适应性,选择在当地表现优良的两个兔眼蓝莓品种杰兔、园蓝以及北高丛蓝莓品种克瑞顿作砧木,设计绿枝劈接和嵌芽接两种嫁接方式进行嫁接改良及栽培试验。结果表明,砧木品种对斯巴坦蓝莓植株生长发育和果实产量及品质有显著影响,在参试的7种砧–穗组合中,以克瑞顿为砧木的组合嫁接口愈合良好、树体生长快、枝量大、结果早、产量高、果实外观和内在品质表现最优,几无萌蘖,显著优于其自根树和以两个兔眼蓝莓品种为砧木的嫁接树。嫁接方式对斯巴坦蓝莓植株生长发育和果实产量及品质的影响不显著,但绿枝劈接总体表现优于嵌芽接。     

菜心种质资源遗传多样性的SRAP分析

为了合理利用菜心种质资源及提高菜心的育种效率,以44份菜心为试验材料,采用SRAP分子标记对菜心及其近缘种进行了遗传多样性分析。结果表明,27对引物共扩增出稳定清晰的条带418条,其中多态性条带为171条,多态性位点比例为40.2%。根据SRAP扩增结果,应用NTSYSpc2.1数据分析软件计算各品种间的遗传相似系数,表明这些材料间的遗传相似系数的变化范围是0.509~0.900。在相似系数为0.638的水平上,可将44份菜心分为2大类,第一类包括来自湖南的紫红菜薹,另一类包括其他所有绿叶菜薹品种。     

菜心细胞质雄性不育系转育研究

以油菜波里马胞质雄性不育系为不育源,四九菜心等6个品种为轮回亲本进行杂交、回交转育研究。结果表明:经过4个世代的单株选择和回交转育,选育出菜心胞质雄性不育材料经济性状与轮回亲本相似,平均不育株率为89.4%。其中以80天特青为轮回亲本转育的不育材料表现最好,不育株率达到98%,基本达到菜心胞质雄性不育系的育种目标。     

水稻L-半乳糖内酯脱氢酶基因的克隆和原核表达及抗体的制备

应用RT-PCR技术从水稻叶片中克隆了水稻L-半乳糖内酯脱氢酶(GLDH)的全长基因.序列分析表明,水稻GLDH基因全长1752bp,亚克隆其部分成熟蛋白编码基因(789bp),利用基因重组技术构建了E.coli/pET30a-GLDHe,经酶切鉴定,DNA测序,证实重组质粒构建正确;将重组质粒转化大肠杆菌Rosseta,IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析证实表达出相对分子质量约为36000的蛋白.用原核表达蛋白作为抗原免疫家兔制备抗体,用Westernblot检测抗体的特异性及效价,结果表明,抗体血清效价为1∶1000,在加IPTG诱导后的菌液中可以检测到相应的蛋白条带((相对分子质量为36000)),在水稻叶片样品中能检测到1条相对分子质量为36000的蛋白条带.