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为探讨山羊流产嗜衣原体重组真核质粒进入临床试验的可行性,本试验用PCR方法扩增出山羊流产嗜衣原体OmpA基因,克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)中,经PCR和双酶切鉴定后,将重组质粒pcDNA3.1-OmpA转染至PK-15细胞,观察目的基因表达情况,并将制备的大肠杆菌基因组单链DNA作为分子佐剂与重组质粒共同免疫小鼠,检测重组质粒在小鼠体内分布情况及血清抗体水平。结果表明,经PCR、双酶切和测序鉴定表明成功构建重组质粒pcDNA3.1-OmpA;转染PK-15细胞后,荧光抗体试验结果证实重组质粒pcDNA3.1-OmpA得到有效表达。首免后14 d,重组质粒加分子佐剂组的抗体效价显著高于重组质粒组和灭活疫苗组(P<0.05);随着免疫次数增加和时间推移,免疫小鼠抗体水平均呈现上升趋势,至35 d时达到最高峰,此后抗体滴度逐渐下降,但仍维持较高水平。首免后21 d,在小鼠心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、脑、空肠和腿肌中均可检测到质粒的分布,此后逐渐消失,49 d在所检组织中均未检测到重组质粒的存在。表明试验成功构建了基于OmpA基因的山羊流产嗜衣原体重组真核质粒,且加入分子佐剂后可诱导小鼠产生较高水平的血清抗体。 相似文献
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为了解我市蛋鸡养殖业的现状,遵义市中腾禽蛋研究所对全市蛋鸡养殖场和两城区主要市场进行了调查.调查发现,我市蛋鸡养殖总量不小,但问题不少,主要存在以下几个方面. 相似文献
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2009年发生于北美,流行于世界的流感疫情为A型流感病毒,H1N1亚型猪流感病毒毒株。该毒株包含有猪流感、禽流感和人流感三种流感病毒的基因片断,是一种可以人传染人的新型猪流感病毒,这种新型病毒由猪流感病毒演变而成。 相似文献
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