H9N2亚型禽流感病毒非结构蛋白基因NS1的表达及其单克隆抗体的研制

利用RT-PCR技术扩增获得了H9N2亚型禽流感病毒的NS1基因,ORF长度为654bp。成功构建了重组表达载体pET-NS1,将其转化BL21,并诱导表达出了相对分子质量大约为28 000的NS1融合蛋白。NS1融合蛋白经His trap Hp Kit柱子纯化,采用缓慢稀释和透析相结合的方法复性H9N2-NS1蛋白,获得纯度较高的NS1蛋白,以纯化的NS1免疫BALB/c小鼠,间接接ELISA方法筛选阳性克隆,对获得的抗H9N2-NS1单克隆抗体（McAbs）进行特异性分析;建立了2株稳定分泌抗H9N2-NS1McAbs的杂交瘤细胞系6B9和6C2;腹水的特异性鉴定结果表明,2株McAbs能特异性的识别H9N2-NS1,而与H5N2亚型AIV、H9N2亚型AIV、NDV、IBV、IBDV、ILTV、EDS76均不发生反应。Western blotting鉴定表明,所获得的单抗只与NSl蛋白条带反应。亚类显示,6B9为IgG1,6C2为IgG2b。结果表明,2株抗H9N2-NS1McAbs的制备对H9N2亚型禽流感病毒检测试剂盒的研制以及该病的防治有重要意义。另外,NSl蛋白单抗的成功研制为进一步研究NSl蛋白的结构、功能与细胞的相互作用机制及AI遗传变异规律奠定了一定的基础。     

国外动物福利的现状及发展动向（上）

近年来．动物福利问题已经得到了国际社会的广泛关注，动物福利已成为一种新的贸易壁垒。做好动物福利，对构建人与动物的和谐关系，提高动物及动物产品的质量．增强动物及动物产品的国际竞争力．促进对外贸易．维护国家形象具有重大意义。     

河南省畜牧兽医执法人员思想动态调查

为认清当前河南省畜牧兽医执法人员的思想动态,进一步加强畜牧兽医执法队伍建设和优化管理,全面促进执法工作开展,通过问卷与实地调研等方式,对河南省18个省辖市级、158个县级畜牧兽医执法机构的人员思想状况进行了梳理。调查发现,河南省大多数执法人员思想觉悟高、爱岗敬业、履职尽责、求真务实、开拓创新。但少数工作人员仍存在思想认识落后、工作积极性不高、担心被追责、畏难和负面情绪重等问题,需要通过强化思想教育、严格纪律作风、完善激励约束机制、加强文化建设等方式加以改进。     

浅谈基因工程疫苗的类型和应用

随着生物技术在生物制品领域应用的不断深化和发展,近年来研制成功了许多基因工程疫苗。基因工程疫苗属于生物技术疫苗,是利用生物技术制备的分子水平的疫苗,可分为基因工程重组亚单位疫苗、重组活载体疫苗、基因缺失或突变疫苗、基因(核酸)疫苗、合成肽疫苗及转基因植物疫苗等几类。它们代表疫苗研究的新途径,为克服一些常规疫苗的缺陷带来希望,展示了其广阔的应用前景。     

规模化养猪场粪便污水综合治理

近年来,规模化养猪发展迅速,对调节市场和改善人民生活起了很大作用。然而,由于规模化养猪污水排量大,而且粪便污水含有氨氮、微量元素和有害寄生虫卵,清理不及时和处理不当都会引起猪场卫生防疫条件的恶化,污染环境,因此,粪便污水的综合治理便成了规模化养猪场进一步发展所必须认真对待的问题。 　　本文介绍的粪污综合治理技术,是一种先进的厌氧接触工艺处理技术,先对粪便污水进行固液分离,固体物质生产有机复合肥料 (或颗粒肥 ),液体进入上流或厌氧污泥床进行厌氧发酵,沼气作为民用等系列配套技术,使之达到无害化。实践证…     

如何选择优秀的小尾寒羊

选种就是从羊群中选出优秀的个体作种用，只有这样才能使品种质量不断提高。选出的优秀个体，首先要符合小尾寒羊品种的外貌特征，其指标至少要达到特、一级要求以上。实践证明，选种只要把握好标准，掌握住方法，再加上经常细心的观察是不难实现的。 1小尾寒羊的品种要求 1.1外貌特征 小尾寒羊的四肢较高，前后躯均衡发育，侧视躯体略呈方形，颈较长，背腰平直，脂尾较短，在飞节以上。 1.1.1类型 小尾寒羊按被毛的特点可分为三类即：①裘皮型，占 53％～ 90％。②细毛型，占 9％～ 14％。③粗毛型，占 2％～ 8％。在选种中应注意以下几点…     

PCR技术及其在禽流感诊断中的应用

多聚酶链式反应(PCR)具有特异性强、灵敏度高、快速简便及重复性好等优点,各种临床样品都可用PCR进行检测,现已开发出多种PCR新技术,用于生物学科的各个领域。本文对PCR技术的原理及其在动物疫病尤其是禽流感的诊断与检验中的应用及研究进展做一综述,以期对禽流感的诊断与防制有所帮助。     

提高奶牛场综合效益之我见

1经营思路要看投入产出比,不能片面追求低成本,只要高投入合理,能够带来高产出就要敢于投入。1.1奶牛的品种问题品种是奶牛养殖效益的基础,不能图便宜而不注重牛的品种,低价购牛在饲养实践中是得不偿失的。较适应我国的品种一般有荷斯坦牛、娟姗牛。购牛时不能随便引种,最好选择比较正规的奶牛场,这里一般都有牛的系谱、档案。具体到每头牛,选购时还要看它的体形、年龄、泌乳量等,这些都需要实地考察。一般良种牛生长快,适应性强,生产性能较高,体格结构匀称,皮薄而富有弹性,体躯长宽,背腰平直,外观清秀。1.2是否养种公牛笔者认为中小型牛场(…     

银加强金标免疫技术在鸡传染性支气管炎病毒检测中的应用

采用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)进行检测的银加强金标免疫技术(SECGA).先将抗原点样于硝酸纤维素膜(NCM)中央,封闭后浸于40×稀释的IBV单抗中作用10min,洗涤后再浸于体积比为1:4稀释的金标羊抗鼠IgG溶液中作用1h,银染10min后观察,在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果,反之,不出现斑点为阴性结果.SECGA对IB抗原最低测量值为0.703ng·点-1(约2μL),对含毒尿囊液的最低检测为102..9EID50.结果表明,IB VM41毒株在鸡胚中繁殖时以36～54h检测含毒量最高;SPF鸡感染3d后可从气管粘液中检出病毒.SECGA检测抗原可用于IBV早期检测,具有群特异性,快速、敏感、简便,不需特殊设备,结果易判定等优点,尤适于基层实验室或现场应用.     

浅谈我国兽医生物制品的发展现状和前景

兽医生物制品(veterinary bioogics)是根据免疫学原理,利用微生物、寄生虫及其代谢产物或免疫应答产物制备的一类物质,供相应的疫病诊断、治疗或预防用。从狭义上讲,用于动物疾病诊断、检疫、治疗和免疫预防的诊断液、疫苗和抗病血清统称为兽医生物制品;从广义上讲,又可将血液制品、脏器制品和非特异性免疫制剂都称为兽医生物制品。经过不断的研发,我国兽医生物制品在品种、质量、数量上都有很大的提高和发展,对我国的动物疫病及人兽共患传染病的防制起到了重要作用,并表现出良好的发展前景。1我国兽医生物制品发展现状建国以来我国兽医生物…