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在NCBI网站BLAST得到5个烟草表达序列标签(EST),据此设计引物,从烟草(Nicotianabenthamiana)品种本塞母氏中分离出2条DREB(dehydration-responsiveelementbindingprotein)-like转录因子基因,分别命名为NbDREB1和NbDREB2。与相关AP2/EREBP类转录因子比对结果显示,NbDREB1和NbDREB2都具有典型的AP2/EREBP转录因子家族EREBP亚族A类AP2区特征,并且都能在大肠杆菌(Escherichiacoli)中表达。酵母单杂交结果显示,都不具有激活功能。连接pGADT7反式激活载体进行酵母单杂交结果显示:NbDREB1能与DRE顺式作用元件结合,NbDREB2则不能,表明NbDREB1为抑制型DREB类转录因子。比较NbDREB1和NbDREB2的AP2区发现:两者在第2位和第49位氨基酸处不同,NbDREB1为Y和K,NbDREB2为N和R。 相似文献
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用食盐作为助溶剂采用细胞自溶法,对解脂假丝酵母33M candida lipolytica细胞壁进行破碎后提取神经酰胺,用SPE(固相萃取法)将神经酰胺与膜中其它脂类分离,分别应用TLC(薄层色谱)方法和HPLC-ELSD(高效液相色谱-蒸发光散射器)对其进行定性和定量分析,取得了良好效果。 相似文献
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超声波法直接导入外源基因:高效烟草转化系统的建立 总被引:13,自引:0,他引:13
报告了一种新的将外源基因导入带壁植物细胞的方法——超声波直接导入外源基因法。将烟草叶片小块置于含pBI121.1质粒的缓冲液中,用声强为0.5w/cm#+2的脉冲超声波处理30分钟,培养一天后86%的叶块中检测到有GUS基因的短暂表达,叶片组织的平均转化面积高达60%-70%。处理叶块中的60%在含Kan 100mg/1的分化培养基上再生出Kan抗性芽,对照叶块则在此培养基上全部死亡。经检测Kan抗性小植株叶片中的GUS活性,按外植体总数计算,稳定转化率达22.3%,抽样检测NPTII活性和DNA斑点杂交均显阳性,证明外源基因已整合到烟草DNA中。 相似文献
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以东北栽培大豆“合丰28”温室培养至二片真叶时取为材料.提取叶绿体DNA,在电镜下观察,发现有长度约为2μm的小分子环状DNA,其性质和功能正在探讨中。 相似文献
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阿维链霉菌(Streptomyces avermitilis)基因组中含有orfX基因,通过增加orfX基因剂量可以提高阿维菌素的产量。本研究以pIJ8600为出发质粒,构建了含红霉素启动子(ermEp*)和orfX结构基因DNA片段的整合型表达载体pWJ827。通过接合转移将pWJ827导入阿维菌素的工业菌株BIB9903中,得到稳定高产的重组菌株BIB0827。高效液相(HPLC)分析结果表明,与出发菌株BIB9903相比,BIB0827发酵产物阿维菌素产量提高了1.5倍,达到3350μg/mL。传代稳定性实验证明,BIB0827传代10代后依然稳定,在工业生产上有较大的应用价值。 相似文献
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插核手术对合浦珠母贝免疫水平的影响 总被引:11,自引:1,他引:11
对插核手术前后合浦珠母贝血清的超氧化物岐化酶(SOD)活力、溶菌活力和抗菌活力以及血细胞的吞噬活性进行了比较研究。结果表明:插核手术后贝血清的SOD活力明显上升,溶菌、抗菌活力明显下降,血红细胞的吞噬活性降低,化学发光的各种参数显著改变,说明贝的体液和细胞免疫水平都明显降低。据此推断手术贝的免疫力低下是导致手术贝高死亡率的最根本原因。 相似文献
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SRAP-cDNA方法在植物基因差异表达分析中的应用 总被引:3,自引:0,他引:3
分离差异表达的基因一直是近些年的热点问题,国内外科学家发展了许多技术来研究植物基因的差异表达,如SSH、RAD、SAGE、DDRT-PCR、AFLP-cDNA、cDNA-microarray等。SRAP是近些年发展起来的一种新的分子标记,目前SRAP主要应用于植物基因组DNA水平上的研究,对于RNA即基因表达上的研究还比较少。本文对SRAP技术的原理方法、优点进行了介绍,并阐述了SRAP-cDNA方法的实验条件优化、应用现状及前景,表明SRAP-cDNA方法具有简便、重复性好、实验成本低等优点,可以在研究植物基因差异表达领域广泛应用,并成为作物育种、杂种优势分析等工作的重要工具。 相似文献