应用变性梯度凝胶电泳和16S rDNA序列分析对山羊瘤胃细菌多样性的研究

 以取自3头安装有永久性瘤胃瘘管的土种山羊的瘤胃内容物为材料, 经过DNA抽提和PCR扩增, 扩增产物利用变性梯度凝胶电泳技术(DGGE，一种DNA指纹技术)分析瘤胃细菌在两种日粮条件下的多样性。同时利用基因序列分析技术，分析了16个在DGGE胶上有匹配带的克隆的16S rDNA序列，并与现有的数据库进行了比较。结果表明，饲喂基础日粮时3头山羊瘤胃内容物的DGGE图谱有一定的相似性(43%～55%)；饲料中添加大豆黄酮一定程度上影响了瘤胃细菌的组成，DGGE谱带变化程度分别为1号36%、2号46%、3号30%。基因序列分析表明，DGGE图谱中优势条带的16S rDNA基因序列中有5个基因序列与基因数据库登录的相关序列的相似性大于97%，8个基因序列的相似性在90%～96%，余下的低于90%。相似性大于97%的5个克隆中，只有1个被鉴定为Prevotella sp.，其余4个都属于未被鉴定的瘤胃细菌。  

6个山羊品种高繁殖力候选基因BMP15多态性研究

骨形态发生蛋白15(bone morphogenetic protein 15,BMP15)基因为控制Belclare和Cambridge绵羊高繁殖力的主效基因.采用PCR-RFLP和PCR-SSCP技术检测BMP15基因中与绵羊高繁殖力相关的两个突变位点在高繁殖力山羊品种济宁青山羊(130只母羊、20只公羊)以及低繁殖力山羊品种(波尔山羊30只母羊、文登奶山羊30只母羊、辽宁绒山羊30只母羊、内蒙古绒山羊50只母羊、北京本地山羊30只母羊)中的单核苷酸多态性,同时研究这两个突变位点对济宁青山羊高繁殖力的影响.结果表明,在6个山羊品种中都没有检测到BMP15的B2突变(C→T);检测到的BMP15的B4突变(G→T)在6个山羊品种中均呈现杂合子状态.这表明BMP15基因中影响Belclare和Cambridge绵羊高繁殖力的突变位点对济宁青山羊的高繁殖力没有显著影响.  

体外培养的山羊乳腺上皮细胞形态研究

通过有效的细胞培养方法获得山羊乳腺上皮细胞系,对这些细胞形态进行光镜观察,结果发现,细胞可形成闭合型和开放型细胞群,闭合型细胞群边界清晰,细胞之间结合紧密;开放型细胞群边界不清,细胞相互分散存在于一局限的范围内。乳腺上皮细胞与成纤维细胞混生时分区生长,界线明显;细胞之间形成许多腔状结构。纯化的乳腺上皮细胞通过单细胞悬浮后传代,部分细胞形成岛屿状聚集,部分细胞以贴壁的自由单个细胞散在形式存在。上皮细胞增殖可形成圆顶型结构,呈乳头状(称之为乳球体);乳腺上皮细胞可产生并分泌乳汁,分泌到细胞外的乳汁流动形成网状结构。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型,大多数上皮细胞呈短梭形或多角形,细胞之间紧密相靠,互相衔接,连接成片,呈蜂窝状;细胞核呈圆形或椭圆形,核仁2～4枚;部分细胞呈圆饼状,体积较大;出现部分长形细胞;部分细胞表面出现绒毛状突起;接触抑制的上皮细胞形态不均一。  

宁夏香山荒漠草原区植物群落类型多样性及数量分析

在样地调查的数据基础上,对群落分布及类型进行分析。结果表明,香山山地荒漠草原区植被主要为灌丛植被和草本群落植被,符合干旱环境下具有长期放牧史的山地植被发育特征。由于山体岛屿化结构明显、生境碎化严重,植被景观斑块状明显,植被在山体内垂直分布格局不明显,受海拔因素影响较小。灌丛和草本植物群落分布主要受水分梯度差异的影响,不同群落类型的群落多样性有差异,灌丛群落多样性较高。群落数量排序、分类结果与植被生态地理分布以及物种组成分析相吻合。数量分类易于生境解释,因此在群落分布生境分析上有重要意义。灌丛植被在该山地生态系统中处于重要地位,是生态功能维持的主要因子。所以,在本地进行生物多样性保护中应该重点放在灌丛植被。  

去除瘤胃厌氧真菌对山羊瘤胃消化代谢的影响

在青干草日粮条件下，以3头装有永久性瘤胃瘘管的本地山羊为试验动物，研究去除瘤胃厌氧真菌对山羊瘤胃消代谢的影响，结果表明，去除瘤胃厌氧真菌后，瘤胃中的氨氮浓度显下降（P＜0．05），微生物蛋白浓度显上升（P＜0．05）。瘤胃总挥发性脂肪酸浓度显下降（P＜0．05），脂肪酸组成中，乙酸比例显下降（P＜0．05），丙酸比例显上（P＜0．05），丁酸比例无显变化（P＞0．10）。酶活性测定结果表明，瘤胃内羧甲基纤维素酶活力显下降（P＜0．05）。稻草片段的消失也显下降（P＜0．05）。在此基础上，1＃，2＃羊引入瘤胃厌氧真菌后，氨氮浓度，稻草片段的消失率，总发挥性脂肪酸浓度及羧甲基纤维素酶活力皆有所回升，但均低于正常水平。  

波尔山羊及黄牛耳部成纤维细胞的体外培养

为了获得丰富的核移植供核体细胞,通过活体采集波尔山羊及黄牛耳部皮肤,利用组织块和消化法开展原代培养,并进行传代培养和培养细胞的冷藏、冷冻保存实验.建立了简易的波尔山羊和黄牛成纤维细胞体外培养程序.  

妊娠中期奶山羊下丘脑中催产素的免疫组化定位

采用免疫组织化学技术中的链霉素抗生物素-过氧化酶(streptarid in-perox idase,SP)法,对妊娠中期奶山羊下丘脑中催产素(O xytoc in,OT)神经元的定位及分布进行了观察研究。结果表明,下丘脑中分泌OT的神经元主要分布在视上核和室旁核,在环核、视上弥散核、弓状核、室周核、穹窿周核、下丘脑前区、下丘脑外侧区、下丘脑后核和乳头体各核团等也有一定数量的阳性神经元;另外,在室旁核、视上弥散核、视上核、正中隆起和第三脑室附近有较多数量的强阳性神经纤维,在交叉上核有少量阳性神经纤维。提示OT在妊娠中期奶山羊下丘脑中分布广泛,且下丘脑OT经神经垂体,第三脑室,血管三条途径释放,经血液循环最终作用于靶细胞而发挥生理作用。  

双羔型辽宁绒山羊FSHR基因SNP分析的研究

分别选择遗传性能稳定的2．5岁的经产双羔、单羔辽宁绒山羊母羊，并以萨能奶山羊为对照。对FSHR基因第10个外显子的1487～1717bp碱基区段进行SNP分析；利用PCR法扩增FSHR第10个外显子的目的片段，用PCR-SSCP法对PCR扩增的目的片段进行单核苷酸多态性分析。结果表明：辽宁绒山羊FSHR基因第10个外显子突变率较大，并且其突变发生在第1606个碱基，由C→T，说明FSHR基因的第10个外显子可以作为双羔性状的标记基因。  

包被蛋氨酸对内蒙古白绒山羊氮代谢及产绒性能的影响

选用 9只装有瘤胃、十二指肠近端及回肠末端瘘管的内蒙古白绒山羊周岁羯羊 ,分 3组处理 (分别在日粮中添加硫酸钠、蛋氨酸和包被蛋氨酸 ) ,研究饲喂包被蛋氨酸对绒山羊小肠氨基酸流通量、氮平衡、绒山羊生产性能及羊绒品质的影响。结果表明 :包被蛋氨酸、蛋氨酸组的十二指肠蛋氨酸流通量 (分别为 ( 5 5 5± 0 4 5 )和 ( 5 12±0 0 2 )g·d-1)和消化率 (分别为 81 98± 2 5 6和 82 0 3± 1 34)显著高于硫酸钠组 (为 ( 3 86± 0 0 2 )和 ( 72 5 4± 2 18)g·d-1) (P <0 0 5 )。包被蛋氨酸组的氮沉积 ( 3 6 9± 1 73)比硫酸钠组 ( 2 4 6± 1 2 5 )和蛋氨酸组 ( 2 4 5± 1 6 7)的氮沉积分别提高了 31 7%和 32 2 % (P <0 0 5 ) ,但各组氮表观消化率无显著差异 (P >0 0 5 )。包被蛋氨酸组较硫酸钠组显著提高绒山羊日增重、羊绒生长率、羊绒长度和羊绒中必需氨基酸比例 (P <0 0 5 ) ,但各组羊绒细度、羊绒含硫量、羊绒总氨基酸及含硫氨基酸比例无显著差异 (P >0 0 5 )  

新疆南疆绒山羊皮肤毛囊结构研究

对新疆南疆绒山羊及其祖代父本辽宁绒山羊和母本新疆南疆土种山羊皮肤、毛囊进行观测 ,研究表明三种山羊表皮层、真皮毛囊层和真皮网状层结构基本一致 ,真皮网状层占整个皮肤厚度 75 % ,构成了皮层的主体 ;新疆南疆绒山羊毛囊密度、次级毛囊直径和S/P值大于祖代母本新疆南疆土种山羊而低于父本辽宁绒山羊 ,其值接近父本趋势大于母本 ,表明辽宁绒山羊能将毛囊密度大和S/P值高的性状稳定遗传给杂交后代。