淡紫拟青霉发酵滤液对大豆胞囊线虫趋化性的影响

 实验室条件下,研究了大豆胞囊线虫幼虫对大豆根和根浸出液的趋化性以及淡紫拟青霉代谢产物对其趋化性的影响。结果表明,大豆胞囊线虫二龄幼虫(J₂)对大豆根存在着一定的趋化性,而淡紫拟青霉发酵滤液对J₂存在明显的驱避性。在根浸出液、真菌滤液及其混合液剂处理下,大豆胞囊线虫J₂在WA平板上靠近处理液的0~1cm区间中分布率存在极显著差异(P <0.0 1),而加样时间(液剂与线虫同时放置或提前2 4h处理)对其分布率没有显著影响。大豆幼根蘸取滤液后对线虫J₂在该区间的分布与不经处理的幼根差异显著(P <0.0 5),证明淡紫拟青霉发酵滤液可以明显地降低线虫与大豆根的亲和力,并强烈抑制线虫对大豆根的侵染。     

Screening of field performance of entomopathogenic fungi and nematodes against cabbage root flies (Delia radicum l. and d. floralis (fall.); Diptera,Anthomyiidae)

Finnish isolates of Beauveria bassiana (8 isolates), Metarhizium anisopliae (7), Tolypocladium sp. (2), Paecilomyces farinosus (2), P. fumosoroseus (1), Steinernema feltiae (3) and Bacillus thuringiensis ('Muscabac') were tested for efficacy against mixed populations of Delia radicum and D. floralis under field conditions in 1986–90. All pathogens were applied preventatively, the fungi as aqueous conidial or mycelial suspensions, dry conidia or dry mycelial powder. In only two of the nine experiments did B. bassiana or M. anisopliae give some control. In 1986, B. bassiana SF85–2 and Tolypocladium sp. SF85–4 (both at rate 1.2 x 10⁹ conidia plant‐ 1), and ‘Muscabac’ (25 g 1^?1, 1 dl plant^?1) reduced the number of pupae by 80%, 60% and 50%, respectively, as compared with untreated and chemical (isophenphos) controls. In 1990, M. anisopliae SF86–39 at rate 1.6 x 10⁹conidia plant^?1 and 1.5 x 10⁸ CFU plant^?1 and S. feltiae SFS‐22 (35000 plant^?1), increased the yield of cauliflower 2.2, 1.8, and 2.3‐fold, respectively, as compared with the untreated control, but these yields were only 19%, 15% and 19% of those of the chemical (diazinon) control. Paecilomyces isolates were ineffective in the 1986 experiment in which they were included. Our results suggest that it is difficult to find efficient control agents among the fungal and nematode species tested for use as biopesticides against cabbage root flies, but that the potential of M. anisopliae against these pests deserves further study.     

淡紫拟青霉对尖孢镰刀菌的拮抗作用与机制分析

研究表明淡紫拟青霉次生代谢物质对尖胞镰刀菌的孢子萌发与菌落生长有明显的抑制作用.淡紫拟青霉与镰刀菌活体间存在明显的营养竞争作用;淡紫拟青霉菌能产生细胞壁降解酶和蛋白或多糖性质的拮抗性物质;此活性物质存在于胞内和胞外,胞外物质和胞内提取液-1对尖胞镰刀菌孢子生成的抑制率在90%以上,粗蛋白提取液和粗多糖提取液的抑制率在73%左右,丙酮提取液抑制率最低,仅为25.42%;淡紫拟青霉抑菌活性物质主要存在于水相中;活性物质对温度耐受力较差,100℃或80℃处理30 min,基本失去活性.     

竹织叶野螟Algedonia coclesalis Walker越冬幼虫的真菌病

粉质拟青霉Paecilomyces farinosus (Dicks.ex.Fr.)Brown et Smith是竹织叶野螟越冬幼虫的重要病原菌,林间自然发病率为23.08％～42.84％。用5.5×10~6/ml孢子悬液感染越冬幼虫,死亡率达91.7％。在24～26℃下,病程约10～14d。林间罹病虫尸上,可见粉质拟青霉被寄生黑孢壳Melanospora parasitica Tulasne寄生。本文还从病原菌的生理性质及侵染环境的角度,讨论了疾病的流行条件和病原菌利用的前景。     

二斑栗实象生活史观察及粉拟青霉菌防治试验

二斑栗实象在云南玉溪市红塔区、峨山县1a发生1代，以幼虫在土壤中越冬，10月中旬至11月下旬是防治地下幼虫的最佳时期。6月中旬成虫羽化高峰期是防治成虫的最佳时间。用粉拟青霉菌防治地下幼虫药效达86．9％，树冠成虫防治药效为64．3％。地下幼虫和树冠成虫防治的最佳剂量均为22．5kg／hm^2。喷施粉拟青霉菌最好选择雨后晴天无风的早晨和傍晚，防治地下幼虫喷药后应立即进行翻挖。     

粉拟青霉菌株的筛选

从冬季自然感病的马尾松毛虫上分离到的粉拟青霉，经回接试验确证为病原菌；在低温下其对原始寄主有较高毒力，经初步筛选拟Ｆ９００２菌株为优良株系。     

不同条件下粉拟青霉菌的生长研究

对不同碳源、不同氮源、不同pH条件下的粉拟青霉菌Z26菌落直径和产孢量的生长情况的观察，筛选出此菌的最佳营养条件，C源为麦芽糖，N源为蛋白胨，PH值7—9。     

淡紫拟青霉不同菌株对南方根结线虫卵寄生率三种处理方法的比较

利用来自不同地域的淡紫拟青霉的13个菌株，分别用其孢子液处理南方根结线虫分散卵粒、菌丝处理分散卵粒、孢子液处理卵囊以评价淡紫拟青霉对南方根结线虫的寄生性。在被试所有菌株中，同一菌株三种不同方法对根结线虫卵的寄生率相比，孢子液处理卵囊均明显高于其他两种处理。不同菌株对南方根结线虫卵的寄生率有很大的差异。三种处理方法结果显示618号菌株寄生率均为最高。菌株对卵的寄生率与菌株地理来源无明显相关性。     

淡紫拟青霉E16液体发酵工艺研究

以活菌数为检测指标,通过单因子和正交试验对淡紫拟青霉 E16液体发酵工艺进行优化。结果表明,淡紫拟青霉E16发酵最佳液体培养基配方为：白砂糖1.5％（质量分数,下同）,大豆粉1％,磷酸二氢钾0.1％,硫酸锌0.01％;最佳发酵条件为：起始 pH 值6,500 mL 三角瓶装液量30％,接菌量5％,培养温度30℃,摇床转速150 r／min,培养时间4 d。在最佳发酵培养基和发酵条件下,淡紫拟青霉E16产生的活菌数为9.80×109 cfu／mL,较优化前提高近1个数量级。     

淡紫拟青霉T-DNA插入突变体的表型分析

研究淡紫拟青霉T-DNA插入突变体,鉴定突变体的表型特征,为淡紫拟青霉致病机制分析及致病相关的基因克隆奠定基础。PCR检测筛选的14株T-DNA插入突变体,观察和测定菌落形态,菌落生长速率,产孢量,孢子萌发率和菌丝干质量等生物学性状,并比较突变体致病力。结果表明突变体均含有beta-tubulin基因序列,T-DNA已整合进入野生型菌株20-7的基因组中。通过与野生型菌株对比,发现突变体菌落形态发生了不同程度的改变。菌落生长速率明显增大的菌株占全部菌株的85.71%,只有BN-11菌株的菌落生长速率降低。产孢量显著变大的菌株有BN-11和BN-12,为菌株总数的14.29%。孢子萌发率发生改变的菌株占78.57%。菌丝干质量发生明显增大和减少的菌株都占全部突变体的21.43%。筛选获得了1株致病力增强的突变体BN-11和11株致病力显著降低的突变体。