民猪AMPD1基因的克隆与真核表达载体的构建

为了研究腺苷-磷酸脱氨酶1(AMPD1)基因多态性,试验采用比较基因组学与克隆测序相结合的方法对比分析民猪AMPD1基因的DNA及cDNA全序列,并构建pcDNA3.1(+)-AMPD1真核表达载体。结果表明:AMPD1基因的13个外显子上有20个点突变,第1外显子第39位碱基突变造成MsⅡ酶切位点的缺失,第1 367位碱基突变造成BspAⅠ、MgoⅠ、NphⅠ等31个酶切位点的缺失并且成功构建了pcDNA3.1(+)-AMPD1真核表达载体。     

一起左旋咪唑中毒引起犬失明的诊疗报告

正左旋咪唑是一种广谱、低毒、高效的驱线虫药,对多种动物的胃肠道线虫和肺部线虫有明显的驱杀作用。它能抑制虫体肌肉琥珀酸脱氨酶的活性,阻断延胡索酸还原为琥珀酸,当虫体与之接触时,能使其神经肌肉去极化,致使其肌肉发生持续性收缩而麻痹死亡,从而达到驱虫的效果。但它同样存在毒蕈碱样和烟碱样双重作用。因此,使用不当极易造成中毒、甚至引起失明。2013年10月本站接诊一例因犬主过量喂服左旋咪唑片引起犬药物中毒引起失明的病例,经过综合治疗,取得良好的效     

N-乙酰半胱氨酸对脂多糖刺激仔猪肌肉能量状况的影响

本试验研究了N-乙酰半胱氨酸(NAC)对脂多糖(LPS)刺激仔猪肌肉能量状况的影响.选取18头杜洛克×长白×大白健康仔猪,体重(11.58±0.26)KG,随机分成3个处理(对照组、LPS组和NAC组),每个处理6个重复,每个重复1头猪.对照组和LPS组饲喂基础饲粮,NAC组饲喂基础饲粮+500 mg/kg NAC,L...     

耐盐菌株的筛选及其促生作用研究

利用1-氨基环丙烷-1-羧酸(1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid,ACC)为唯一氮源,从辽宁省营口沿海产业基地的?根际盐碱土中,快速筛选出了82株具有ACC脱氨酶活性的菌落.其中7株的ACC脱氨酶活性较高,初步的耐盐检测发现洛菌株在6%盐浓度的TSB培养基中仍可生长,并且菌株对草籽生长有一定的促生作用.其中菌株GPI和GP2的促生作用最为显著,根系长度分别比对照提高29%和28%,且GP1和GP2的ACC脱氨酶比活力分别比作为对照的枯草芽孢杆菌的酶比活力提高了867%和719%.     

ACC脱氨酶细菌对玉米影响的研究

用CS-2、SY-1-1两种ACC脱氨酶细菌的菌体悬浮液浸泡玉米种子,对各处理玉米的发芽率、发芽指数和发芽势等萌发指标,玉米幼苗生长两周后的苗高、苗鲜重、根长、根鲜重等生态指标及过氧化物酶活性、可溶性蛋白含量、叶绿素含量、脯氨酸含量等生理指标进行了测定。结果表明：CS-2处理的发芽指数和发芽势在种植后的84 h都较对照高,苗高和根长优于对照并达到了显著性差异;SY-1-1处理的苗高和苗鲜重优于对照并达到了显著性差异;CS-2处理的幼苗过氧化物酶活性、可溶性蛋白含量、脯氨酸含量与对照相比均达到了显著性差异;SY-1-1处理的叶绿素含量优于对照并达到了显著性差异。     

ACC脱氨酶对大豆快生根瘤菌及苜蓿中华根瘤菌共生固氮与竞争结瘤的影响

利用大肠杆菌S17-1与根瘤菌进行两亲本接合转移,将苜蓿中华根瘤菌Sm1021中的ACC脱氨酶基因导入大豆快生根瘤菌HH103,在苜蓿中华根瘤菌Sm1021中过表达ACC脱氨酶基因,探讨ACC脱氨酶对根瘤菌共生固氮及竞争结瘤的影响。结果显示:接种过表达ACC脱氨酶的重组根瘤菌Sm1021,宿主植物地上部分鲜质量与结瘤数量有所增加;接种外源导入ACC脱氨酶的重组根瘤菌HH103,能够增加结瘤数,提高植物地上部分干质量且竞争结瘤能力增强。但是,接种2种重组根瘤菌后,宿主植物的根瘤鲜质量和根瘤固氮酶酶活性无明显变化。     

小麦根际产ACC脱氨酶细菌种群的多样性研究

【目的】对杨凌和长武两地小麦根际土壤中能产生1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)细菌的多样性进行调查比较。【方法】以ACC为唯一氮源从小麦根际土壤中富集和纯化产ACC脱氨酶细菌,使用Mi-seq高通量测序平台对富集产物进行多样性检测,构建16SrDNA基因克隆文库,对所分离的产ACC脱氨酶细菌进行系统发育分析;利用R语言绘图,对两地区该类细菌群落结构进行对比研究。【结果】长武地区小麦根际土壤2个样品中优化后的序列共计55 715条,基于97%的相似性被划分为35个OTU,Shannon多样性指数为1.43和0.6,Simpson多样性指数为0.380 5和0.773 7,经系统发育分析,主要隶属于假单胞菌属(Pseudomonas)、肠杆菌属(Enterobacteriaceae)、无色杆菌属(Achromobacter)、不动杆菌属(Acinetobacter)和乳球菌属(Lactococcus),所占比例分别为73.26%,15.86%,4.03%,3.26%和1.87%。杨凌地区小麦根际土壤2个样品中优化后序列共计34 044条,基于97%的相似性被划分为37个OTU,Shannon多样性指数为2.21和2.38,Simpson多样性指数为0.181 7和0.140 4,经系统发育分析,主要隶属于肠杆菌属(Enterobacteriaceae)、无色杆菌属(Achromobacter)、假单胞菌属(Pseudomonas)、芽孢杆菌属(Bacillus)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas),所占比例分别为37.66%,23.51%,14.90%,9.07%和5.80%。【结论】杨凌、长武地区小麦产ACC脱氨酶根际促生细菌的种类有部分重叠,但丰度差异较大,在空间分布上呈现一定程度的地缘隔离,调查结果可用于指导产ACC脱氨酶根际促生菌的资源开发及施用效果研究。     

浙江沿海细菌芳香族氨基酸代谢途径的研究

根据苯丙氨酸脱氨酶可由苯丙氨酸诱导产生的原理,采用以苯丙氨酸为底物的简易纸片法为初筛模型,筛选浙江沿海具有产苯丙氨酸酶能力的细菌。对2 315株海洋细菌发酵液的研究结果表明,23.20%的细菌可以产生苯丙氨酸脱氨酶,其中12.22%具有微弱酶活力,8.68%具有较低酶活,2.07%具有中等酶活,0.23%具有强酶活。在浙江沿海有76.80%的细菌通过将苯丙氨酸羧化转变成酪氨酸后进入三羧酸循环,进而参与机体代谢;其余细菌可以通过PAL的作用来转移苯丙氨酸的氨基形成苯丙酮酸和氨。     

Metformin对蛋鸡AMPK活性及脂质代谢的短期效应研究

为了研究双胍药类Mefformin短期内对蛋鸡AMPK活性的影响,研究选用日龄、体重及产蛋率相近的产蛋高峰期新罗曼蛋鸡40只,随机分为4个处理组,每个处理5个重复,每个重复2只鸡,对照组蛋鸡采食不合Mefformin的基础饲粮,分别在另外3组蛋鸡基础饲粮中添加0.6%、0.8%、1.0%Metformin.试验结果表明:不同浓度的Metformin处理呈剂量效应性地显著降低蛋鸡的采食量;肝脏AMPK基础生理活性比卵巢AMPK活性高46.89%(P=0.124),0.6%、0.8%、1.0%Mefformin组蛋鸡肝脏AMPK活性分别增加了13.83%(P=0.216)、25.90%(P=0.162)、31.10%(P=0.170);血清三酰甘油(TG)、极低密度脂蛋白胆固醇(VLDL-C)受1.0%Mefformin处理影响最大,分别下降了27.10%(P=0.256)、26.75%(P=0.220);各处理组蛋鸡卵泡胆固醇含量均显著或极显著地低于对照组(P＜0.05或P＜0.01),且随Metformin浓度的增加呈剂量依赖性地降低.结果说明0.6%～1.0%Mefforrain提高了蛋鸡肝脏AMPK活性,并降低了蛋鸡血清脂质合成产物及不同发育程度卵泡胆固醇的含量.     

产ACC脱氨酶植物根际促生菌的筛选及其对修复植物高羊茅生长的影响

以1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)为唯一氮源,从石油污染的土壤中分离得到一株具有ACC脱氨酶活性的菌株D5A.该菌在以ACC为唯一氮源条件下,其ACC脱氨酶比活力为0.084 U/mg.另外,D5A还具有产生吲哚乙酸(IAA)、耐盐以及溶磷的特性.在液体培养条件下该菌株产IAA高达112 mg/L,在90 g/kg盐含量的培养基中仍能够正常生长且具有较强的溶解矿物磷能力.同时该菌对酸碱具有良好的适应性,在初始pH4～10的LB培养基中生长良好.种子发芽试验表明在3 g/kg和6 g/kg浓度NaC1的逆境条件下,该菌株能显著提高高羊茅种子的发芽率和芽长.最后,通过对其进行生理生化特性和16S rDNA序列分析,该菌株初步鉴定为克雷伯氏菌(Klebsiellasp.).