动物源产CMY-2大肠杆菌分子流行病学研究

为调查产CMY-2大肠杆菌在广东各养殖场的流行情况,对2010—2011年间分离自猪、鸡、鸭、鹅等动物的1293株大肠杆菌,采用PCR方法筛选出bla_CMY-2阳性菌株,琼脂稀释法测定阳性菌株对17种抗微生物药物的敏感性;接合转移试验和XbaⅠ酶切PFGE图谱分析bla_CMY-2基因转移扩散的方式。结果显示,1293株大肠杆菌中27 株含有bla_CMY-2 基因,检出率为2.09%,均为多重耐药菌株,主要耐药谱型为AMP/CHL/TET/FLF/CTF/CTX/CAZ/CTR/GEN/CIP/ENR/NAL/OQX;27 株携带bla_CMY-2 基因菌株中有14 株的bla_CMY-2 基因可随质粒转移到受体菌E.coli C600中,且往往与bla_TEM-1和(或)qnrS1共同转移;PFGE分析结果显示,27 株携带bla_CMY-2 基因菌株共产生17条谱带,其中有4株菌株,两两分别来自同一地区,存在克隆传播关系。提示,在广东地区食品动物养殖场内存在产CMY-2大肠杆菌的克隆传播,且bla_CMY-2 基因伴随可转移质粒或其他可转移移动元件可能是造成产CMY-2大肠杆菌流行分布的主要原因。     

食品动物源大肠杆菌多重耐药性监测

为掌握畜禽源大肠杆菌的耐药情况,了解其对各种抗菌药物的敏感程度,自广东地区临床分离鉴定出294株食品动物源大肠杆菌,采用琼脂稀释法测定294株大肠杆菌对14种抗菌药物的敏感性。结果显示,食品动物源大肠杆菌对各抗菌药的敏感性不同,且多重耐药现象较严重;受试大肠杆菌对四环素和复方新诺明的耐药率较高,均达到80%以上;对第3代头孢菌素类耐药率相对较低。     

鸡毒支原体病的诊断与防治

鸡支原体病是由鸡支原体引起鸡的一类疾病的总称。包括鸡慢性呼吸道疾病、传染性滑膜炎及火鸡支原体病。其中鸡毒支原体是众所周知危害养禽业发展的重要病原，能够引起鸡的慢性呼吸道疾病，其特征为病鸡咳嗽、鼻窦肿胀、流鼻液；气喘并有呼吸啰音、雏鸡生长发肓不良，母鸡产蛋减少，疾病发展缓慢，病程较长，可在鸡群中长期蔓延，给养禽业造成重大经济损失。     

广东地区鱼源大肠埃希菌ESBLs和PMQR流行分布调查

从广东地区食用鱼肠道分离鉴定了218株大肠埃希菌,用琼脂稀释法测定218株大肠埃希菌对17种抗菌药物的敏感性,并用PCR方法调查ESBLs和PMQR基因的流行分布情况.对10株β-内酰胺酶(包括ESBLs)和/或PMQR阳性菌株进行了接合转移试验,探讨ESBLs和PMQR基因的传播机制.敏感性测定结果显示:218株大肠埃希菌对17种抗菌药物的耐药率为0.5%～72.5%.在112株氨苄西林耐药菌株中,检测出2种ESBLs基因,分别为blaCTX-M-79和blaCTX-M-14,2株菌中还检测到β-内酰胺酶基因blaLEN-4和blaLEN-17.在80株环丙沙星耐药菌株中,检测到59株为PMQR阳性,分别为qnrB(33株),qnrD(5株),qnrS(21株),aac(6’)-Ib-cr(6株).接合转移试验结果表明,ESBLs和/或PMQR基因可同时存在于一个质粒上进行转移.     

广东地区患病食品动物源大肠杆菌ESBLs和AmpC酶流行分布调查

质粒介导的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）和AmpC酶广泛传播和扩散,导致全球范围内肠杆菌科细菌对超广谱头孢菌素类的耐药性发展迅速,引起人们高度重视。食品动物源大肠杆菌可作为耐药基因储库,对细菌耐药性在动物、环境和人之间的传播起着非常重要的作用。本研究从2009年患病的食品动物,包括鸡、鸭、鹅和猪,分离鉴定了315株大肠杆菌,调查ESBLs和AmpC酶在患病食品动物中的流行分布。经双纸片协同扩散实验筛选出61株ESBL阳性菌株,PCR检测共检测出8种blaCTX-M基因,分别为blaCTX-M-14/14b、blaCTX-M-79、blaCTX-M-65、blaCTX-M-27、blaCTX-M-15、blaCTX-M-24、blaCTX-M-98和blaCTX-M-13,其中检出率最高的为blaCTX-M-79,其次为blaCTX-M-14/14b。本研究还检测出1株新的SHV型酶,命名为SHV-135;PCR共检测出5株大肠杆菌携带质粒源CMY-型AmpC酶,其中2株鹅源大肠杆菌携带1个新型CMY酶,命名为CMY-64。本研究表明患病动物分离的大肠杆菌中ESBLs和AmpC酶存在复杂性和多样性,而且新型β-内酰胺酶检出日益增多,提示兽医临床应慎用β-内酰胺类抗生素。     

鸡毒支原体病的诊断与防治

鸡支原体病是由鸡支原体引起鸡的一类疾病的总称。包括鸡慢性呼吸道疾病、传染性滑膜炎及火鸡支原体病。其中鸡毒支原体是众所周知危害养禽业发展的重要病原，能够引起鸡的慢性呼吸道疾病，其特征为病鸡咳嗽、鼻窦肿胀、流鼻液；气喘并有呼吸啰音、雏鸡生长发肓不良，母鸡产蛋减少，疾病发展缓慢，病程较长，可在鸡群中长期蔓延，给养禽业造成重大经济损失。     

临床分离猪链球菌和副猪嗜血杆菌多重耐药性监测

为了解我国规模化猪场链球菌和副猪嗜血杆菌的耐药情况,用纸片扩散法对临床分离的112株猪链球菌和92株副猪嗜血杆菌进行23种药物的敏感性试验。结果表明,猪链球菌对林可胺类、大环内酯类、硝基呋喃类药物的耐药率均在90%以上,对链霉素、庆大霉素、卡那霉素、阿米卡星、多西环素的耐药率在60%～90%之间,而对β-内酰胺类和氟喹诺酮类的耐药率相对较低。副猪嗜血杆菌对四环素耐药率最高(78.3%),对螺旋霉素、复方磺胺甲噁唑、克林霉素、阿米卡星、林可霉素、新霉素的耐药率在50%～70%之间,对头孢类和氟喹诺酮类耐药率相对较低。2种细菌对不同种类药物的敏感性各异,并且多重耐药性严重,主要耐药谱具有多样性。     

食品动物源沙门菌oqxAB基因的检测及水平传播机制研究

为了调查食品动物源沙门菌Salmonella oqxAB耐药基因的流行情况和水平传播机制,采用二倍琼脂稀释法测定临床分离的31株沙门菌对常用抗菌药物的敏感性,PCR方法特异扩增耐药基因oqxAB,并对扩增产物克隆测序.通过接合转移试验验证oqxAB基因的水平传播.试验结果表明,31株沙门菌对氨苄霉素的耐药率最高,达64...     

食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌传播分子机制的演变

从保存的2002-2009年分离的食品动物源大肠杆菌中,挑选16株bla_CTX-M-14阳性菌,用PCR方法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)编码基因、PMQR耐药基因及其他重要抗生素耐药基因(rmtB和floR);通过脉冲场凝胶电泳(PFGE)及种族进化关系分析16株细菌的亲缘关系;通过接合转移试验、复制子分型和bla_CTX-M-14上下游插入元件的检测,分析产CTX-M-14大肠杆菌的传播分子机制。PCR检测结果表明,16株食品动物源产CTX-M-14大肠杆菌大多属于系统发育组A组,其次为B1和D组,没有B2组;PFGE分型结果表明,同一时间内不同动物间存在产CTX-M-14共生型大肠杆菌克隆的扩散传播,但养殖场内CTX-M-14主要是随质粒或其他元件进行水平传播;质粒复制子分型结果表明,携带bla_CTX-M-14的质粒属于IncK(3/14)、 IncF(5/14)、 IncHI2(1/14)、IncFIB 和 IncF(1/14)、IncHI1和IncN(2/14)、 IncI1(2/14)等,且随着时间推移,复制子的种类呈增多趋势。2002-2007年的菌株bla_CTX-M基因的上下游均检测到ISEcp1和IS903;但2009年菌株除了部分在上下游都可以检测到ISEcp1和IS903外,还有的只检测到上游的ISEcp1或下游的IS903;2002-2009年的菌均未检测到ISCR1。16株产CTX-M-14大肠杆菌除了携带其他ESBLs编码基因,如bla_CTX-M79和bla_TEM-135外,还携带其他重要抗生素耐药基因,如oqxA、floR、aac(6')-1b-cr及rmtB,而且2002-2009年大肠杆菌携带耐药基因的种类和数量逐年增多;接合转移试验发现,2002-2005年的菌株,bla_CTX-M-14往往发生单独转移,而2009年分离菌bla_CTX-M-14往往和floR或rmtB位于同一质粒上发生共同转移。这说明养殖场使用氨基糖苷类或氟苯尼考等任何一种抗生素,都可以筛选出产CTX-M-14大肠杆菌并促进其扩散,所以动物养殖过程中要慎用这些抗生素。     

急性回肠炎的治疗与经济效益分析

猪回肠炎是生长育肥猪最为常见的疾病之一。我国生长育肥猪回肠炎的猪场阳性率接近100%，样品阳性率为59.8%；全球范围内回肠炎的猪场阳性率为96%。