分离群体中常染色体上标记基因的数量遗传方差——Ⅰ.含有一个数量性状位点(QTL)时的计算方法

应用常染色体上的标记基因研究能够加快数量性状的遗传进展。亲代由标记基因遗传给后代的加性遗传方差值可以用来测定标记基因这种效益。分别在个体水平上以及在复合连续平衡的分离群体水平上建立了标记基因加性遗传方差值的理论方程。这些方程包括与标记基因连锁的数量性状位点数、这些数量性状位点的效应值以及与标记基因有关的重组率。并就分离群体中标记基因加性遗传方差的期望值进行了推导。在分离群体的系谱选择方案中,常染色体上遗传方差中绝大部分与位于该染色体上的标记基因相关。对于牛的一个平均长度染色体来讲,这部分值大约是该染色体孟德尔分离方差值的40% 。标记基因的位置效应和干扰因素对这一期望值的影响是很小的,而染色体的长度对期望方差值影响很大。如果标记基因缺乏多态型以及染色体替代效应估计偏差会大大降低MAS的选择效果。常染色体上标记基因遗传方差期望值的大小表明:即使当标记基因处在一个非活动位点,在分离群体中,仍有较大的染色体替代效应存在。     

云南桔小寡鬃实蝇种群动态研究

经过水平和垂直地带的性诱观测与室内外调查试验，发现云南桔小寡鬃实蝇年发生４－５代。第二代为主害代，主要为害芒果、桃、番石榴等。成虫诱集高蜂期除柑桔点（高峰期为９－１０月）、甜橙点（高峰期为１０－１２月）外，蓁各点均在６－７月间。各年高峰期早晚和诱集量不同。同年各点成虫高峰期出现的时间也有差异，主要表现为从南到北高峰期推迟。冬季除昆明外，其它各点均可诱到成虫。以高温高湿的西双版纳数量最多。同一地区随     

几种处理条件对舞草种子萌发的研究

本文研究了温度、浓硫酸浸种、温水浸种、细沙磨擦等处理方法对舞草种子萌发的影响。结果表明：舞草种子在自然条件下萌发率很低，萌发的适宜温度为20－30℃；各处理均能显著提高种子萌发率，浓硫酸浸种能减少萌发时间。方差分析表明，经上述方法处理后，所长出的幼根、幼芽的长度与对照相比没有差异，即所采用的处理方法对种子萌发没有产生不利影响。     

酵母β-母葡聚糖在畜禽生产上的应用

酵母β-葡聚糖分布广泛,在畜禽生产上的应用潜力很大。本文主要讨论了β-葡聚糖的提取方法、生物活性,重点讨论酵母β-葡聚糖作为饲料添加剂在畜禽生产上的应用。     

几种处理条件对舞草种子萌发的研究

本文研究了温度、浓硫酸浸种、温水浸种、细沙摩擦等处理方法对舞草种子萌发的影响。结果表明 :舞草种子在自然条件下萌发率很低 ,萌发的适宜温度为 2 0～30℃ ;各处理均能显著提高种子萌发率 ,浓硫酸浸种能减少萌发时间。方差分析表明 ,经上述方法处理后 ,所长出的幼根、幼芽的长度与对照相比没有显著差异 ,即所采用的处理方法对种子萌发没有产生不利影响。     

一种有效分离及在体外扩增成年小鼠精原干细胞的方法

尝试建立一种简便有效的成年小鼠精原干细胞分离培养及扩增的方法。从单只成年小鼠的睾丸中经过两步酶消化法分离精原干细胞,并在去除间质细胞、纯化后的支持细胞饲养层上培养与扩增,获得稳定增殖的精原干细胞系。此方法可显著提高建系成功率,保证细胞系的单一基因型,显著降低体外培养精原干细胞的成本。为成体基因来源的转基因动物的制作和疾病模型的建立提供技术支持。     

酿酒酵母 ERG6基因缺失突变株的构建

设计含有与ERG6基因两侧序列同源的长引物,以质粒pBlue-Kan为模板进行PCR扩增,构建含有Cre/lox P系统的酿酒酵母ERG6基因敲除组件.将基因敲除组件转化至酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)AD1-8,通过同源重组的方式使目的基因缺失,获得为lox P-Kan-lox P序列组件所替换而产生Kanr的阳性克隆子.然后再将质粒pHis-Cre转入阳性克隆子表达Cre重组酶敲除筛选标记,成功获得酿酒酵母ERG6基因缺失的突变株,并命名为AD1-8-δ.     

靶向敲除猪ApoE基因的CRISPR/Cas9系统构建及基因组检测

通过敲除猪的ApoE基因,为后期构建ApoE缺陷型动物模型奠定基础。利用CRISPR/Cas9系统和实验室前期构建的报告载体,分别构建了靶向猪ApoE基因的两个CRISPR/Cas9表达载体和相应的报告载体。通过CRISPR/Cas9表达载体和RG(Red-GFP)报告载体转染HEK 293T细胞荧光观察结果显示,构建的CRISPR/Cas9表达载体均有较高的活性,进一步在流式细胞仪上检测其活性分别为6.50%和6.83%。将CRISPR/Cas9表达载体和RPG(Red-PuroR-GFP)报告载体转染PK15细胞系,经过嘌呤霉素药物筛选后,对富集到的细胞进行基因组检测。结果显示本系统能够对猪PK15细胞中的ApoE基因进行有效的敲除,其敲除效率分别为40%、53.3%。试验结果可为ApoE敲除猪动物模型的构建提供理论依据。     

不同早实核桃品种的生殖特性研究

[目的]研究不同早实核桃品种生殖特性。[方法]以“绿早”、“绿岭”、“香玲”、“辽1”和“辽3”5个早实核桃品种为试材,研究了开花物候期、孤雌生殖能力和花粉形状与大小等生殖特性。[结果]雄先型品种“绿岭”、“香玲”、“辽3”和“辽1”雄花花期（自雄花散粉初期至散粉末期）分别为14、16、11和12d,一般为12—16d,雌花花期（雌花开放初期至未花期）分别为9、9、11和8d,一般为8—11d;雌先型品种“绿旱”雄花花期一般为15～17d左右,雌花花期为10～12d。在所测定的不同早实核桃品种中“绿岭”的孤雌生殖率最高,为42．10％,“绿早”的孤雌生殖率最低,仅为11．64％;“绿早”和“辽3”的花粉生活力均在93．00％以上,“香玲”的花粉生活力极显著低于其他品种．有生命力的花粉仅占62．72％。[结论]为进一步研究旱实核桃的生殖特性提供借鉴。     

PiggyBac转座子介导的诱导细胞永生化转基因载体的构建及其整合效率的检测

【目的】构建在小鼠水平上实现多个目的基因的表达以及标记基因安全删除的转基因载体。【方法】以载体为模板,分别扩增SV40P neo、IRES、tk-PloyA,通过overlap PCR连接,并在两端添加方向相同的LoxP序列,构建转基因基本载体PB-NIT;然后通过overlap PCR扩增获得Tet-CMV-SV40 T-T2A-p 53-PolyA基因表达盒,将其插入PB-NIT中,构建载体PB-NIT-STP;最后将转录因子激活域 rtTA 通过同尾酶连接插入PB-NIT-STP,构建载体PB-rtTA-NIT-STP。【结果】经酶切和测序等鉴定,以上载体均正确;经转座活性鉴定,共转染转座子载体PB-rtTA-NIT-STP和转座酶载体比只转染转座子载体获得的阳性克隆数提高了20倍。【结论】得到了基于PiggyBac转座子的可用于正负向筛选和诱导目的基因表达的转基因载体。