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设计含有与ERG6基因两侧序列同源的长引物,以质粒pBlue-Kan为模板进行PCR扩增,构建含有Cre/lox P系统的酿酒酵母ERG6基因敲除组件.将基因敲除组件转化至酿酒酵母(Saccharomyce cerevisiae)AD1-8,通过同源重组的方式使目的基因缺失,获得为lox P-Kan-lox P序列组件所替换而产生Kanr的阳性克隆子.然后再将质粒pHis-Cre转入阳性克隆子表达Cre重组酶敲除筛选标记,成功获得酿酒酵母ERG6基因缺失的突变株,并命名为AD1-8-δ. 相似文献
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随着农业水利业的发展,如何使得农业水利工程建设变得更加科学合理,从而达到节约整个农业水利工程建设造价的目的,使得工程各方面完成得更好,最终给施工单位或者企业带来更多的经济利益,是一个值得研究的问题。 相似文献
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呼吸系统疾病是圈养和野生爬行动物群体中非常常见的疾病,有高患病率和死亡率。多种传染性和非传染性因素与爬行动物的呼吸系统疾病有关系。常用的诊断技术包括放射摄影、血清学检验、下呼吸道灌洗物培养和鉴定、内窥镜检查等。关于爬行动物的药代动力学理论很少,大多数抗菌药物的有效治疗水平尚未确定。推荐用广谱抗生素和多种药物组合来治疗呼吸系统疾病,推荐的药品有阿米卡星、头孢他定、哌拉西林,应当根据培养观察结果和药物敏感性试验结果适当调整。喷雾疗法是一种抗生素治疗的有效辅助疗法。目前,爬行动物呼吸系统疾病相关研究有非常大的发展空间,要根据爬行动物的进化和生理特点研究适用的技术和手段,以指导疾病的预防、诊断和治疗。 相似文献
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【目的】制备环丙沙星(Crprofloxacin,CPFX)单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb),并对其免疫学特性进行鉴定,为畜产品CPFX残留的快速检测提供技术支持。【方法】采用碳二亚胺法(EDC),将载体蛋白牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)和鸡卵白蛋白(ovalbumin,OVA)分别与CPFX偶联合成免疫抗原CPFX-BSA和包被抗原CPFX-OVA,经紫外(UV)扫描和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定后免疫BALB/c小鼠,应用细胞融合技术筛选分泌CPFX mAb的杂交瘤细胞株,采用体内诱生腹水法制备CPFX mAb,并对其染色体核型、效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。【结果】UV和SDS-PAGE鉴定结果表明,人工抗原偶联成功;免疫的5只小鼠血清抗体效价均达到了1∶105左右,其中4号小鼠血清CPFX抑制效价较高且IC50最低(17.21μg/L),融合后筛选出1株敏感特异的杂交瘤细胞,命名为3D2。3D2细胞培养上清效价为1∶(1.28×103),腹水效价为1∶(1.6×105)。CPFX mAb对CPFX的IC50为9.95μg/L,对恩诺沙星的交叉反应率为128.39%,与其他同系的喹诺酮类抗生素的交叉反应率很低。【结论】获得了高效价、敏感、特异的抗CPFX mAb,为CPFX残留的快速检测奠定了技术基础。 相似文献
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连杆机构是传递机械能的一种装置,在各种机械和仪器中获得广泛应用,连杆机构工作时受到随时间变化的动载荷作用,鉴于此,本文对连杆机构进行动力学分析,以优化连杆机构的质量,获得较小的转动惯量,减小运动过程中的冲击和振动,达到提高连杆机构运动平稳性,提高连杆机构动力学特性的目的。1整体研究框架(1)采用PRO/E三维软件构建了连杆机构的三维模型,为后续ANSYS有限元分析提供三维模型。 相似文献
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养殖菱斑龟肝病组织病理研究 总被引:1,自引:0,他引:1
研究海口市泓旺农业养殖有限公司特种龟鳖养殖场养殖菱斑龟种龟发病的病例(4个),采用病理解剖和组织切片H.E染色,进行组织病理学研究。病理解剖显示,4只病龟的肝脏为病变最严重器官,出现色深及表面分布白色斑块的病理解剖症状;血涂片显示外周血液中的总白细胞比例及嗜酸性粒细胞比例明显增高;组织切片中可见肝组织病变最严重并具一致性,病龟C、D肝实质细胞普遍出现颗粒变性、以嗜酸性粒细胞为主的肝组织炎性细胞浸润,血铁黄质沉积,病龟B肝静脉扩张、分支血液回流受阻,肝窦间隙扩张淤血,部分肝细胞转化为空泡变性,病龟A肝实质细胞坏死、肝细胞索消失。4只病龟肝脏表面还出现局部纤维化坏死,眼睑组织静脉周围也出现嗜酸性粒细胞为主的炎性细胞浸润。根据病理解剖和组织病理检验结果,并结合对本场菱斑龟养殖情况的调查,认为该病为肝病,并伴有眼症状,其他器官组织病变属肝病的相伴症状。病龟由于肝功能逐渐衰竭而致死。 相似文献
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针对首都土地储备制度存在的问题,从土地储备立法等方面对北京土地储备制度进行了研究,提出北京土地储备有一定借鉴价值的建议。 相似文献