表达MERS-CoVS1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERS_(S1)纯化方法的建立

建立一种可线性放大、应用于表达中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)S1蛋白重组狂犬病病毒rSRV9-MERS_(S1)的规模化纯化方法。将收获的病毒去除细胞碎片、灭活后,分别通过3种方法(醋酸锌沉淀+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析、500 000中空纤维超滤柱+Cellufine~(TM )Sulfate亲和层析)进行纯化,经比较筛选出一种温和、目的蛋白回收率高、纯度高的纯化方法。结果显示,500 000中空纤维超滤柱+Sepharose 4FF凝胶过滤层析回收的抗原含量最高,50 mL重组病毒原液经纯化后可得到1.82 mg蛋白,杂蛋白去除率达到97.02%,病毒纯度较高,电镜下可见到病毒囊膜刺突。结合成本等方面综合考虑,此方法优于其他2种纯化方法。本试验筛选获得了一种适用于rSRV9-MERS_(S1)的纯化方法,为rSRV9-MERS_(S1)规模化纯化工艺的建立与MERS新型疫苗的研制奠定了基础。     

不同分子量大豆皮多糖的基本结构及功能性质研究

文章对大豆皮多糖(soybean hullpolysaccahrides,SHP)进行了提取和分离,得到SHP及高分子量组分(high molecular weight soybean hull polysaccharides,SHP-H)和低分子量组分(low molecular weight soybean hull polysaccharides,SHP-L),对三种多糖组分进行了基本结构及功能性质上的分析。利用高效凝胶色谱法测定三种多糖组分的相对分子量,结果显示SHP的相对分子量主要分布在8.6×10~4U及2.5×10~6U附近,SHP-L及SHP-H的相对分子量分别分布在1.4×10~5U和2.3×10~6U左右;FTIR图谱结果表明,SHP-H与SHP无特征官能团上的差异,而经过超滤后得到的SHP-L会出现部分官能团的损失。还原力试验、1,1-二苯基-2-苦味基肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)和-OH自由基清除试验结果表明,SHP、SHP-L和SHP-H均具有较好的抗氧化活性,尤其是低分子量的SHP-L具有较强的抗氧化活性。乳化性和起泡性的结果表明,高分子量的SHP-H具有比SHP-L及SHP更好的乳化性和起泡性。     

木聚糖超滤脱盐废水的电化学降解研究

用RuO2-Ti网作为阳极，Ti网为阴极对木聚糖超滤脱盐废水进行电氧化反应。结果表明：采用电化学法处理木聚糖超滤脱盐废水，使废水的色度、CODcr和BOD5由原来的1400倍、5160mg／L和l820mg／L降为50倍、150mg／L和100mg／L，达到国家排放标准。同时通过紫外光谱图探讨了电化学氧化作用的机理。     

超滤自动控制系统在中水回用井下改造工程中的应用

晓明矿按照集团公司要求,遵守国家环保项目的有关规定,为实现污水综合利用和零排放目标,于2012年底投产建设了一座综合污水处理厂,集中处理生活污水与工业污水。经过一年的调试与运行,中水指标符合设计要求,但无法达到井下机械设备回用水标准。为解决此问题,根据现有的实际情况和治理目标,在处理工艺上投入超滤自动控制系统,实现中水回用井下,以期取得节能减排的实效。     

豆制品加工中黄浆水无害化处理技术研究

对豆制品中黄浆水进行超滤处理的工艺参数进行研究。用外加压管式膜组件对黄浆水进行了超滤试验,分析了液体分别在不同的温度、压力、流速、pH值等因素下对渗透流量和截留率的影响。通过正交试验,得到了处理黄浆水废液的最佳工况。实验结果表明,超滤处理黄浆水的最佳工况是:在压力0.15MPa下,用泵的最大流量对刚排放的黄浆水(温度55℃左右)进行超滤处理,可回收全部脂肪、75%以上的蛋白质和70%以上的总糖。回收后的浓缩物(或干燥物)可以作为饲料或经纯化后食用。     

酶解油菜蜂花粉抑制超氧阴离子自由基的研究

【研究目的】探讨油菜蜂花粉中水溶性有效组分的抗氧化能力及其在黄嘌呤氧化酶体系中抑制O2-.的机理。【方法】采用酶解技术和膜分离技术提取分离油菜蜂花粉中水溶性抗氧化有效组分,用黄嘌呤氧化酶体系测定酶解物的不同相对分子质量级分淬灭超氧阴离子自由基(O2-.)的能力。【结果】实验结果表明,经酶解和超滤后得到的相对分子质量大于1000的组分抑制O2-.的效果非常显著【结论】酶解和膜分离技术是提高花粉抗氧化功效成分含量的有效途径。     

超滤技术对苹果汁加工中主要芳香成分影响的研究

选用青香蕉苹果和国光苹果为原料,研究了超滤对苹果汁主要芳香成分的影响。苹果汁用国产平板膜超滤机澄清,用顶空动态采样法收集芳香物,用气相色谱法分析芳香成分。通过比较超滤前后青香蕉和国光苹果汁芳香成分的变化,截留分子量为10000daltons的聚砜膜PS—10对苹果汁芳香成分保留有良好效果,优于PS—30,PS—60和PS—80;聚砜膜对醇类芳香成分保留优于酯类芳香成分,并对其截留机理作了初步探讨,认为吸附起主要作用。芳香物回收实验表明,12000Pa,50℃为苹果汁芳香成分回收的适宜条件。     

利用膜分离技术和酶技术生产低乳糖牛奶的研究

提出了一种生产低乳糖牛奶的新工艺，即借助膜分离这一新型工程技术手段，对牛奶先进行超滤／稀释超滤处理，透过液经β－半乳糖苷酶水解，再与保留液混合、标准化、均质。从而解决了传统工艺中由于牛奶组分复杂，易引起β－半乳糖苷酶污染、失活的问题。     

鲜榨苹果汁陶瓷膜超滤澄清与除菌的中试试验研究

该研究应用膜孔径为100 nm的陶瓷膜错流超滤中试系统(MEMBRALOX^?，Pall)对果胶酶酶解后的鲜榨苹果原汁进行了过滤澄清与除菌效果研究。结果表明，100 nm陶瓷膜错流超滤的最佳操作条件为：跨膜压力为0.85×10⁵ Pa，温度为50℃，膜面流速为5 m/s；以0.5%次氯酸钠和4% NaOH溶液作为清洗剂，膜通量的恢复率可以达到98%。过滤后果汁中的悬浮颗粒和引起浊度升高的大分子胶体物质大部分被滤除，而果汁的各项质量指标如pH值、总酸、糖度等却未发生     

聚乙二醇化重组人白细胞介素6的放射性标记

分别用常规氯氨T和改进的双相氯氨T法对PEG-rhIL-6进行放射性碘标记,用柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化,同时用三氯乙酸沉淀法和SDS-PAGE电泳法鉴定纯化后的标记化合物放射化学纯度,采用rhIL-6依赖细胞7TD1,用MTT比色法测定标记物的生物学活性。结果表明:1.改进的双相氯氨T法标记率为74.5%,高于常规氯氨T法的62.3%,放射性比活度分别为5.513×105和4.610×105Bq/μg。2.经柱层析法和离心超滤法对标记物分离纯化后,用三氯乙酸沉淀法测得放射化学纯度均能达到99%以上。3.用SDS-PAGE电泳法检测两种标记方法所得的标记物与非标记物的结果表明,常规氯氨T法标记物比非标记物多1条高分子量蛋白带,认为是标记过程中蛋白质受到部分损伤;改进的双相氯氨T的标记物与非标记物蛋白质条带一致,认为蛋白质标记后基本没有受到损伤。4.生物活性检测表明改进的双相氯氨T标记物与非标记物活性之间无显著差异,常规氯氨T法标记物活性略低于双相氯氨T的标记物活性。