小麦种子衰老的生理生化分析

测定了人工老化小麦种子的多项生理生化指标。结果表明，衰老种胚的过氧化氢酶活性明显低于正常种胚，而种子重量，α－淀粉酶活性、电导值、ＭＤＡ及ＴＴＣ还原量等在老与正常种子中的差异均不显著。说明小麦种子衰老的一个重要原因是过氧化氢酶活性降低，Ｈ２Ｏ２积累，从而造成了细胞毒害。     

物理诱变技术在谷氨酸产生菌选育中的应用

简述了几种物理诱变技术对谷氨酸产生菌的作用。着重介绍了采用低能N^＋离子柬注入技术，以D110,D110B为出发菌进行了诱变选育试验。摇瓶产酸率分别比出发菌提高了35．5％和36．7％，这将有利于高产菌株的工业化试验。     

八氢番茄红素脱氢酶基因超表达载体的构建及表达鉴定

八氢番茄红素脱氢酶(PDS)是植物类胡萝卜素生物合成途径中促进番茄红素合成的关键酶,根据番茄中该酶的编码基因序列设计一对特异引物,通过RT-PCR在番茄中扩增出一个约1 900 bp的全长cDNA片段。对这个全长片段构建了超表达载体,酶切检测表明该片段已插入植物表达载体。采用农杆菌介导的方法转化番茄获得10株转基因植株,PCR检测表明外源基因已导入番茄基因组中。转基因番茄果实的番茄红素含量分析结果表明,转基因后代株系番茄红素平均含量比对照增加了1.4倍,PDS编码基因的超表达有效促进了番茄果实中番茄红素的合成和积累。     

小鼠实验性缺氧脑和肺组织MDA·LD含量和LDH活性变化

[目的]探讨小鼠实验性缺氧脑和肺组织丙二醛、乳酸含量和乳酸脱氢酶活性变化。[方法]将18只小鼠随机分为3组:正常对照组、急性缺氧组、急性一氧化碳染毒组,测定脑和肺组织MDA、LD含量、LDH活性。[结果]急性缺氧组和急性一氧化碳染毒组小鼠脑和肺组织MDA和LD含量显著增高。与对照组相比,急性缺氧组和急性一氧化碳染毒组小鼠肺组织中LDH活性显著降低,而在脑组织无显著性变化。MDA和LD含量在缺氧早期,脑和肺组织是易变化性指标,其改变可能与该组织损伤程度有关。LDH变化说明肺组织比脑组织对缺氧产生的自由基损伤更敏感。[结论]该模型为畜牧生产和水产养殖中出现的机体缺氧提供理论依据和实践指导。     

刺鲃同工酶的研究

采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳法,以杂食性鱼刺鲃为试验对象,对其9种组织的酯酶和乳酸脱氢酶的同工酶图谱进行分析,并与不同食性的草鱼、鲢鱼、鳙鱼、鲫鱼等各组织酶带做比较。结果表明刺鲃的酯酶同工酶条带稳定,其组织差异性与具有解毒功能的说法相符,未发现酯酶同工酶的特异性与食性相关;乳酸脱氢酶同工酶具有较高的组织特异性,LDH-C基因的表达与食性之间的关系有待进一步研究。     

Growth and photosynthesis characteristics of Chinese cabbage under poly-γ-glutamic acid

采用水培方法研究了聚-γ-谷氨酸对小白菜地上部生长、叶片叶绿素含量、光合速率(Pn)、气孔导度(G(n))、胞间CO2浓度(Ci)和蒸腾速率(Tr)的影响.结果表明,随着养分含量的降低,聚-γ-谷氨酸处理小白菜较对照叶片Pn、Gs、Tr和Ci均有提高;在90％养分含量下施加聚-γ-谷氨酸显著提高了叶片中叶绿素a的含量;在70％～100％养分含量范围内,小白菜地上部产量较对照均有所提高,说明聚-γ-谷氨酸可通过降低气孔限制值、增加叶绿素含量和提高吸收光强的能力,从而促进小白菜对光能的捕获及其转化,提高其光能利用效率.     

OxAc对大鼠缺血性脑损伤的保护作用研究

目的:观察静脉注射草酰乙酸(oxaloacetate,OxAc)对大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用.方法:线拴法建立大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注损伤模型,54只雄性SD大鼠随机分为5组:Sham组(n=6),MCAO+0.9%NS组(n=12),MCAO+OxAc组(n=12),MCAO+OxAc+GOT组(n=12)和MCAO+OxAc+Maleate组(n=12).脑缺血2h于再灌注即刻给予不同药物静脉注射,分别检测各组大鼠血清与脑脊液中谷氨酸(glutamate,Glu)体积质量分数、神经行为学评分、脑梗死体积及神经元脱失情况.结果:脑缺血2h后大鼠脑脊液中的Glu体积质量分数显著上升(p<0.001),血浆中Glu体积质量分数无明显变化.静脉注射OxAc可以迅速而明显地降低脑缺血大鼠血浆和脑脊液中的Glu体积质量分数(p<0.05);与MCAO+0.9%NS组相比,OxAc的应用可以明显提高大鼠神经行为学评分(p<0.05)、减小脑梗死体积(p<0.01)、明显改善术后大鼠相关脑区神经元脱失现象;同时静脉注射谷草转氨酶(Glutamate-oxaloacetate transaminase,GOT)可以促进OxAc的作用,而同时应用GOT特异性抑制剂马来酸盐(Maleate)可以减弱OxAc的上述作用效果.结论:静脉注射OxAc对大鼠急性局灶性脑缺血具有明显的神经保护作用,且此作用主要是通过其作为血液中的"谷氨酸清道夫"而实现的.     

外源聚γ-谷氨酸对水稻幼苗耐旱性和渗透调节的影响

在水培条件下添加聚乙二醇-6000 (PEG-6000) 模拟干旱胁迫,研究聚γ-谷氨酸 (γ-PGA）对杂交稻品种金优38幼苗耐旱性和渗透调节的影响,探讨γ-PGA在提高水稻耐干旱中的效果和生理作用机制。结果表明,在12.5% PEG-6000胁迫下,使用100、200mg/L外源γ-PGA后,水稻幼苗的叶枯率降低,叶鲜重、干重和叶片活力明显提高,水稻幼苗的耐旱性较未添加γ-PGA处理（CK）增强。经外源γ-PGA处理后,水稻幼苗叶片中活性氧的累积量减少,脯氨酸、游离氨基酸和可溶性总糖的含量较对照分别提高1.3%~8.6%、0.2%~10.7%、13%~28.6%,差异达显著水平 (P< 0.05);外源γ-PGA可明显减缓干旱胁迫下钾离子含量降低的速率。外源γ-PGA可能通过参与水稻幼苗的渗透调节而提高水稻的耐旱能力。     

睾丸酮丛毛单胞菌工程菌构建及稳定性分析

本研究根据同源重组原理,利用电穿孔法将重组质粒pKtac1-act1和pKtac1-act2分别转化睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonas testosteroni）,经PCR和Southern blot筛选获得2株睾丸酮丛毛单胞菌基因工程菌。对这两株基因工程菌的关键酶3α-羟基类固醇脱氢酶/碳酰基还原酶（3α-hydroxysteroid dehydrogenase/carbonyl reductase,3α-HSD/CR）表达情况和细菌稳定性的分析结果表明：两株基因工程菌在没有诱导剂诱导的情况下,其3α-HSD/CR的表达量比原始菌提高了近20倍。添加抗生素进行培养,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR表达均较稳定;而在不添加抗生素的培养基上培养时,两株工程菌的activator和3α-HSD/CR的表达变化较大,蛋白总体表达水平比添加抗生素时低。研究结果可以初步推断,3α-HSD/CR的表达受activator基因的表达调控。     

fat-1基因脂肪组织特异性表达载体的构建及其山羊转基因细胞系的建立

旨在构建一种筛选标记可全部去除的脂肪组织特异性表达fat-1基因的载体,将其转染山羊胎儿成纤维细胞,筛选出稳定整合fat-1基因的转基因细胞系。首先将人工合成的fat-1基因连接至L28-Wnt10b载体(1种带有小鼠脂肪组织特异性启动子Fabp4的载体)上,构建成fat-1基因脂肪组织特异性表达载体L28-fat1;同时经多次克隆构建成1种筛选标记可全部去除的骨架载体MCS-3s-LoxP-RFP;然后,利用Hind III和Not I对上述2种载体进行双酶切,接着进行连接,构建出筛选标记可全部去除的脂肪组织特异性表达fat-1基因的表达载体。采用脂质体介导的方法转染山羊胎儿成纤维细胞,通过G418筛选转基因细胞。酶切鉴定及PCR检测结果表明,成功构建了3s-LoxP-RFP-FABP4-fat1表达载体,并首次获得了脂肪组织特异性表达fat-1基因的山羊胎儿成纤维转基因细胞系,为将来通过体细胞核移植创制脂肪组织特异表达fat-1基因的优质肉用转基因山羊新材料奠定了基础。