桃成花基因PpLFY的克隆与表达及多克隆抗体制备

 以‘八月脆’桃成花诱导期腋芽为试材,克隆得到一个FLORICAULA/LEAFY同源基因,命名为PpLEAFY（PpLFY）,GenBank登录号为EF175869,该基因cDNA全长1 314 bp,ORF为1 248 bp,编码一个含416个氨基酸残基的蛋白,与其他物种中的LEAFY蛋白的同源性较高,为（74.22%~84.69%）。时期及组织特异性表达分析表明,PpLFY主要在叶片、花瓣及成花诱导期及花芽形态分化初期中表达。构建了pGEX-4T-1/PpLFY原核表达系统,获得了可溶性融合蛋白rPpLFY,分子量约为36 kD。利用该蛋白免疫新西兰大白兔,获得了抗rPpLFY的多克隆抗体,ELISA效价为1:10 000。     

2017年北京市猪伪狂犬病血清学调查

为了解北京市猪伪狂犬病野毒感染情况,2017年从北京市7个区157个养猪场（户）,采集5 469份猪血清样品,采用猪伪狂犬病病毒（PRV）gE抗体酶联免疫检测试剂盒进行血清学调查。结果显示：北京市7个区均有不同程度的PRV野毒感染,平均样品阳性率为53.36%。其中：经产母猪阳性率最高（58.28%）,其次是育成猪（57.55%）、育肥猪（54.49%）,后备母猪阳性率最低（37.46%）;散养户的样品阳性率较高,为66.42%,规模猪场的阳性率较低,为47.71%。调查结果表明,北京市PRV野毒感染较为严重,对猪场采取伪狂犬病净化和综合防控措施势在必行。     

民和县鸡“两病”集中免疫效果分析

本文采用血凝抑制试验对民和县饲养的鸡进行了鸡新城疫和禽流感免疫抗体检测,结果表明:鸡新城疫免疫抗体群体合格率为89.0%,禽流感免疫抗体群体合格率为91.3%;"两病"免疫抗体合格率达不到农业部规定的≥70%以上,表明"两病"的免疫抗体效果确实,但个别地区"两病"的免疫效果较差,应强化补针。     

亭湖区域高致病性猪蓝耳病抗体水平监测分析

高致病性猪蓝耳病（Highly pathogenic blueear disease）是由猪繁殖与呼吸综合征病毒（Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus,PRRSV）变异毒株引起的一种急性、高传染性、高致病性的疫病,因其传播速度快、流行范围广、发病率和死亡率高,     

甘肃棘豆黄酮抗氧化活性及免疫活性的研究

为研究甘肃棘豆黄酮的抗氧化及免疫活性,试验通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、超氧阴离子自由基和羟基自由基的清除率测定其抗氧化活性,通过测定不同浓度甘肃棘豆黄酮对小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力、白细胞介素2（IL-2）和免疫球蛋白G （IgG）抗体形成的影响研究其免疫活性。结果显示,甘肃棘豆黄酮对DPPH自由基清除率最高为32.23%,略高于维生素E （28.55%）,低于维生素C （97.05%）;对超氧阴离子自由基清除率最高为80.03%,高于维生素E （69.70%）,低于维生素C （98.69%）;对羟基自由基清除率最高为30.39%,低于维生素C （98.98%）、略低于维生素E （32.57%）。在小鼠脾脏淋巴细胞增殖试验中,随着甘肃棘豆黄酮溶液浓度的提高,脾脏淋巴细胞相对增殖率也提高,当其浓度为200 μg/mL时,小鼠脾脏淋巴细胞的增殖率为23.40%;200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组IL-2水平极显著高于对照组（P<0.01）,50和100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组与对照组无显著差异（P>0.05）;各甘肃棘豆黄酮组IgG抗体水平均极显著高于对照组（P<0.01）,其中,50 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于100和200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）,100 μg/mL甘肃棘豆黄酮组极显著高于200 μg/mL甘肃棘豆黄酮组（P<0.01）。综上所述,甘肃棘豆黄酮具有较好的抗氧化活性及免疫活性。     

云贵川三省部分地区警犬狂犬病血清中和抗体调查

为评价警犬的狂犬病免疫效果,了解影响免疫效果的因素,2017年在云南、贵州、四川三省部分地区免疫狂犬病疫苗的警犬中随机抽样,采用荧光抗体病毒中和试验(FAVN),检测血清中狂犬病病毒中和抗体效价。结果显示,共抽检187只警犬,中和抗体阳性127只(≥0.50 IU/m L),总体免疫合格率为67.91%,其中云南、贵州、四川3省的免疫合格率分别为57.14%、68.33%、76.06%。结果分析表明,警犬狂犬病免疫合格率与犬的年龄、免疫次数、疫苗类型等因素有关,而与性别和品种无关。建议完善警犬免疫程序,加大血清中和抗体监测力度,对不合格警犬及时加强免疫;对每个影响因素进行连续性分析,以确定影响警犬狂犬病免疫合格率的具体因素。     

规模猪场猪瘟病毒、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒、伪狂犬病病毒及口蹄疫病毒抗体水平监测及免疫效果评价

某100头基础母猪的规模猪场,在常规免疫情况下,10 余头母猪在妊娠后期出现了流产现象。为调查该猪场免疫效果,分别采集空怀母猪、妊娠前期母猪、妊娠后期及妊娠后期流产母猪血清共20份,进行猪瘟病毒 (Classical Swine Fever Virus,CSFV)、高致病性猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 (Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus, HP-PRRSV)、伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)-g E、口蹄疫病毒 (Foot and Mouth Disease Virus,FMDV) 抗体检测。检测结果表明,PRV-gE 抗体和 HP-PRRSV 抗体阳性率均在 95%以上,提示该猪群可能存在 PR 野毒感染;CSFV抗体阳性率为 85%,且阻断率大于 0.6 的占 53.8%,说明该猪群 CSFV 抗体没有达到理想水平;FMDV 抗体阳性率为 35%,说明该猪群 FMD 免疫效果较差,应该及时补免。调查结果提示,PR 野毒感染可能是导致该规模场母猪流产的主要原因。     

猪流行性腹泻IgA、IgG抗体与PEDV抗原相关性研究

为了研究仔猪所吮乳汁中IgA抗体水平与乳汁中PEDV感染情况,探讨母猪免疫猪流行性腹泻疫苗后乳汁与血清中IgA、IgG抗体水平的相关性,临床采集多家规模化猪场母猪群乳汁、血清样品以及发病仔猪所吮母猪乳汁样品。采用实验室已经建立的IgA、IgG抗体ELISA方法,检测临床上猪流行性腹泻疫苗免疫后IgA抗体与IgG抗体的相关性,同时采用RT-PCR方法检测发病仔猪所吮乳汁中PEDV感染情况。结果表明,免疫猪流行性腹泻活疫苗后母猪乳汁中IgA抗体水平与血清中IgA、IgG抗体水平呈现很好的正相关性;当发病仔猪所吮母猪乳汁IgA抗体检测结果为阴性时,其PEDV抗原检测结果为阳性;乳汁IgA抗体检测结果趋于阳性样品临界值时,其PEDV抗原检测结果亦为阳性。结论:乳汁中低水平的IgA抗体很难有效地保护仔猪抵御PEDV感染;乳汁中IgA抗体与血清IgA、IgG抗体呈现很好的相关性,且乳汁中IgA抗体水平远远高于血清;通过IgG抗体水平可以间接反映乳汁中的IgA抗体水平,在初乳样品采集难度较大的情况下,可用于间接评估猪流行性腹泻免疫保护水平。     

皮下注射猪瘟疫苗对抗体水平变化的研究

探索仔猪皮下注射与肌肉注射抗体水平变化的差异,验证猪群进行猪瘟疫苗皮下注射与肌肉注射之间存在的效果差异并分析变化规律,为免疫接种方案的调整优化提供新的思路,为各个猪场减少防疫成本提供有益参考。     

生猪防疫抗体监测采样方法和工作体会

近几年来,每年春季、秋季重大动物疫病防控工作结束后,各级畜牧兽医部门都要进行重大动物疫病防控工作检查验收,进行防疫密度检查和动物疫病抗体监测,目的就是检查重大动物疫病防疫工作的实际效果。现将多年来生猪防疫抗体监测采样方法步骤和工作经验与体会报告如下。