Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型VP60蛋白重组腺病毒的构建及鉴定

【目的】试验旨在以复制缺陷型人5型腺病毒(Ad5)为载体,构建Kozak序列引导的表达兔出血症病毒2型(RHDV2)VP60蛋白的重组腺病毒,为RHDV2新型疫苗研究提供依据。【方法】修饰、合成带有Kozak序列的VP60基因序列,将其与腺病毒穿梭质粒进行重组,转化大肠杆菌TOP10感受态细胞,构建重组腺病毒穿梭质粒,并利用酶切与测序对重组腺病毒穿梭质粒进行鉴定;采用Ad Max腺病毒包装系统,基于HEK293细胞进行穿梭质粒与腺病毒骨架质粒的定点同源重组,构建重组腺病毒Ad5-RHDV2-VP60并感染HEK293细胞,通过RT-PCR、Western blotting及间接免疫荧光试验(IFA)对重组腺病毒进行表达验证;利用Reed-Muench方法测定重组腺病毒的病毒滴度。【结果】重组腺病毒穿梭质粒酶切鉴定结果可见2条大小分别为3 895和1 752 bp的条带,测序比对结果显示,其与GenBank中公布的相应序列相似性>99%,表明穿梭质粒构建成功。RT-PCR结果可见大小约为515 bp的特异性条带;Western blotting结果显示,大小约为60 ku的VP60...     

以"三个代表"思想为指导深入开展高校学生思想政治工作

随着我国高等教育事业的快速发展，高校学生思想政治工作面临着新的挑战和机遇。江泽民总书记在中国共产党成立80周年大会上的重要讲话，对“三个代表”思想做了深刻阐述，为当前高校思想政治工作指明了方向。因此，高校要认真学习江总书记“七一”重要讲话，以“三个代表”思想为指导，把高校学生思想政治工作不断推向深入。一、以“三个代表”的思想为指导，坚持以培养高素质人才为目标，不断提高学生的科学文化素质江总书记在“七一”讲话中指出，科学技术是第一生产力，而且是先进生产力的集中体现和主要标志。因此我国要大力推动科技进…     

蔬菜病虫害的物理防治

科学运用物理防治措施，可有效防治蔬菜病虫害，减少了化防次数，保护了生态环境，减少药物在蔬菜上的残留。因此，推广应用物理方法防治病虫害就相当重要。下面介绍几种物理防治方法：     

无公害马铃薯栽培要点

一、选择品种。主要选用早熟高产优质的脱毒品种鲁引1号等优良品种。鲁引1号生育期60天，淀粉含量高，蛋白质含量丰富。     

酮病奶牛糖、脂代谢变化规律及营养调控研究进展

围产期奶牛以机体内部变化复杂和外部饲养管理变化剧烈为特点，淘汰率始终居高不下，因此，围产期是保证奶牛健康和维持经济效益的调控“窗口期”。酮病是围产期高发性和群发性的代谢疾病之一，酮病的发生和治疗过程对奶牛福利及经济效益造成巨大威胁。因此，本文详细阐述了围产期奶牛糖、脂代谢的变化规律，并在此基础上总结酮病奶牛的代谢特征和最新研究进展，为寻找调控围产期奶牛糖、脂代谢的措施和预防酮病的发生提供理论依据。     

不同喂奶方式对哺乳期犊牛发病率的影响

本实验针对新疆奎屯地区某3000头奶牛场的哺乳期犊牛就不同的喂奶方式进行对比试验,喂奶方式主要采取用2.5kg的不锈钢盆饲喂和2.5kg的犊牛喂奶壶饲喂,饲喂牛奶分为采取常温和巴氏消毒两组。实验结果表明:试验1组与对照组比:腹泻率降低36.67%,肺炎率降低6.67%,死亡率下降10.00%,治愈率提高13.34%。试验2组与对照组比:腹泻率降低70.00%,肺炎率降低20.00%,死亡率下降10.00%,治愈率提高23.344%。采用奶壶饲喂巴氏消毒牛奶可有效地降低疾病发生率,保障犊牛健康,同时该方式简便易行、便于管理。     

磁铁在集约化奶牛养殖中的应用

随着农业结构调整政策的落实和畜牧业养殖的优惠政策的出台，现代畜牧业的迅速发展，随着人民生活水平的提高，对牛奶和奶制品的需求越来越大．近几年国际市场牛奶价格一直看涨，奶牛养殖业异军突起，传统的农户散养模式逐渐转变为规模化、现代化、集约化的高效精养模式，在本地区形成了一条产业链。形成支柱产业。但由于农业机械化作业的普及．在饲草料种植、     

麦田冬春冻害原因及预防补救措施

近年来，由于冬暖现象和倒春寒的频繁发生，造成麦苗发生冻害，轻者减产，重者毁收。现就其发生原因及预防、补救措施总结如下：     

气象因素对杨梅的影响与园地选择技术

通过分析温度、湿度、降水量、光照、风等气象因素对杨梅树体生长和果实发育的影响,同时通过分析在不同坡向、海拔以及其他环境条件下的气象特点和杨梅在其环境下生长的表现,指出适宜杨梅栽培生长的环境地点。