兔出血症病毒CD株衣壳蛋白(VP60)基因的克隆、核酸及氨基酸序列比较分析

以兔出血症病毒 CD株人工感染家兔 ,发病死亡后 ,取肝脏匀浆 ,用 Trizol试剂从匀浆上清中提取病毒 RNA。根据 Gen Bank已发表序列保守区设计并合成引物 ,采用 RT- PCR方法扩增了 RHDV衣壳蛋白 VP6 0基因。将所扩增片段克隆到 p MD18- T载体上 ,并进行了序列测定 ,测序结果表明 ,CD株 VP6 0基因全长 174 0 bp。该序列与已发表的其他分布于世界各地的 14株 RHDV序列进行了比较和基因进化树分析。无毒株与各强毒株之间的同源性为 85 .3%～86 .5 % ,强毒株间的同源性较高 ,为 92 .1%～ 10 0 %。根据进化树可把强毒株分为 2大群 ,一群为 CD株、Iowa2 0 0 0株、0 0 - 139株、99- 0 5株 ,其余的为另一群。进一步细分 ,还可以分为 4个亚群和 7个组。但毒株之间的地域性差异并不明显。同时根据 15株 RHDV VP6 0基因的核苷酸序列推导了其所编码的氨基酸序列 ,并进行氨基酸序列的比较和亲水性、柔性区、抗原性和表面结构的比较分析。结果显示 ,各毒株氨基酸之间的的同源性在 90 .5 %～ 10 0 %之间 ,其中无毒株与各强毒株之间的同源性为 90 .5 %～ 91.9% ,强毒株间的同源性在 95 %～ 10 0 %之间 ;氨基酸变异分析未发现突变造成的 VP6 0蛋白高级结构的根本性变化     

牧草新品种--高丹草栽培与利用

近两年来，辽宁省各地陆续引进牧草新品种一高丹草。高丹草是用高粱和苏丹草杂交制成，它综合了高粱茎粗、叶宽和苏丹草分孽力、再生力强的优点，杂种优势非常明显。具有抗旱性强，耐热，较耐寒，在降水量适中或有灌溉条件的地区可获得较高产量等特点，深受养殖户的欢迎。     

嗜肾型传染性支气管炎病毒X株的分离和致弱培育

利用鸡胚分离法从发生肾变病型传染性支气管炎的病鸡分离嗜肾型传染性支气管炎病毒X株,该病毒株能引起鸡胚发育受阻,鸡胚和雏鸡肾脏肿大、输尿管尿酸盐沉积,能被传染性支气管炎病毒M型血清部分中和,初步研究表明是一个新的毒株。通过SPF鸡胚连续传代,获得了嗜肾型传染性支气管炎弱毒疫苗毒株X 93。结果显示,X株经过鸡胚传代,对鸡胚的致死率由原代的0上升到90代的82%;在每0.1 mL鸡胚中的病毒含量由原代的10^5.0E ID50上升到90代的10^7.8E ID50;对3日龄SPF雏鸡的致病率和致死率分别由40代时的70.0%和40.0%下降到90代时的0值;与X 93接种鸡一同饲养的实验鸡全部健康存活;X 93回归雏鸡连传5代,未见毒力返强现象。     

如何提高疫苗免疫接种的效果

随着饲养业的持续发展和集约化程度的不断提高,动物传染病的流行亦产生许多新特点。如一些疫病以出现非典型症状、新的病型、超强毒株等等,若发生上述情况,我们仍然用传统的免疫方法预防,这样极有可能导致疫苗接种达不到预期的预防效果,甚至于免疫失败。提高疫苗免疫接种的效果对于广大饲养户来讲至关重要。     

鸡致病性大肠杆菌肠毒素(LT)的鉴定及其基因的克隆

鸡致病性大肠杆菌分离株O78经家兔肠袢结扎试验(RILT)证实,该菌株产生热敏性肠毒素(LT)。用PCR技术从该菌株中扩增出1.2kb的LT基因,然后将纯化的PCR产物克隆到pGEM-T载体中,转化至受体菌JM109中。用Amp/IPTG/X-gal琼脂平板蓝白菌落筛选得到阳性重组菌株,提取质粒用SphI和SalI双酶切鉴定,结果证实,构建的克隆质粒pXCLT1含有LT基因。     

阻断ELISA与中和试验检测猪瘟疫苗免疫猪血清抗体的比较

应用阻断ELISA和中和试验2种不同的方法对猪瘟疫苗免疫前后的猪血清抗体进行了检测,在所检测的6头仔猪免疫前和免疫后的12份血清中,2种方法的检测结果相符.应用Western blot对部分血清进行了验证,结果与2种方法检测结果一致,表明阻断ELISA和中和试验结果确实、特异,能真实反映免疫猪群的抗体水平.     

东部山区禾本科饲料作物引种观察试验

近些年，东部山区为了保护生态环境、涵养水源，全面实行封山育林，林间隙地放牧被禁止，导致放牧地骤减、饲料短缺。为解决舍饲饲养家畜饲草饲料不足的问题，降低饲养成本，提高养畜经济效益，我们引进10个1年生饲料作物品种，在地处东部山区的新宾县永陵镇进行对比观察试验，以求初步确定适宜东部山区种植的1年生饲料作物品种。     

多年生宿根花卉芙蓉葵耐涝性及栽植技术研究

为雨季易涝的滨海淤泥质盐碱地园林绿化及生态植被修复应用提供科学依据,以一年生越冬根为试材,以具有防雨功能、可人为控制排灌水的水泥池为试验设施,设长期保持2 cm水层和干湿交替水分管理(CK)2个处理,对芙蓉葵的耐涝性进行了研究。结果表明:株高、基径粗和叶片叶绿素含量,长期淹水处理与对照为差异显著,说明芙蓉葵具有很强的耐涝性。以一年生越冬根为试材,以栽植时间、栽植深度、栽植密度和起苗放置时间为参试因素,采用4因素3水平正交设计,对芙蓉葵栽植技术进行了研究,结果表明最佳移栽时间为4月中旬,栽植深度15 cm,栽植密度8穴/m2,起苗放置时间不超过1 d。     

滨海泥质重盐碱地综合改良与植被构建关键技术研究

为实现滨海泥质重盐碱地低成本原土直栽绿化的目的,筛选出适应冀东滨海地区生态环境、耐盐能力较强的绿化植物品种65个;明确了17种绿化植物的存活阈值及耐盐阈值;加入磷石膏0.45%(2.0 t/666.67 m2)、半腐熟玉米秸秆肥5 cm(33 m3/666.67 m2),混入0~40 cm土层,以提高黏土的通透性;冬春季节地表覆盖粉碎秸秆5.0~10.0 cm抑制返盐;在盐碱含量较高的地块可先种植盐地碱蓬吸盐、降盐;在淡水资源匮乏的地区可利用咸水结冰淋洗盐碱。通过上述措施的综合应用,有效地解决了滨海泥质重盐碱地改良的技术难题,实现了滨海泥质重盐碱地低成本原土直栽绿化。     

唐山滨海地区农业发展模式研究

综合分析了唐山滨海盐碱地区土壤资源分布状况,提出该地区的盐碱地开发利用应遵循高产、高效、综合、生态的“盐碱农业”战略思想,并提出适宜该地区不同土壤状况的3种农业发展模式,即冀东冲积平原区的高产高效农业模式、冀东滨海交接平原的保护性农业综合开发模式和冀东近代滨海平原区生态保护模式。