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为了建立区分疫苗株与广西分离株的检测方法,根据GenBank上的山羊痘病毒序列设计1对引物,用来扩增山羊痘病毒P32基因,通过对国内疫苗株及6株广西分离株的P32基因进行克隆、测序比较发现,所有广西分离株核苷酸651位的碱基全部由T变为C,647位~652位核苷酸构成由TGTATA变异为TGTACA,多了1个限制性内切酶Bsp1407Ⅰ位点,因此用特异性引物扩增出739 bp的目的片段后,再用限制性内切酶Bsp1407Ⅰ进行酶切分析,疫苗株可以切成135 bp和604 bp 3个片段,广西分离株可以切成135、226、378 bp 3个片段。结果表明,所建立的PCR-RFLP方法可以区分疫苗株和广西分离株。 相似文献
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为了建立区分疫苗株与广西分离株的检测方法,根据GenBank上的山羊痘病毒序列设计1对引物,用来扩增山羊痘病毒P32基因,通过对国内疫苗株及6株广西分离株的P32基因进行克隆、测序比较发现,所有广西分离株核苷酸651位的碱基全部由T变为C,647位~652位核苷酸构成由TGTATA变异为TGTACA,多了1个限制性内切酶Bsp 1407Ⅰ位点,因此用特异性引物扩增出739bp的目的片段后,再用限制性内切酶BsP1407 Ⅰ进行酶切分析。疫苗株可以切成135hp和604bp3个片段,广西分离株可以切成135、226、378bp3个片段。结果表明,所建立的PCR—RFLP方法可以区分疫苗株和广西分离株。 相似文献
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据分析,软体动物贝壳中含有钙、鳃、钴、镁等矿物活性元素约30种,氨基酸10余种,以及多肽、胶原等。这些物质绝大多数是动物生长发育、提高免疫力、增强体质所必需的,如钙、硒、锶、镁、钴等为鱼、虾、蟹的磷、甲壳及骨骼所必要的元素;锌、镍、磷等为神经系统和生殖系统的重要组 相似文献
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猪链球菌9型的分离与鉴定 总被引:3,自引:0,他引:3
猪链球菌属于1987年新设立的一个种,按荚膜抗原的差异分为35个血清型,包括1~34和1/2,猪链球菌2型是其中毒力最强、最常见的一种人畜共患病〔1~3〕,猪链球菌9型也是猪链球菌病的一种重要病原,在荷兰、巴西、意大利、加拿大、法国等都有流行〔4,5〕。我国是养猪大国,随着猪规模化养殖的不断扩大,猪链球菌病也呈明显上升趋势,发病率和死亡率均较高,损失非常严重〔6,7〕。目前对猪链球菌2型研究很多,但对猪链球菌9型研究甚少,我们实验室对分离到的9型菌株进行了分子生物学鉴定。1材料和方法1.1材料1.1.1标准毒株:猪链球菌9型毒株由中国动物卫生… 相似文献
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猪链球菌2型多重PCR检测方法的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
设计3对引物,分别扩增链球菌属特异性gdh、猪链球菌种特异性16S rRNA和猪链球菌2型特异性cps2J等基因,目的片段大小分别为725bp、523bp和387bp。利用合成的3对引物并通过对反应条件与反应体系的优化建立了多重PCR。应用该多重PCR检测了分离到的链球菌1105株,检出猪链球菌667株,猪链球菌2型33株。研究结果表明,该方法特异性高、敏感性强,可广泛应用于猪链球菌病的快速诊断及流行病学调查。 相似文献
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棉花细胞质雄性不育花药败育过程中内源激素的变化 总被引:14,自引:0,他引:14
利用酶联免疫检测(ELISA)技术,研究了棉花细胞质雄性不育系、保持系、恢复系和杂种一代花药在造孢细胞增殖期、花粉母细胞减数分裂期、四分体至小孢子释放期、花粉发育期和花粉成熟期内源吲哚乙酸(IAA)、赤霉素(GA3)、玉米素核苷(ZR)和脱落酸(ABA)含量的动态变化。结果表明,在保持系、恢复系和杂种一代可育花药间内源激素含量差异不明显,但在可育与不育花药间差异显著。在IAA、GA3和ZR含量上,不育花药低于可育花药,但在ABA含量上,不育花药高于可育花药,这种差异在花粉母细胞减数分裂时期达最大值。根据内源激素的功能推测,不育花药IAA含量过低使花药淀粉积累受阻,GA3含量不足影响花粉母细胞和绒毡层细胞的膨大,过低的ZR含量使花粉母细胞不能分裂形成四分体,过高的ABA含量促进花粉母细胞退化和死亡。 相似文献