高致病性禽流感抗体水平监测及免疫程序制定

采用血凝抑制试验对贵阳市家禽高致病性禽流感免疫状况及试验鸡母源抗体和首免后免疫抗体的消长动态进行了检测，结果表明，贵阳市高致病性禽流感抗体几何平均效价为3．38210g2；试验鸡母源抗体群体几何平均效价及免疫保护率11、16日龄分别为2^4.3、2^3.41及45％、20％；免疫抗体群体几何平均效价及免疫保护率51、58日龄分别为2^5、2^2.25及66．7％、0％。该地区应及时加强免疫，首免时间和二免时间分别定为15、51日龄。     

应用正向间接血凝试验检测山羊痘抗体

采用硫酸铵盐析、Sephadex G-200柱层析的方法纯化山羊痘病毒,以病毒抗原致敏绵羊红细胞建立了山羊痘正向间接血凝试验,并进行了最佳试验条件的摸索.结果表明,试验所制备的诊断液能与山羊痘参考阳性血清发生特异性凝集,其凝集现象能被山羊痘阳性抗原特异性抑制,与其它常见的动物病阳性血清无交叉反应.用本方法及琼脂扩散试验对山羊痘血清进行检测,IHA阳性检出率为89.1%（41/46）;而AGP阳性检出率为34.8%（16/46）.表明正向间接血凝试验比琼脂扩散试验敏感性高.本次试验制备的正向间接血凝试验诊断液可用于兽医临床上进行快速诊断.     

猪繁殖障碍疫病的三重PCR法鉴别诊断

为建立一种简便、快速检测猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪细小病毒（PPV）和猪伪狂犬病病毒（PRV）3种病原的多重PCR方法，针对PRRSVN基因、PPVVP2基因及PRVgp50基因分别合成了1对特异性引物，通过PCR均扩增出分子长377bp、445bp和217bp的DNA条带，与预期扩增片段相符。以3对引物同时对PRRSV、PPV和PRV疫苗株进行多重PCR扩增及反应条件的优化，同时扩增出3条特异性条带。利用所建立的多重PCR方法，对贵州省11个养猪场的40份疑似病料进行检测，结果显示，PRRSV、PPV和PRV的阳性检出率分别为62．5％、17．5％和0％。     

鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质互作蛋白质基因荧光定量PCR检测方法的建立

为进一步阐明鸭肠炎病毒(DEV)的致病机理,本试验建立检测鸭肠炎病毒核衣壳蛋白质(NP)的互作蛋白质(PKCI)基因荧光定量PCR方法。针对PKCI基因设计特异性引物,经PCR扩增目的基因构建重组质粒p MD18-T-PKCI,将其作为阳性标准品构建荧光定量PCR标准曲线,并对建立的荧光定量PCR方法进行重复性、特异性和敏感性试验。结果显示:标准曲线的线性关系为Y=-3.31x+42.00,相关系数为-1.00,扩增效率为100%,熔解曲线仅出现单特异峰,对H5亚型、H7亚型和H9亚型禽流感病毒及新城疫病毒、鸭肝炎病毒均未检测到荧光信号。表明本试验建立的方法具有良好的稳定性、特异性和灵敏性。     

斑点叉尾鮰致病性嗜水气单胞菌的分离

从贵州乌江库区某渔场发病的斑点又尾鲴中分离出4株细菌。经形态学、染色特性、溶血性和生理生化特性鉴定，分离到3株嗜水气单胞菌。实验接种到鲤和小白鼠分别于48h和72h全部死亡，并从实验鲤鱼和小白鼠中回收到分离菌。药敏试验表明，它们对常用抗生素呈不同程度的敏感性。     

美国七彩山鸡传染性法氏囊病及其并发感染

１９９８年贵阳地区两个珍禽养殖场（Ａ场和Ｂ场）的七彩山鸡爆发一种以急性死亡、法氏囊肿大为特征的传染病。Ａ场无并发感染，死亡率为１１．４％，死亡高峰出现在第５天：Ｂ场由于致病性链球菌的混合感染，死亡率上升到５０％，死亡高峰提前到么３天，剖解病变更加复杂化，该场的致病性链球菌是加剧本病高死亡率和严重出血性素质的真正原因。另对两场的鸡新城城疫（ＮＤ）和和鸡减蛋综合症（ＥＤＳ）血清效价测定结果表明， 地Ｎ     

贵州省鸡肿瘤性疾病的发生现状及防制对策

肿瘤性疾病是严重危害养鸡业的重要疾病之一。引起鸡发生肿瘤的疾病常见的主要有马立克氏病（MD）、禽白血病（AL）和网状内皮增殖症（RE）。鸡肿瘤性疾病在我省长期存在，1990--1994年周碧君、李永明、吴彤等人^[1,2]对贵州省不同地（市）、县的鸡场和个体农户散养的鸡群采样并进行鸡主要传染病的血清学调查。调查结果表明：我省6个地区10个鸡场及部分偏僻乡镇农户鸡群的MD血清抗体阳性率为36．9％，羽髓抗原阳性率为60．5％；调查品种有贵州黄、贵农黄、白洛克、乌骨鸡等10种，贵州毕节饲养的两种乌骨鸡中，江西泰和乌骨鸡MD感染率达83．3％，贵州地方乌骨鸡达80．5％。本实验室对2005--2008年间各地送检的鸡肿瘤病例进行了汇总，以期找出我省鸡肿瘤性疾病发生的趋势和特点，为防制工作提供一些依据。     

绵羊肺炎支原体贵州株P113基因的克隆与生物信息学分析

为获得绵羊肺炎支原体贵州株P113基因生物信息学特征,应用DNAStar、Mega 5.0、Protparam、Protscale、IEBD等工具对其(GZ-QX1株)P113蛋白特性、结构和功能进行预测分析。结果显示,绵羊肺炎支原体GZ-QX1株P113基因序列大小为3 240bp,编码1 079个氨基酸,与绵羊肺炎支原体Y98标准株、四川SC01株、猪肺炎支原体P97、丝状支原体山羊亚种、山羊支原体山羊亚种的核苷酸序列同源性分别为99.9%、81.9%、60.4%、3.9%和5.2%。P113蛋白是分子质量约119ku的碱性蛋白,具有较多优势抗原表位;蛋白结构分析显示,P113蛋白无跨膜结构,有9个N糖基化位点,59个丝氨酸、16个苏氨酸的磷酸化位点,14种保守的特异性蛋白质激酶的结合位点;蛋白功能分析认为,P113可能是某信号传导通路的信号分子,也是一种具有良好抗原性的结构蛋白。     

一例竹鼠大肠杆菌病的实验室诊断

为查明某养殖场竹鼠发病的原因,通过剖检观察病理变化;采集病料进行细菌分离培养,分离菌通过生化试验、16S rDNA基因序列同源性分析鉴定及致病性试验进行综合诊断。结果:剖检病死竹鼠可见皮下严重出血,心脏肿大,心包有明显积液,心脏表面血管充血,肝脏淤血、肿大、边缘呈锯齿状、颜色为暗黑色,肾脏肿大伴有点状出血;从病料中分离的细菌经鉴定为大肠杆菌(命名为GZ-SS),并能致实验小鼠死亡,具有致病性。结论:综合诊断竹鼠发病死亡的原因为致病性大肠杆菌感染。     

2007—2011年贵州省猪圆环病毒感染的流行病学调查

为了解贵州省近5年来猪圆环病毒的感染情况,以便更好地控制该病,贵州大学预防兽医学实验室收集2007—2011年贵州省9个市(州)不同饲养规模(养猪户)及屠宰场未免疫猪血清样本4 980头份,2011年19个猪场(屠宰场)的可疑病料133份,采用ELISA及PCR方法对猪圆环病毒2型(PCV2)抗体及病原核酸进行检测。结果显示:贵州省9个市(州)不同饲养规模(养猪户)、生猪屠宰场及不同生长阶段均可检出PCV2抗体,总体阳性率为43.45%(2 164/4 980);2007—2011年抗体阳性率呈现稳步上升趋势。对不同饲养规模不同生长阶段PCV2抗体阳性率进行比较,总趋势表现为:规模饲养场>种畜场>散养户,且散养户与规模饲养场、散养户与种畜场之间均差异显著(P<0.05);不同生长阶段PCV2抗体阳性率表现为经产母猪>种公猪>后备母猪>哺乳仔猪>断奶仔猪及育成猪。PCR检测的19个猪场133份可疑病料中,有16个猪场PCV2检测为阳性,检出率达84.21%(16/19),103份病料检出PCV2病原核酸,阳性率达77.44%(103/133)。说明贵州省PCV2的感染已经日益严重。本研究为该病的综合防控提供流行病学资料。