微卫星PAGE银染法及其干胶的简易制备

为了使微卫星PCR扩增的DNA片段能得到较好的分离和长期保存实验胶片 ,研究利用 1 5对猪的微卫星引物 ,经PCR扩增 ,非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,银染法显色 ,然后制成了干胶。结果表明 ,聚丙烯酰胺凝胶具有很好的分离微小差异DNA片段的能力 ,而且银染后制成的干胶可长期保存。此法尤其适用于不具备凝胶成像系统和干胶机的实验室使用。     

聚丙烯酰胺凝胶银染技术的优化

通过配制固定液、渗透液和显色液中主要成分的梯度浓度,依次处理凝胶,对比显色效果,从而对银染过程中各个试剂的配方进行了探讨和优化。并通过大量的实验验证,在不影响染色质量的前提下缩短了3种处理液的处理时间,明显提高了实验效率。     

DDRT-PCR技术研究进展

mRNA差异显示技术能简便快速地了解不同细胞或者同类细胞在不同生长阶段、不同生理条件下的基因表达情况,为研究生命活动过程提供重要信.本文对差异显示技术的基本原理、方法改进以及应用进行综述.     

用银染方法分析RAPD产物

本文介绍了采用聚丙烯酰胺凝胶分离ＲＡＰＤ产物，以及凝胶银染技术。与传统的溴化乙锭染色法相比，银染法染色灵敏而清晰，具有广泛的推广应用价值。     

牡丹基因组AFLP银染反应体系的建立和优化

采用改进的SDS方法,从牡丹成熟叶片中提取基因组DNA,所得DNA样品的A260/A280值在1.7～1.8之间,琼脂糖凝胶电泳主带清晰、DNA纯度高、较少降解、不含酶反应抑制剂,可被MseⅠ和PstⅠ两种限制性内切酶完全酶切.通过酶切连接、预扩增、选择性扩增、银染等试验过程,成功建立了牡丹品种AFLP银染反应体系,得到了清晰的指纹图谱.对扩增结果进行聚类分析,得到了23个牡丹品种的聚类分析图.     

PAGE银染和条带回收方法的改进

为了提高聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的银染效果和条带回收的效率,以广玉兰DNA为材料进行ISSR-PCR分析,比较了两种银染(常规银染法和快速银染法)和条带回收法(乙醇糖原法和改进的煮沸法).结果显示:两种银染方法效果一致,但常规银染要用2~3 h,而快速银染仅用30 m in,是常规银染的1/6~1/4;改良的煮沸法回收条带比乙醇糖原法更简便、更快捷.因此,快速银染和改良的煮沸法条带回收法可以应用在以后的研究中.     

一种新的微卫星PAGE的DNA显带方法

提出了一种新的微卫星聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)显带方法,即微卫星PAGE荧光染料显带法,与琼脂糖凝胶荧光染料显带法和PAGE银染显带法相比,该法具有简单易行、快速高效、分辨率高、背景清晰等特点,是一种成功的DNA显带技术。     

检测玉米种子纯度PAGE银染时应注意的问题

SSR（微卫星标记）分子检测方法已在玉米品种纯度及真实性检测上广泛应用．银染作为最后一个环节在检测中起到举足轻重的作用。如果银染出来的带型明亮、清晰，说明以前的各个环节技术操作完成准确无误：反之．若银染出现无带、带弱、缺失等现象，可能是前面哪个环节出了差错．也可能是因染色环节的失误所致。     

人参蛋白的等电聚焦电泳分析

采用薄层等电聚焦的方法将人参水溶性蛋白分成20多个组分,并测定出绝大部分人参水溶性蛋白的PI在4～7范围内。以激光扫描法测出各组分的百分含量。用Coomassie brilliantblue及银染两种方法染色比较,银染的灵敏度大大超过了常规的Coomassie brilliantblue的染色对法。     

微卫星PCR聚丙烯酰胺凝胶银染法影响因素的分析研究

 微卫星PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的DNA检测方法。此法分离小于500bP的DNA片段效果很好，分辨率极高，只相差1bp的片段也能分开，且可容纳相对大量的DNA。再结合银染法使该方法得到了广大科研工作着的青睐，本研究通过多方面摸索对该方法进行了总结和改良。