贵州省火龙果炭疽病病原的分离鉴定及生物农药筛选

为贵州省火龙果炭疽病的绿色防控提供理论基础,采用常规组织分离法、形态学与分子生物学鉴定相结合对火龙果病原菌进行分离鉴定,采用生长速率法室内测定9种生物农药对致病菌株的抑菌活性。结果表明:火龙果炭疽病病原为胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),0.3%四霉素对火龙果炭疽病菌的抑菌作用最强,EC_(50)为1.331 4 mg/L;3%中生菌素和1%申嗪霉素其次,EC_(50)分别为6.787 2mg/L和7.832 8 mg/L;80%乙蒜素、2%春雷霉素、10%多抗霉素和2%溃腐灵的EC_(50)分别为65.040 1mg/L、71.349 1mg/L、108.378 4mg/L和129.416 6mg/L;20%井冈霉素和4%嘧啶核酸类抗菌素的抑菌作用较差,其EC_(50)分别为1 985.302 4mg/L和3 298.115 0mg/L。     

不同生育期卷丹百合的多酚积累特性及其抗氧化活性

为探究不同生育期卷丹百合各器官中多酚类物质的积累规律及其抗氧化能力，分别采用福林–肖卡法、NaNO2–AlCl3法、香草醛比色法、pH示差法测定不同生育期(现蕾期、花期、半枯期、全枯期)卷丹百合各器官(基生根、鳞茎、茎生根、茎秆、叶片、株芽、花）中总酚、总黄酮、总黄烷醇和花色苷的含量，运用DPPH法、铜离子还原法和金属螯合能力、抑制脂质过氧化活性，分析其多酚提取物的抗氧化能力。结果表明：不同生育期卷丹百合各器官多酚类物质的含量及其抗氧化活性存在差异；卷丹百合植株在花期总酚含量最高，半枯期的次之，全枯期的最少；花期，花中总酚含量最高，达14.75 mg/g，叶片中的总酚含量次之，珠芽的最低，仅为3.12 mg/g；卷丹百合多酚提取液的抗氧化能力在花期最强，其次是半枯期；相关性分析表明，卷丹多酚类物质与抗氧化活性在各时期、各器官呈现出显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)的相关性，相关系数为–1.00~1.00，其中，花期和半枯期卷丹多酚类物质与铜离子还原力基本呈显著或极显著正相关。     

捻转血矛线虫GST耐药基因的克隆、表达及生物信息学分析

为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至E.coil BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE分析蛋白表达的特征,并利用在线软件对GST蛋白进行生物信息学分析。结果表明:捻转血矛线虫GST基因大小为618 bp;诱导后的pET30a(+)-GST重组菌最佳诱导条件为0.05 mmol/L的IPTG在37℃时诱导6 h,以包涵体的形式存在,大小约为29 ku。生物信息学分析表明:GST分子式为C_(1083)H_(1657)N_(277)O_(294)S_6,属于不含信号肽和跨膜区的亲水性蛋白;二级结构主要由α螺旋形成;潜在的抗原表位主要位于25～48、55～63、92～106、113～124、139～147、170～189和195～205位氨基酸附近。本试验成功构建GST基因原核表达系统,优化表达条件下能稳定纯化GST重组蛋白,为进一步探索捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制及GST蛋白的生物学特性提供研究基础。     

植烟土壤菌株XXJ15的分离及活性评估

采用平板分离技术从烟草根际土壤中分离到一个菌株,编号为XXJ15,并对该菌株的几种活性功能进行了评估。结果表明,XXJ15在魔芋粉液体鉴别培养基经过48 h发酵后,发酵液中的β-甘露聚糖酶活性达到4.6 U/mL;在解磷液体鉴别培养基中培养72 h后,培养基上清液中游离态磷含量达到102μg/mL;XXJ15不具备解钾活性。因此,菌株XXJ15可作为后期诱变育种、烟草专用菌肥和土壤保育剂开发等研究的备用菌株。     

球菊的抗氧化活性成分研究

通过醇提法提取新鲜球菊抗氧化性有效成分。以芦丁为参照品、硝酸铝为显色剂测定黄酮含量。通过测定三价铁离子的还原能力和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基清除率检测黄酮的抗氧化活性。结果表明,当固液比为1∶35时,用95%乙醇在50℃条件下浸提球菊4 h时,黄酮含量达到最高(7.61 mg/g);球菊醇提物对Fe~(3+)有较强的还原能力,并能够较好地清除DPPH自由基。本研究结果可为今后开发球菊抗氧化活性成分提供参考。