| 捻转血矛线虫GST耐药基因的克隆、表达及生物信息学分析 |
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| 引用本文： | 赵学亮,孙柯,苏倩,呼和巴特尔,王文龙.捻转血矛线虫GST耐药基因的克隆、表达及生物信息学分析[J].中国农业大学学报,2020,25(1):123-130. |
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| 作者姓名： | 赵学亮 孙柯 苏倩 呼和巴特尔 王文龙 |
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| 作者单位： | 内蒙古农业大学 兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018,内蒙古农业大学 兽医学院/农业农村部动物疾病临床诊疗技术重点实验室, 呼和浩特 010018 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目(31760731)；内蒙古自治区科技计划项目(201702074) |
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| 摘 要： | 为探究捻转血矛线虫GST基因的原核表达及其生物信息学特征,以捻转血矛线虫cDNA为模板,设计特异性引物扩增GST基因,构建原核表达载体pET30a(+)-GST转化至E.coil BL21(DE3)感受态细胞,将鉴定正确的重组菌进行表达条件优化后,再通过SDS-PAGE分析蛋白表达的特征,并利用在线软件对GST蛋白进行生物信息学分析。结果表明:捻转血矛线虫GST基因大小为618 bp;诱导后的pET30a(+)-GST重组菌最佳诱导条件为0.05 mmol/L的IPTG在37℃时诱导6 h,以包涵体的形式存在,大小约为29 ku。生物信息学分析表明:GST分子式为C_(1083)H_(1657)N_(277)O_(294)S_6,属于不含信号肽和跨膜区的亲水性蛋白;二级结构主要由α螺旋形成;潜在的抗原表位主要位于25～48、55～63、92～106、113～124、139～147、170～189和195～205位氨基酸附近。本试验成功构建GST基因原核表达系统,优化表达条件下能稳定纯化GST重组蛋白,为进一步探索捻转血矛线虫丙硫咪唑耐药机制及GST蛋白的生物学特性提供研究基础。
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| 关 键 词： | 捻转血矛线虫 GST基因 原核表达 生物信息学 |
| 收稿时间： | 2019/6/9 0:00:00 |
Cloning, expression and bioinformatics analysis of drug resistance GST gene of Haemonchus contortus |
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| ZHAO Xueliang,SUN Ke,SU Qian,Huhebateer and WANG Wenlong.Cloning, expression and bioinformatics analysis of drug resistance GST gene of Haemonchus contortus[J].Journal of China Agricultural University,2020,25(1):123-130. |
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| Authors: | ZHAO Xueliang SUN Ke SU Qian Huhebateer and WANG Wenlong |
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| Institution: | College of Veterinary Medicine/Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease ofMinistry of Agriculture and Rural Affairs, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Medicine/Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease ofMinistry of Agriculture and Rural Affairs, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Medicine/Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease ofMinistry of Agriculture and Rural Affairs, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China,College of Veterinary Medicine/Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease ofMinistry of Agriculture and Rural Affairs, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China and College of Veterinary Medicine/Key Laboratory of Clinical Diagnosis and Treatment Technology in Animal Disease ofMinistry of Agriculture and Rural Affairs, Inner Mongolia Agricultural University, Hohhot 010018, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Haemonchus contortus GST genes prokaryotic expression bioinformatics |
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