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前期研究初步表明非洲猪瘟病毒(ASFV)编码的D1133L基因对ASFV复制至关重要,本研究拟进一步探究D1133L在ASFV复制中的作用。利用同源重组技术结合大肠杆菌lac阻遏操作系统实现条件性敲除D1133L基因,以pUC118为骨架重组转移载体ASFVΔi130,将重组转移载体转染骨髓源巨噬细胞(BMDMs),以ASFV CN/GS/2018为亲本毒株感染BMDM,在β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)存在的条件下,经绿色荧光和PCR鉴定,获得条件性敲除D1133L重组毒株vD1133Li。利用荧光显微镜观察该重组毒株与亲本毒株在猪肺泡巨噬细胞(PAMs)中的复制差异,利用qPCR技术比较重组病毒与亲本毒株的复制差异,分析vD1133Li在无IPTG情况下回补D1133L蛋白后与在IPTG诱导情况下的复制差异。结果显示:本研究成功构建了条件性敲除D1133L的ASFV重组病毒vD1133Li,重组毒株不表达D1133L,在IPTG诱导下复制能力显著低于亲本毒株;在稳定表达D1133L的MA-104细胞系中,vD1133Li复制能力恢复。综上所述,D1133L基因对于ASFV复制至关重... 相似文献
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为了获得碧云茶树的组培技术,加快其优良品种繁殖速度,2010~2011年进行了不同浓度的细胞分裂素6-BA和生长素NAA对碧云茶树丛生芽增殖培养的影响。结果表明,以MS为基本培养基,当6-BA为2.0 mg/L,NAA为0.2 mg/L时,对碧云茶树芽的诱导和增殖最有利,增殖率可达2.84;其中NAA差异不显著,6-BA差异显著。 相似文献
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为了了解TDZ对组培苗增殖的影响情况,探讨了TDZ在衰退组培苗复壮过程中的作用,以增殖衰退的杏香兔耳风组培苗为试验材料,就TDZ的不同添加方式(抽滤灭菌和高压灭菌)和不同浓度(0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mg/L)处理对组培苗增殖系数、有效芽及苗高生长的影响情况进行了试验。结果表明:当TDZ的浓度0.2 mg/L时,TDZ的添加方式对组培苗的增殖系数和有效芽数均有较大影响,抽滤灭菌后的增殖系数和有效芽数要明显高于高压灭菌的;不同浓度的TDZ对有效芽数和髙生长的影响均有极显著的差异性(P0.01),当TDZ浓度为0.8 mg/L时,苗质量总体达到最优,增殖系数为5.11,达到了预期的复壮效果;最优生根培养基配方为1/2MS+NAA 0.02 mg/L+IBA 0.1 mg/L。在杏香兔耳风组培苗复壮过程中,TDZ可作为一种有效的植物生长调节剂使用。 相似文献
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以厚荚相思种子无菌苗的茎尖、茎段中部和茎段基部为外植体取材部位,以0.4~0.6cm、0.8~1.0 cm和1.2~1.5 cm为外植体取材长度,研究了不同外植体对厚荚相思试管苗增殖系数和玻璃化的影响。结果表明:外植体长度是影响厚荚相思试管苗增殖系数和玻璃化的主要因素,外植体长度越小,增殖系数越高,玻璃化率也越高;选用长度为0.8~1.0 cm的外植体既有利于降低厚荚相思玻璃化率,又能保证增殖系数的提高。 相似文献
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本刊讯(特约记者 刁苏彬 报道)为深入贯彻落实国务院颁布实施的《中国水生生物资源养护行动纲要》,切实做好2012年全省水生生物资源养护工作,山东省海洋与渔业厅确定在全省组织开展大规模、多层次的"海湖河增殖放流系列活动". 相似文献