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应用反向遗传技术对新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株感染性克隆PBRN-FL质粒进行操作,构建插入欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)ORF5基因的重组质粒LaSota-ORF5并进行病毒拯救及鉴定。依据GenBank所发表的欧洲型PRRSV LV株ORF5序列,设计引物扩增ORF5片段,通过PBRN-FL质粒上P和M基因间的PmeⅠ酶切位点插入目的片段,构建重组质粒LaSota-ORF5。采用磷酸钙转染法将重组质粒和PCI-NP、PCI-P、PCI-L等3种辅助质粒共转染BSR-T7/5/细胞拯救病毒并对其分别进行RT-PCR、间接免疫荧光(IFA)和Western blot(WB)试验鉴定。结果显示:拯救病毒的RT-PCR产物测序结果正确,IFA出现绿色荧光,WB试验条带大小符合预期,证明GP5蛋白有效表达。结果表明:成功构建并拯救得到重组病毒rLaSota-GP5,为制备表达PRRSV GP5蛋白的重组NDV疫苗奠定基础。 相似文献
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目的探究提高替莫唑胺药物水溶性的方法。方法在酸性条件下,以紫外分光光度法测定替莫唑胺在水中的溶解度,通过单因素和正交优化试验法确定最佳方案工艺,并对其样品进行粒径和Zeta、电位、红外光谱表征。结果由正交优化试验得出最佳方案为:选用烟酰胺为表面活性剂,替莫唑胺与水的比例为8∶1,高压均质压力为60 psi,经过15次高压均质处理后,替莫唑胺的溶解度与未经高压均质机作用相比溶解度提高了95.11%,平均粒径减小257 nm,Zeta电位为-26.7 mV。结论经最佳工艺处理后的样品溶解度提高了95.11%,分散均匀,稳定性较好,对替莫唑胺的进一步应用提供了理论基础。 相似文献
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为了解昭苏牧区放牧绵羊常量元素的盈缺情况,分别于春季、夏季、秋季和冬季选取成年母羊和育成母羊各10只,测定其血清及其四季所采食牧草中钙、磷、钾、钠、镁和硫含量。结果表明:该牧区不同季节牧草中所含钙、磷、钾、钠、镁和硫含量范围分别为0.64%~1.17%、0.12%~0.23%、0.54%~1.81%、0.04%~0.05%、0.17%~0.28%和0.23%~0.28%;牧草中钙、钾、镁和硫均可满足放牧绵羊的营养需要;磷存在季节性缺乏,冬季不能满足需要;钠全年缺乏;不同季节放牧成年母羊血清中钙、磷、钾、钠和镁含量范围为117.42~144.26 mg/L、81.07~123.17 mg/L、184.33~215.05 mg/L、3385.60~3590.00 mg/L和21.13~28.88 mg/L;放牧育成母羊血清中钙、磷、钾、钠和镁含量范围为61.13~68.86 mg/L、63.14~128.58 mg/L、204.00~277.33 mg/L、3390.50~3587.50 mg/L和20.58~28.19 mg/L,均处于正常范围。因此,昭苏地区四季放牧绵羊冬季应注意磷的补充,全年需补充食盐。 相似文献
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帧一 《绿色中国(A版)》2015,(5)
如果你是个电影爱好者,想跟着电影里的取景地去旅行;如果你是个热衷旅行的人,想把旅行中的照片拍摄成电影大片一样的剧照效果;如果你喜欢玩拍照或自拍,想把照片“穿越”进电影场景中形成鲜明对比,你一定会想,有没有一种方式可以将三者完美地结合在一起,达成既可记录生活又能表达自我的全部愿望和需求? 相似文献
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