尿黑酸影响拟南芥酪氨酸降解缺陷突变体sscd1的种子萌发

[目的]探究外源添加尿黑酸对拟南芥酪氨酸降解途径的影响。[方法]以拟南芥野生型和酪氨酸降解途径缺陷突变体sscd1、hgo为材料,通过在培养基中添加不同浓度尿黑酸,分析长、短日照下对种子萌发的影响。[结果]在长、短日照下,外源添加0.1~0.4 mmol/L浓度尿黑酸推迟sscd1突变体种子萌发;外源添加0.8 mmol/L浓度尿黑酸抑制sscd1突变体种子萌发,而该浓度的尿黑酸对野生型和hgo突变体种子萌发没有影响。另外,在培养基中添加酪氨酸降解途径的异常代谢产物——琥珀酰丙酮,在长日照下也能抑制野生型种子萌发。[结论]尿黑酸处理后激活了酪氨酸降解途径,使sscd1突变体中积累较多的琥珀酰丙酮从而影响其种子萌发。     

黄瓜绿斑驳花叶病毒CP基因克隆及亚细胞定位

黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)是瓜类作物上一种重要的病毒,近年来在中国多地陆续报道其危害,给西瓜、黄瓜等作物生产造成了惨重的损失。本研究选择2012年采自江苏洪泽的CGMMV西瓜分离物为研究对象,经克隆和序列测定显示其CP基因全长486 bp,编码一个17 500的蛋白质。为进一步研究其亚细胞定位特征,本研究构建了带有YFP荧光标签的重组表达载体CP-YFP,转化农杆菌后浸润接种本氏烟(Nicotiana benthamiana),激光共聚焦显微镜观察结果显示浸润处理后本氏烟叶片表皮细胞的细胞质及细胞核都有较强的绿色荧光信号,Western blot结果显示带荧光标签的CP在本氏烟叶片中表达正常。这些结果说明CGMMV编码的CP蛋白在细胞质和细胞核均有分布,为进一步研究其功能奠定基础。     

外源尿黑酸对拟南芥幼苗花青素生物合成的影响

以拟南芥Col–0(CK)和酪氨酸降解最后一步缺陷突变体sscd1为试验材料,采用外源尿黑酸处理幼苗,研究尿黑酸对花青素生物合成的影响。结果显示:外源尿黑酸能诱导拟南芥幼苗花青素的积累,而且在sscd1突变体中花青素的积累效果更显著;荧光定量PCR分析发现,尿黑酸处理能促进花青素生物合成基因(包括花青素生物合成的下游基因DFR、LDOX、UF3GT和上游基因PAL、CHI、CHS)的表达,且在sscd1突变体中,这些基因表达上调的幅度更大。以上结果表明,尿黑酸处理能激活花青素生物合成途径,从而促进花青素的积累;酪氨酸降解最后一步缺陷能促进尿黑酸诱导花青素的生物合成。     

种子种苗上黄瓜绿斑驳花叶病毒IC-RT-PCR检测方法的建立及应用

黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)是一种检疫性植物病毒, 种传和农事操作是其主要传播途径, 因此种子和种苗的早期检测尤为重要?鉴于种子检测的特殊性及幼苗病毒含量低的特点, 本试验通过制备CGMMV单克隆抗体, 结合特异性引物, 建立了黄瓜绿斑驳花叶病毒的IC-RT-PCR早期检测方法, 比较了IC-RT-PCR与DAS-ELISA和RT-PCR方法的特异性?灵敏度, 并对实际检测效果进行了评价?在操作程序上, IC-RT-PCR法与DAS-ELISA法一样简便, 但灵敏度远大于DAS-ELISA?IC-RT-PCR与RT-PCR均可检出20~25 ng种子上的病毒, 且特异性相当, 而DAS-ELISA法只可检出10 μg种子上的病毒?综上所述, IC-RT-PCR法可简便有效地应用于种子和种苗上CGMMV的检测, 为病毒防治的早期干预提供技术支撑?     

用顶空吸附法与茶汤过柱吸附法分析绿茶香气

采用顶空吸附法（HAS法）和茶汤过柱吸附法（TLA法）分析了绿茶提取液的香气，结果表明，HAS法提取的香气在感官上与茶叶香气较一致，通过GC检测，两种方法提取香精油的组分差异较大，在检测时间内相同的香气组分只有54．17％，TLA法未检测到芳樟醇的氧化物和异构产物，但检测到一些别的物质。     

高粱DNA导入水稻的初步研究

采用花粉管通道法,并配合仅剪1/3内颖及遮荫等措施,将高粱DNA导入水稻,获得以下结果:(1)共处理颖花367朵,收87粒种子,D_(?) 代结实率达23.7%;(2)D_1代出现变异,其中2株在穗型上明显倾向供体(高粱);(3)D_2代变异穗型出现分离,初步分析认为变异穗型为显性,受体类型为隐性,符合单基因分离的分离规律.     

采用减压蒸馏萃取法研究速溶绿茶香气在加工过程中的变化

为减少香气提取方法对茶叶香气组分的影响，采用减压蒸馏萃取法对速溶绿茶加工过程中香气的变化进行了研究。结果表明，从原料至浓缩工艺香气呈逐步下降的趋势，香气总量损失了89．84％，香气组分损失了64．15％，经干燥工艺后香气总量和某些香气组分有所增加.与绿茶初制工艺不同，在速溶绿茶加工过程中没有检测到新形成的香气组分。     

番茄子叶的离体再生与移栽

为了尽快地使番茄子叶获得较多的再生植株以及提高再生植株的移栽成活率，使番茄的遗传转化研究与应用得以顺利进行，以番茄子叶为外植体，系统研究了番茄子叶切段大小对诱导出芽的影响，生长素IAA和NAA对生根的影响，以及移栽土的灭菌处理、空气湿度、再生苗的生根状况等对移栽成活的影响。结果表明，刚展开的子叶横切成3段时可得到较多的再生芽；在MS培养基中添加低浓度的IAA能形成根系发达、生长健壮的再生苗；移栽土灭菌处理或再生苗生根差，都无法移栽成活；空气湿度过高或过低教师容易使移载苗萎蔫。     

3种麦类土传花叶病毒的多抗制备及检测应用

采用PEG二次沉淀和蔗糖硫酸铯密度梯度离心,得到提纯的3种麦类土传花叶病毒(小麦黄花叶病毒、大麦黄花叶病毒、中国小麦花叶病毒)。透射电镜观察分别可见线状、直杆状病毒粒子,测定浓度分别达5.44、8.08、4.09 mg/m L。提纯病毒免疫新西兰大白兔制备抗血清,得到的3株抗血清经酶联免疫吸附法测定效价分别达1∶12 800、1∶25 600、1∶6 400。应用样品和多抗稀释的方阵试验,建立3种多抗的双抗夹心酶联免疫吸附法(TAS-ELISA),并对采自江苏省、安徽省、河南省、山东省的麦子病样进行检测,结果显示,阳性检出率较高,说明这3种病毒仍是我国麦子流行的主要病毒。     

高粱DNA导入水稻后代维管束与气腔的解剖观察

采用活体机械切片,对高粱ＤＮＡ导入水稻鄂宜１０５所获后代,于始穗,齐穗,乳熟３个时期对茎基、穗颈及剑叶中脉维管束进行了解剖观察。