全悬浮培养LMH细胞制备FAdV-4灭活疫苗的研究

通过对LMH细胞进行驯化,获得一株可全悬浮培养的LMH细胞,命名为LMH-S。此细胞可适应无血清、高密度悬浮培养,以初始细胞密度0.5×10⁶/mL～1×10⁶/mL接种,细胞密度最高达6×10⁶/mL。研究确定生物反应器悬浮培养LMH-S细胞制备FAdV-4抗原的最优参数为：接毒时细胞密度2×10⁶/mL～3×10⁶/mL、接毒量0.1MOI～1MOI、接毒后48 h～72 h收毒,所获抗原病毒含量不低于10^9.25TCID₅₀/mL。试验鸡分别免疫0.02 mL、0.05 mL、0.1 mL、0.3 mL疫苗,攻毒保护率分别为9/10、10/10、10/10、10/10,表明疫苗有效性良好。本试验成功建立了LMH全悬浮培养细胞株,确定了FAdV-4抗原的生物反应器悬浮培养工艺,验证了悬浮培养抗原的免疫原性,为高效FAdV-4灭活疫苗的研制奠定了基础。     

桑树悬浮细胞生长规律及其生理特性的研究

以桑品种大10为材料,探讨了3种液体培养基B5、N6、MS中的细胞密度变化及悬浮培养细胞的生长规律,并筛选出最适液体培养基。B5液体培养基较适合桑品种大10细胞的悬浮培养;在液体振荡培养条件下,桑树细胞的生长周期为14 d,接种后1~4 d为延迟期,5~10 d为快速生长期,11~14 d为减慢期,14 d以后进入下降期。悬浮细胞分裂指数在快速生长末期达到最大值5.19%,延迟期的细胞活力最强,之后细胞活力开始下降。     

Maintenance of mouse trophoblast stem cells in KSR-based medium allows conventional 3D culture

Mouse trophoblast stem cells (TSCs) can differentiate into trophoblast cells, which constitute the placenta. Under conventional culture conditions, in a medium supplemented with 20% fetal bovine serum (FBS), fibroblast growth factor 4 (FGF4), and heparin and in the presence of mouse embryonic fibroblast cells (MEFs) as feeder cells, TSCs maintain their undifferentiated, proliferative status. MEFs can be replaced by a 70% MEF-conditioned medium (MEF-CM) or by TGF-ß/activin A. To find out if KnockOut^TM Serum Replacement (KSR) can replace FBS for TSC maintenance, we cultured mouse TSCs in KSR-based, FBS-free medium and investigated their proliferation capacity, stemness, and differentiation potential. The results indicated that fibronectin, vitronectin, or laminin coating was necessary for adhesion of TSCs under KSR-based conditions but not for their survival or proliferation. While the presence of FGF4, heparin, and activin A was not sufficient to support the proliferation of TSCs, the addition of a pan-retinoic acid receptor inverse agonist and a ROCK-inhibitor yielded a proliferation rate comparable to that obtained under the conventional FBS-based conditions. TSCs cultured under the KSR-based conditions had a gene expression and DNA methylation profile characteristic of TSCs and exhibited a differentiation potential. Moreover, under KSR-based conditions, we could obtain a suspension culture of TSCs using extracellular matrix (ECM) coating-free dishes. Thus, we have established here, KSR-based culture conditions for the maintenance of TSCs, which should be useful for future studies.     

利用硫化碱废渣制备新型多功能悬浮型种衣剂的研究与应用(Ⅰ)--新型多功能悬浮型种衣剂的研究

本文研究了以工业硫化碱废渣与一类丰富的废弃矿物质等为原料,合成新型阴离子表面活性剂--矽力康复合肥在悬浮型种衣剂中的应用,探讨了矽力康复合肥、不同种类的阴离子、非离子表面活性剂对20%的悬浮型种衣剂稳定性的作用及相互作用,确定了最佳复配条件.结果表明:在使用单一组分中,使用矽力康复合肥比其他9种表面活性剂的稳定性高20.2%～141.2%(15 d);在复配体系中,50g/L矽力康复合肥与15g/L乳化剂A复配体系在90 d后的悬浮率仍达到90.4%,比50g/L十二烷基苯磺酸钠与40g/L乳化剂A的复配体系高29%;产品粘度为500～600mpa·s、对种子的包衣均匀度为95.3%,成膜时间为19min,包衣脱落率为7.42%,热贮稳定性均符合标准,并且产品本身还含有大量促进种子生长的必要元素.     

植物细胞悬浮培养的影响因素

综述了植物愈伤组织诱导以及悬浮细胞培养的影响因素。     

基于ADAMS的双横臂扭杆弹簧独立悬架线刚度计算

运用空间机构运动学方法建立某皮卡车双横臂扭杆弹簧独立悬架的数学模型,根据力学分析给出其垂直线刚度的计算方法。同时还应用ADAMS软件建立同种悬架的多体动力学模型,对双横臂扭杆弹簧独立悬架垂直线刚度随车轮上下摆动的变化进行动态仿真分析。采用两种方法计算、仿真结果的一致性表明这两种方法都是分析双横臂扭杆弹簧悬架垂直线刚度行之有效的方法,也说明了文中所建的模型和提出的计算方法都是正确的。     

20%呋虫胺悬浮剂的高效液相色谱分析

为了解决呋虫胺悬浮剂含量在分析上方法不足,以及采用液相色谱法测定时流动相选择,仪器条件的确定时所遇到的问题,采用岛津LC-10AT液相色谱仪为基础,利用2.5 cm×4.6 mm不锈钢,内装C18、5 μm填充物,乙腈+水+冰乙酸+三乙胺为流动相对呋虫胺悬浮剂有体的含量进行检测。结果表明采用该流动相以及仪器条件下,呋虫胺有效体含量的不存在异构体峰重叠现象。主峰与杂质峰的分离度最好,峰形良好。此次研究证明,20%呋虫胺悬浮剂分析方法的提出不仅填补了该烟碱类杀虫剂总含量分析方法的空白,而且测定便捷、准确、可行,利于生产企业用来质控。     

车辆蓄能悬架系统仿真与试验

设计了2种结构形式的车用蓄能悬架,建立了车辆蓄能悬架系统的数学模型,构建了Ⅰ、Ⅱ型蓄能悬架结构,采取多目标优化方法,得到了2种蓄能悬架的性能参数,在仿真基础上,进行了台架试验,仿真与试验结果较为一致,表明蓄能悬架系统充分发挥了弹簧相位滞后、阻尼器呈中性及蓄能器相位超前的特性,提高了车辆隔振能力,协调了整车综合性能.     

养猪微生物发酵床垫料发酵指数的研究

采用“盐梯度悬浮法”测定不同发酵时间发酵床垫料的悬浮率,根据垫料表观确定其发酵程度级别,可将30个样品分为4级:一级发酵程度浅;二级发酵程度中等;三级发酵程度深;四级发酵程度很深.结合多元线性回归分析法,确定垫料发酵指数方程为Y=3.9932-0.0046X1 +0.0531X2-0.0484X3-0.0083X4-0...     

芹菜胚性细胞悬浮系原生质体分离及再生植株

利用芹菜胚性细胞悬浮系成功分离得到大量原生质体, 获得芹菜大量原生质体的最佳反应体系为: 酶液组成为3.0%纤维素酶Onozuka R210、1.0%离析酶R210、11%甘露醇、0.5% CaCl₂ ·2H₂O和0.1% MES; 摇床转速为80 r/min, 温度(25 ±2) ℃, 酶解时间5～6 h; 原生质体产量为25.00 ×10⁶ /g, 原生质体活力83.41%。原生质体浅层培养, 培养基为1 /2 MS + 1 mg/L 2, 4-D + 0.5 mg/L KT + 11%甘露醇+ 500 mg/L水解络蛋白, 两天后, 重新再生细胞壁之后进行第1次分裂, 逐步降低渗透压至甘露醇3% ,大约30 d形成小细胞团。小愈伤组织经增殖培养后在1 /2MS + 500 mg/L CH + 0.25 mg/L KT固体分化培养基诱导出不定芽, 30 d后再转入MS基本培养基, 获得完整的再生植株。