番茄组织培养与试管苗繁育

[目的]建立番茄的高效再生体系,为下一步进行番茄叶绿体遗传转化研究奠定基础。[方法]通过培养经无菌处理的番茄种子获得无菌苗,切取无菌苗的叶片置于附加有激素组合为3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA的MS培养基中诱导愈伤组织产生,再利用愈伤组织,比较不同浓度激素组合对番茄愈伤组织分化不定芽与不定芽生根的影响。[结果]MS+2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IAA+30 mg/L蔗糖培养基对诱导愈伤组织分化不定芽的效果最佳;1/2MS+1.0 mg/L IAA培养基对生根最好。[结论]适宜激素浓度的选择是番茄高效再生体系建立的关键。     

H.11648麻离体培养与植株再生的研究

以H.11648麻组培苗叶片为外植体,研究了不同生长调节剂对诱导愈伤、不定芽的分化、增殖及生根的影响。结果表明:在MS+0.5 mg/L 2,4-D+4.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+3%蔗糖+0.23%植物凝胶(pH值5.8)培养基上诱导出愈伤组织为佳;在MS+3.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA培养基中,愈伤组织不定芽分化率最高;将小苗移栽至基质配比为土壤∶椰糠=2∶1的育苗盆中,成活率达96%。     

木薯叶片愈伤组织诱导与分化影响因子研究

以木薯试管苗顶部1～3处的幼叶为外植体,研究不同激素种类、浓度对愈伤组织的诱导、分化、不定芽生根的影响,并探讨了愈伤组织褐化过程中减轻褐化的方法。结果表明:在含0.5～1.0 mg/L 2,4-D的改良MS培养基上,可诱导木薯叶片产生愈伤组织,其愈伤诱导率为73.33%～89.44%;在愈伤组织的继代过程中,添加了200～300 mg/L PVP的处理可减轻愈伤褐化和提高愈伤增殖率;产生不定芽的最适激素条件是在改良MS培养基中添加0.75～1.00 mg/L ZT;不定芽产生的嫩枝在1/2MS基本培养基中添加0.25～0.50 mg/L IBA的条件下,其生根率达81.13%～90.63%。     

基因枪介导的玉米NPR1基因的遗传转化(英文)

[目的]探索出玉米基因枪转化的条件。[方法]以玉米自交系7239的幼胚胚性愈伤组织为受体材料,研究了轰击距离、气体压力、真空度和轰击次数对转化率的影响。[结果]转化时以金粉用量100μg/枪、发射点与靶细胞距离9cm、气体压力1350psi、真空度25In·Hg、轰击次数2次的组合最佳。经潮霉素(Hygromycin)筛选,获得了再生植株,PCR分析及Southern杂交结果表明NPR1基因已整合到玉米基因组中,平均转化率为1.76%。[结论]该研究为玉米优良抗病品种的培育奠定了基础。     

东风菜叶柄无性系建立研究

为保护野生资源,满足人工栽培的需要,以东风菜叶柄为材料,进行了愈伤组织诱导、分化培养,不定芽生根培养,试管苗生根继代增殖培养、移栽、定植的研究,建立起变异植株的无性系。结果表明:MS+2,4-D2.5mg/L是叶柄愈伤组织培养的理想培养基;MS+GA30.5mg/L+AgNO31.5mg/L+NAA 0.1mg/L是愈伤组织分化培养的理想培养基;用NAA20mg/L的无菌溶液对不定芽切口进行处理后,接种到White+IAA0.1mg/L培养基上培养,是不定芽生根培养和试管苗生根继代培养的理想方法;定植的试管苗保持了野生东风菜的所有植物学性状。     

石榴2种外植体再生方法在遗传转化研究中的优势比较

【目的】为了利用‘突尼斯软籽’石榴开展遗传转化研究,【方法】分别以叶片和茎段为外植体,探讨了不同灭菌时间和不同植物生长调节物质对2种外植体再生的影响,并对2种愈伤组织再生体系进行了比较。【结果】结果表明,茎段比叶片更容易灭菌,但叶片更容易长出绿色致密愈伤组织并分化更多的不定芽,而茎段分化的愈伤相对较为疏松,分化的不定芽也相对较少;来自茎段愈伤组织的不定芽比来自叶片的更容易长高;叶片比茎段再生体系建立所需时间要短;少量翠绿的叶片刀口处可以直接产生不定芽,可以直接利用叶片进行遗传转化的侵染,简化愈伤形成这一步骤,而茎段未发现此现象。在遗传转化试验中,茎段和叶片2种外植体愈伤组织抗生素敏感性试验结果均无显著性差异。【结论】研究结果认为,2者相比,叶片愈伤组织再生体系更适宜于石榴的遗传转化研究。     

珍稀濒危植物领春木愈伤组织的培养

以领春木茎段为外植体 ,成功地诱导出了愈伤组织 ,将获得的愈伤组织用于适宜增殖培养条件的研究。结果表明 :MS和 1/ 2MS作为愈伤组织诱导基本培养基较为适宜 ;愈伤组织增殖培养以MS培养基 +NAA 2mg/L + 6 BA 0 .1mg/L ,pH值 5～ 6较为合适。     

花楸嫩叶和茎段的愈伤组织诱导

以花楸嫩叶和茎段为外植体,在添加BA、TDZ、IBA、NAA、2, 4-D组成的不同激素组合的MS培养基上培养,以诱导愈伤组织。以幼嫩的茎段为外植体时,从愈伤组织的诱导率、体积和生长状态综合考虑,得出生长素的效应为NAA>2, 4 -D>IBA;最佳激素种类组合为NAA1. 0mg/L+BA0. 5 ~3. 0mg/L、2, 4 -D1. 0mg/L+BA0. 5~3. 0mg/L或TDZ0. 01~0. 5mg/L。以幼嫩的叶片为外植体时,虽然诱导率可达100%,但只是在切口处长小米粒大小的愈伤组织,生长素的诱导效应大小为2, 4-D>NAA>IBA,最佳激素组合为2, 4-D1. 0mg/L+BA0. 5 ~3. 0mg/L。将初代培养的愈伤组织转入增殖培养基,增殖效果都非常好, 4周后愈伤组织长满培养瓶。     

杨树体细胞胚胎发生研究概况

综述了杨属树种体细胞胚胎发生研究概况,共有13个树种进行了体细胞胚诱导。对影响体细胞胚发生的因素,如外植体、激素、氮源等进行了综合分析,并对体细胞胚胎发生中的同步性和畸形问题进行了讨论。该文对今后杨树体细胞胚研究及其意义亦提出一些看法,认为诱导胚性愈伤组织是体细胞胚胎成功发生的关键,应逐步开展体细胞胚发生的生理、生化及分子水平机理研究;加强杨树体细胞胚发生及机理研究,不仅在其遗传改良、离体繁殖等实际应用中有重要意义,而且作为林木生物学研究的模式树种,对林木发育生物学及激素调节等理论的研究亦有重要价值。     

红花小孢子培养与胚状体诱导研究

小孢子培养是创造单倍体和双单倍体的重要途径,对提高红花的育种效率具有重要意义。为了研究红花游离小孢子的高效培养体系,用20份红花材料研究花药及小孢子培养中影响愈伤组织生长和胚发生的关键因素。结果表明,小孢子发育时期、红花品种、基本培养基和激素浓度是影响红花诱导愈伤组织的关键因素。花药培养的愈伤及胚诱导率高于游离小孢子,且受基因型影响。单核靠边期管状花长度为 0.45～0.50 cm时,诱导成功率达到68.32%。供试的20份红花材料中,有11份诱导出了愈伤组织,有1份分化出了胚状愈伤,诱导成功率为15.79%。分化培养最适培养基组合为1/2 MS+B5+ 6-BA 1.0 mg/L + NAA 1.0 mg/L;小孢子悬浮培养最适培养基激素浓度以添加6-BA 4.0 mg/L 和NAA 0.5 mg/L效果最好,诱导愈伤率为22.5%。