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本试验旨在克隆棘腹蛙来源Japonicin-pb,了解该抗菌肽在不同生长温度及组织下的表达规律,为Japonicin-pb的开发提供线索。基于本实验室构建的棘腹蛙皮肤转录组数据库,利用反转录PCR从棘腹蛙皮肤组织中克隆Japonicin-pb前体序列,通过结构域比对的方法分析其结构。利用Real-time PCR检测3种Japonicin-pb在不同生长温度(15、18、21、24、27和30℃)及组织(血液、肌肉、肝脏和皮肤)的表达图谱。结果表明,本试验克隆到3种Japonicin-pb前体序列,结构域比对表明,三者拥有相同的N端信号肽和中间间隔区,长度分别为19、20和12个氨基酸残基的肽序列,命名为Japonicin-1apb、Japonicin-1bpb和Japonicin-3pb。Japonicin-1apb主要在皮肤组织中表达,且表达量随着生长温度的升高而逐渐增加;Japonicin-1bpb在不同组织或生长温度下的表达量差异均不明显;Japonicin-3pb主要在肝脏中表达,且生长温度对其影响不大。这些结果为棘腹蛙源3种Japonicin-pb后续功能研究以及开发应用提供了重要的序列及表达谱信息。 相似文献
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通过采用几种不同的方法测定芝麻酸值,并与国标法进行对比,确定了快速测定芝麻酸值的方法,即将40g样品粉碎后研磨,再用150mL石油醚浸泡4h、过滤、减压抽去溶剂、氮气吹干5min后直接测定酸值。此方法所得结果与标准方法相差较小,并较大地缩短了检测时间。 相似文献
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猪流行性腹泻、猪传染性胃肠炎和猪轮状病毒三联苗免疫试验 总被引:10,自引:0,他引:10
本研究采用猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒和轮状病毒细胞培养物制备了三联灭活疫苗,实验室免疫结果表明,肉猪和妊娠母猪免疫后15d达到较高的免疫水平,免疫有效期超过6个月。妊娠母猪所产仔猪可获得高水平的被动免疫保护。试验场应用结果表明母猪保护率达98%,仔猪被动免疫保护达93%。 相似文献
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为预测并分析猪蛔虫(Ascaris suum)谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)蛋白编码基因的结构特征及其B细胞抗原表位,采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增猪蛔虫GST蛋白编码序列(coding sequence,CDS),将纯化的DNA与pMD19-T载体连接并转化入JM109感受态细胞,并将阳性菌液测序后进行序列分析、结构预测和抗原表位预测。结果表明,获得的猪蛔虫GST蛋白CDS序列与参考基因(Y10613.1)相比,在第243和248位核苷酸处发生变异,并导致第83位氨基酸由甲硫氨酸(Met)变异为苏氨酸(Thr);其优势B细胞抗原表位可能位于肽段29-38、43-47、80-87、114-120、129-131、143-145、190-194、201-204区域内或附近,其中最可能位于肽段43-46和201-204区域内或附近。研究结果为猪蛔虫基因工程疫苗的研发奠定了理论基础,同时为后续猪蛔虫GST基因功能和耐药相关性研究提供了基础资料。 相似文献
78.
草鱼呼肠孤病毒VP7基因核酸疫苗的构建及免疫效果 总被引:1,自引:1,他引:0
将草鱼呼肠孤病毒( GCRV)外衣壳蛋白VP7双基因(约0.9 kb)及团头鲂的β-肌动蛋白启动子(约0.56 kp)经扩增并鉴定正确后,克隆至基因转移载体pFastBacTM Dual中,获得重组质粒pFastBac-β-VP71 -VP72,以此研究草鱼免疫实验及免疫效果.重组质粒按10、30、60μg分为3组,同时设30 μg空载体组及对照组.于免疫后第14、21、28、49天通过RT-PCR检测VP7的转录水平、间接凝集反应测定抗体水平及攻毒试验检测免疫保护效果.结果显示,pFastBac-β-VP71 -VP72导入鱼体后,VP7基因在β-肌动蛋白启动子的驱动下持续表达,至第49天仍能检测到目的基因的转录;各免疫组均有抗体产生,抗体效价在免疫后第21天达到最高,攻毒后10、30、60 μg核酸疫苗免疫组死亡率分别为0%、0%、5%,而空载体组和对照组分别为30%和100%,表明pFastBac-β-VP71-VP72作为核酸疫苗对草鱼病毒性出血病有较好的免疫保护效果.研究结果为草鱼呼肠孤病毒核酸疫苗的研发与生产应用奠定了基础. 相似文献
79.
80.
不同生态环境下籼粳中间型恢复系的主要农艺性状的比较研究 总被引:2,自引:0,他引:2
以籼粳杂交后代选育出稳定的13个偏粳型恢复系R1~R13;14个偏籼型恢复系R14~R27作为试验材料,系统分析了株高、穗长、粒长、穗总粒数、穗实粒数、结实率、有效穗、千粒重8个农艺性状在昆明、玉溪、弥勒、开远4个不同环境下的表现以及相关分析。结果表明:恢复系主要农艺性状的变化主要是海拔高度差异造成的;株高、粒长、穗长随海拔的降低而增大;在不同海拔条件下株高、粒长、穗长、千粒重相对而言易受环境影响,其次是穗总粒数、穗实粒数、结实率,而有效穗相对比较稳定,受环境影响较小。 相似文献