检测猪肉中磺胺喹噁啉的快速检测试纸条的研制

磺胺类药物(Sas)是一类应用广泛的抗菌药物,对畜禽疾病控制和治疗起到重要作用.其在人体巾长期存在会导致许多细菌产生耐药性,且有潜在的致癌性,我国规定其残留限量为100 μg／kg[1].``     

＂治活＂：行动目标禽和鸟

国产并具有自主知识产权用于检测三聚氰胺的试纸卡和检测试剂盒,目前已实现规模化生产。 据悉．该试纸卡和检测试剂盒系北京某生物科技公司联合国内多家机构,历时5个月,开发出具有自主知识产权的产品,它能够满足检测机构、乳制品企业和奶站等不同层次的检测需求。     

免疫层析试纸条检测口蹄疫非结构蛋白3ABC抗体的研究

为建立口蹄疫(FMD)快速检测方法,本研究以纯化的FMD病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)3ABC作为捕捉抗原.金标FMDV抗原作为金标试剂,建立了检测FMD NSP 3ABC抗体的胶体金免疫层析试纸条(ICS).应用FMD ICS试验与UBI FMD NSP酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒对反刍动物、猪的FMD标准阳性血清的不同滴度进行测定,结果表明ICS在检测反刍动物血清时的检测下限(1:64)与ELISA(1:128)接近,而检测猪血清时的检测下限(1:8)低于UBI NSP-ELISA试剂盒(1:64).同时用ICS和UBINSP-ELISA检测313份牛血清和111份羊血清,结果ICS检测牛血清时的敏感性和特异性分别为81.81%和96.69%,检测羊血清时敏感性和特异性分别为88.88%和95.10%;ICS与UBI NSP-ELISA用于检测牛血清时符合率为95.52%,用于检测羊血清时的符合率为94.59%.结果表明ICS适合在基层单位或养殖场进行自行检测.     

动物疫病免疫试纸快速检测技术概述

概述了免疫试纸检测技术的原理,并分别从抗原和抗体2个方面简述免疫试纸检测技术的应用及在此方面取得的成就。     

大肠杆菌O157：H7荧光纳米颗粒试纸条的研制

建立大肠杆菌O157：H7荧光纳米颗粒免疫层析法。方法：首先将荧光纳米颗粒与大肠杆菌O157：H7单抗共价偶联,制成大肠杆菌O157：H7单抗-荧光纳米颗粒偶联物。用该偶联物代替金标颗粒,以双抗体夹心作为反应模式来制备大肠杆菌O157：H7免疫层析试纸条。在紫外灯下观察免疫层析试纸条上经免疫反应而产生的质控线和检测线上的荧光信号,并利用荧光强度来半定量检测大肠杆菌O157：H7。结果：用所制备的试纸条对11属24种54株菌进行检测,所有27株大肠杆菌O157：H7的检测结果呈阳性．其它非大肠杆菌O157菌株检测结果呈阴性。用该试纸条检测人工污染的鸡肉样品。灵敏度为2．7×10^4CFU／mL。通过观察检测线的有无。可对大肠杆菌O157：H7进行半定量检测。分别用所制备的大肠杆菌O157：H7免疫层析试纸条和标准法检测57份样品,2种方法的总符合率为80．7％。结论：大肠杆菌O157：H7荧光纳米颗粒检测试纸条的研制成功,为大肠杆菌O157：H7的快速检测提供了一个极好的检测方法．便于野外检测的开展．具有广阔的应用前景。     

氯霉素荧光纳米颗粒免疫层析法的建立

本研究将荧光纳米颗粒与氯霉素单克隆抗体共价偶联在一起,用该颗粒代替常用的金标颗粒标记氯霉素单克隆抗体,以竞争法作为反应模式来制备免疫层析试纸条。在紫外灯下观察免疫层析试纸条上经免疫反应而产生的质控线和检测线上的荧光信号,利用荧光强度来半定量检测动物源性食品中的氯霉素残留。所制备的检测氯霉素的免疫层析试纸条只与氯霉素有交叉反应,与非目标检测物之间没有交叉反应。该试纸条的肉眼检测灵敏性为0.5ng/mL,满足相关检测标准要求。通过比较检测线和质控线之间的亮度,能够对氯霉素进行半定量检测。本研究建立的用于氯霉素残留检测的免疫层析法,具有简便、快速、灵敏度高的特点,有广阔的应用前景。     

基于免疫层析试纸的猪O型FMDV抗体水平监测

为了应用免疫层析试纸评价猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,对50头试验仔猪进行免疫注射,并在首次免疫后28 d及2次免疫后20 d采血,通过试纸定量测定结果来监测试验猪抗体水平变化,同时对比猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒的检测结果.结果表明,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体,首次免疫抗体阳性率达88%,2次免疫抗体阳性率高达100%.试纸定量测定结果表明,2次免疫后猪群免疫抗体水平整体显著提升,并保持在较高水平.与ELISA试剂盒比较二者具有相同的敏感性和特异性,符合率为100%.     

番茄环斑病毒和烟草环斑病毒复合型胶体金免疫层析试纸条的研制

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记番茄环斑病毒和烟草环斑病毒的兔多克隆抗体,用微定量喷头在硝酸纤维素膜上喷好2条病毒检测线（T线）和1条羊抗兔抗体质控线（C线）,制成复合型免疫层析检测试纸条。一张试纸条在10min内,可同时检测出这两种病毒。试纸条检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒粗提纯液,检测灵敏度在1μg/mL,试纸条检测番茄环斑病毒和烟草环斑病毒的混合病汁液可稀释1000倍（重量/体积）。用健康叶片和缓冲液对照测试,试纸条结果都为阴性。     

土壤硝酸盐试纸条 反射仪测定法存在问题及其解决方案

针对浸提方法影响硝酸盐试纸条-反射仪法结果的问题,选择陕西关中的土娄土和渭南的黑垆土为供试材料,通过室内对比试验,对土壤硝酸盐浸提剂、振荡与沉淀时间及水土质量比等因素进行优化。结果表明,浸提剂类型、振荡与静置时间均对试纸条-反射仪法的土壤硝酸盐测试结果产生较大影响,而水土质量比对测定结果无显著影响,最终确定利用饱和硫酸钙作为浸提剂、振荡10 min、静置5 min为最佳前处理方法,在此条件下,硝酸盐试纸条-反射仪法测试结果准确,测试效率高。     

羊早孕诊断试纸条的研制

用抗孕酮单克隆抗体和羊抗兔多克隆抗体分别包被检测线和质控线,优化了金标抗体、质控线和检测线的包被条件和抗体浓度,应用层析式双抗体夹心法原理研制羊早孕诊断试纸。通过检测尿液中孕酮含量的变化推断是否怀孕,结果显示检出率为47.8%;通过了稳定性和重复性实验,获得了理想的效果,值得在基层推广。