酿酒葡萄园生草管理模式下新发害虫——黑额光叶甲的生物学特性及其防控

【目的】河北昌黎酿酒葡萄园生草制度下新发一种害虫,经鉴定该虫为黑额光叶甲[Smaragdina nigrifrons(Hope)],该虫在酿酒葡萄园内发现尚属首次。黑额光叶甲在酒葡萄园生草区连年发生,具有一定的风险性。鉴于此,笔者详细研究了酒葡萄产区黑额光叶甲的形态特征、危害状况、生活习性、发生规律和控制等。【方法】田间系统调查和室内饲养相结合。利用Primo Star显微镜观察黑额光叶甲各虫态的形态学特征,明确其分类地位。利用黄板诱集技术对其种群动态和发生规律进行监测。【结果】该酒葡萄产区黑额光叶甲成虫体长椭圆形,头黑色,前胸及鞘翅黄褐色至红褐色,鞘翅上具黑色宽横带。雄虫腹部倒数第二腹板凸起,雌虫倒数第二腹板凹陷。成虫具假死性,无趋光性,昼出夜眠,一般于葡萄架上端啃食幼嫩新叶,被害叶片呈不规则缺刻,发现地酒葡萄株被害率达100%。此害虫出现于7—8月,8:00—11:00 am,3:00—6:00 pm为成虫发生危害盛期。【结论】黑额光叶甲的发生危害与酿酒葡萄果园自然生草制度关系密切,应在全面评估利弊及采用先进管理方式的基础上实施果园生草制度。黄板对黑额光叶甲有一定的诱集作用,田间顺行均匀放置于葡萄树篱架上部和下部杂草中央,用于该虫的监测与绿色防治。     

马铃薯卷叶病毒PLRV RT-LAMP检测方法优化

马铃薯卷叶病毒Potato leafroll virus(PLRV)是目前严重影响马铃薯产量与品质的主要病毒之一,给马铃薯产业造成巨大损失。本研究采用环介导等温核酸扩增(loop-mediated isothermal amplification, LAMP)技术建立PLRV的RT-LAMP检测方法。采取单因素变化试验,对RT-LAMP反应体系中多个因素包括引物组合、温度条件及Mg~(2+)、betaine、Bst 3.0 DNA聚合酶、dNTPs、UNG、SYBR GreenⅠ和引物组合的浓度进行一系列试验和优化。采用RT-PCR检测方法进行平行比对试验,对优化后的RT-LAMP反应体系进行了验证。结果表明,最佳引物组合为P3,最适反应温度62℃,25μL反应体系中,Mg~(2+)、betaine、Bst 3.0 DNA聚合酶和UNG的最佳终浓度分别为4 mmol/L、0 mmol/L、0.64 U/μL和0.08 U/μL,dNTPs的最佳用量为1μL(dATP、dGTP、dCTP各0.4 mmol/L,dUTP 1.2 mmol/L),SYBR GreenⅠ(20×)的最佳用量1μL,primer mix的最佳用量2.5μL(PLRV-FIP/BIP、PLRV-F3/B3和PLRV-LF/LB的浓度分别为0.8、0.2μmol/L和0.6μmol/L),RNA模板1μL(2 ng/μL),加DEPC-H_2O至25μL,反应时间50 min。优化后的RT-LAMP检测结果与RT-PCR一致,且可视化判读结果。因此,建立的PLRV RT-LAMP检测方法为进一步开发RT-LAMP检测试剂盒及其实际应用奠定了基础。     

蟆叶秋海棠组培快繁技术研究

试验以蟆叶秋海棠的叶片和叶柄为外植体进行组培快繁研究,找出合适的诱导愈伤组织,芽增殖培养和生根培养最佳的激素配比组合培养基配方。试验表明:叶片为适合的外植体材料,诱导愈伤以MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L为宜,芽增殖以MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.1 mg/L,生根培养以1/2 MS+NAA 0.5 mg/L为宜。     

可可毛色二孢全基因组分泌蛋白的预测及分析

【目的】可可毛色二孢（Lasiodiplodia theobromae）是一种世界性分布的重要植物病原真菌,可引起严重的葡萄溃疡病（Botryosphaeria dieback）,影响果木品质并造成巨大的经济损失。本研究预测并分析可可毛色二孢基因组范围内的分泌蛋白,并明确其基本特征,为该病菌分泌蛋白致病机理的研究打下基础。【方法】依据已公布的可可毛色二孢全基因组序列,利用信号肽预测软件SignalP v5.0、跨膜结构分析软件TMHMM v2.0、细胞器定位分析软件ProtComp v9.0、GPI锚定预测软件big-PI Fungal Predictor和亚细胞器定位分析软件TargetP v2.0生物信息学软件对该菌中的典型分泌蛋白进行筛选。对分泌蛋白N端信号肽的长度、氨基酸使用频率及其切割位点进行统计分析。依据蛋白序列的同源性,应用BLASTP程序对分泌组蛋白进行功能注释分析,预测其生物学功能。采用蔗糖酶缺陷的酵母分泌系统,对所选分泌蛋白的信号肽进行活性检测。利用qRT-PCR方法检测所选分泌蛋白基因在可可毛色二孢侵染葡萄中的表达情况。【结果】在可可毛色二孢全基因组编码蛋白中共筛选获得552个潜在的具有典型信号肽的分泌蛋白,占全基因组预测蛋白总数的4.3%,其编码蛋白长度集中于101—400 aa。信号肽统计分析表明,其信号肽长度以18—20 aa的序列最为集中,信号肽长度为20 aa的蛋白数量最多。信号肽中使用频率最高的氨基酸为丙氨酸;非极性、疏水的氨基酸使用频率最高,占氨基酸总数的60.2%。其信号肽的-3至-1位置上的氨基酸相对保守,切割位点属于A-X-A类型,可被Sp I型信号肽酶识别并切割。336个分泌蛋白具有功能注释,其功能较多集中于细胞壁降解有关的酶类以及致病相关蛋白,并且这些蛋白在分子量、等电点、脂肪族氨基酸指数等方面均存在差异。通过蔗糖酶缺陷的酵母分泌系统证实,挑选的9个分泌蛋白信号肽均具有分泌活性。qRT-PCR检测结果表明,所选分泌蛋白基因在该病菌侵染初期的表达发生变化。【结论】利用生物信息学分析技术从可可毛色二孢全基因组中共预测获得552个经典分泌蛋白。其信号肽氨基酸长度分布广泛,氨基酸组成中非极性、疏水的氨基酸使用频率最高。功能注释主要集中在细胞壁组分降解相关的酶类、致病侵染相关的坏死诱导相关蛋白以及几丁质结合蛋白等。     

彩叶树种硬枝扦插试验

扦插繁殖具有繁殖速度快、简单易行、不受树种限制、繁殖系数较高、成本低等优点,在苗木生产中得到了广泛应用。扦插时期、取材部位、生长调节剂浓度等因素对于扦插的成功率与苗木质量有很大的影响。深入研究植物扦插生根机理对于提高扦插成活率、发挥苗木优良特性十分重要。探究以上3种不同因素对于新优彩叶树种("精品"加拿大红樱、"银皇后"银白槭、"秋焰"银红槭)的扦插效果影响,提高生产效率和质量,扩大这3种彩叶乔木的繁殖量,从而丰富北京彩叶树种,并对其在园林中的应用提出建议。     

岭南花卉市场鲜切叶类植物调查分析

于2016—2017年对岭南花卉市场切叶摊档进行实地调研,共记录得98个鲜切叶种类(含品种),其中"极常见种"有8个,"常见种"有11个。对鲜切叶外形、叶色、价格及平日、节假日销量和婚庆开业旺季数据进行分析,得到:鲜切叶按叶型可分为块面型、线带型、针(条)型叶簇生及切枝型4类;有33个种类为彩叶种类;低、中、高档价位叶材皆有出售;在节假日及平日叶材价格波动并不大。基于上述分析,提出在供给一端应加强对叶材名称的规范,重视园林及野生植物的引种和培育,以及彩叶新种类的开发。     

鲜食葡萄园水肥一体化生产技术规程

《鲜食葡萄园水肥一体化生产技术规程》介绍了鲜食葡萄园水肥一体化生产技术,对园地选择、设备配置、肥水管理、整形修剪、病虫害防治和采收包装等进行了规范,适用于山东省范围内鲜食葡萄产区及国内同类型地区,目标产量为2.25万～3万kg/hm~2。     

猪病毒性疾病的防治研究

在我国经济发展新形势下,居民生活水平不断提升,猪肉作为居民餐桌上的重要食品,其市场需求量持续增加,带动了生猪养殖行业的快速发展,病毒性疾病作为危害养殖效益的关键因素,需要养殖户给予高度重视,并且做好相关防治工作。本文主要针对猪病毒性疾病的防治进行分析和探究,希望给予我国生猪养殖行业以些许参考和借鉴。     

绵羊肺腺瘤病与治疗研究

肺腺瘤病为一种绵羊常见疾病,该病致死率极高,若大面积发病会给养殖户带来巨大的经济损失。本文介绍绵羊肺腺瘤病的发病特点及诊断方式,分析其防治方法,供相关人员借鉴参考,以提高绵羊肺腺瘤病防治能力。