鮰爱德华菌外膜微孔蛋白ompN1、ompN2和ompN3基因生物信息学分析及截段基因的原核表达与其抗原性检测

根据GenBank中鮰爱德华菌(Edwardsiella ictaluri)外膜微孔蛋白N(outer membrane porin protein,OMP)基因序列(NC_012779.2)设计引物,以鮰爱德华菌Ms12基因组DNA为模板,经PCR扩增后克隆至pMD19-T载体,将阳性克隆菌送公司测序。测序结果通过生物信息学软件对ompN1、ompN2和ompN3序列的氨基酸序列相对分子质量、分子式、信号肽、跨膜区、亲/疏水性、B细胞表位进行预测,并构建系统发育树;根据去信号肽的B细胞表位相对集中区域设计特异性引物,经PCR扩增后,将截段序列克隆至pMD19-T载体,鉴定成功后克隆至原核表达载体pET32a(+)并转化至BL21(DE3)/Rosseta(DE3)进行IPTG诱导表达,最后用兔抗鮰爱德华菌血清对重组蛋白OmpN1、OmpN2和OmpN3进行免疫原性检测。结果显示扩增得到ompN1(1 143bp)、ompN2(1 056bp)和ompN3(1 053bp)的序列,获得的基因登录号分别为KJ831564、KJ831565和KJ831566。经生物信息学分析显示,OmpN1、OmpN2和OmpN3蛋白分子式分别为C1940H2993N543O622S7、C1817H2723N497O579S5和C1896H2843N519O563S7,相对分子质量大小分别为44 100、40 900和41 800,均为含有1个信号肽和跨膜区的疏水性蛋白,具有1个革兰阴性细菌OM_channels超家族结构域,是1种嵌入型的膜外蛋白;SDS-PAGE电泳检测发现,诱导表达的融合重组蛋白均以包涵体的形式出现在沉淀中,大小分别约为61 800、58 700和59 100;Western-blot分析表明,重组蛋白OmpN1、OmpN2和OmpN3均能与兔抗鮰爱德华菌全菌血清结合,表明鮰爱德华菌外膜微孔蛋白N具有亚单位疫苗开发的潜力。     

江西永修凤凰山桃实腐病病原鉴定

桃实腐病是江西永修凤凰山桃园发生的一种新的重要病害,其主要危害挂果期的果实,严重影响桃产量和品质。病果主要表现为脐部变褐腐烂,并在病部表面密生黑色小点（分生孢子器）,病果易脱落。本文对病果进行了组织分离,对获得的病菌纯培养进行了回接,同时对病菌的形态及大小观察和测量,结果表明引起凤凰山桃实腐病的病原菌为核果果腐拟茎点菌（Phomopsis amygdalina Canonaco）。     

城市轨道交通段场大库内火灾探测器设置方案研究

本文根据城市轨道交通有上盖物业开发的段场库内的环境特点,提出线型光束感烟火灾探测器（传统线性光束感烟火灾探测器以及新一代双鉴成像式线性光束感烟火灾探测器）、管路采样吸气式感烟火灾探测器、图像型火焰探测器三种探测器设置方案,并对三种方案的技术性能进行了剖析,为城市轨道交通段场库内的火灾探测方案提供了参考。     

浅析路桥工程过渡段施工技术的应用

随着社会经济的不断发展,路桥工程已经成为我国基础建设中的一项重要建设项目,过渡段施工作为路桥工程施工中的重要内容,其施工技术水平的高低直接关系着工程的整体质量。施工中应对过渡段施工加以重视,只有这样才能确保路桥工程施工的质量。本文主要对路桥工程过渡段施工中存在的问题、技术应用及注意事项进行了分析与探究。     

浅究路桥施工过渡段中施工技术问题

在路桥施工中整体流程中,过渡段中的施工是非常重要的,是保证路桥整体施工顺利进行的重要内容,并且,路桥施工中过渡段施工质量也会影响到路桥施工的综合质量。对于路桥施工过渡段中的施工技术问题的科学探讨,可以在一定程度上提升目前路桥施工中过渡段施工的质量,有助于我国路桥施工能力的发展和路桥施工质量的保证。本文从当前路桥过渡段施工的实际现状出发,对路桥施工中过渡段的施工技术相关问题进行了分析探讨,希望对相关的路桥施工单位有所启示。     

大别山山核桃组培中防褐变措施的研究

以大别山山核桃为试材，对其分化生长过程中的揭化现象进行研究。经过多次试验初步表明：采用不同树龄及不同部位的茎尖，对揭变现象有着明显的不同影响；为抑制揭变及保证茎尖正常分化生长，先将茎尖接种于1／2MS 2g活性炭的培养基中．置于5℃冰箱中暗培养7d后取出，再转接于DKW 6-BA(1．0mg／L) IAA(0．01mg／L) 5mL 20％硫带硫酸钠的培养基中，置于25℃室内光照环境下培养，每隔3～5d转换1次培养基，能有效地抑制褐变，确保核桃茎尖在整个培养过程中正常分化生长。     

花叶开唇兰的茎段培养

利用花叶开唇兰(Anoectochilus roxbughii (Wall.) Lindl.)的茎段繁殖成植株。在培养过程中可产生白色愈伤组织,并分化出丛芽。     

翅荚木试管苗快速繁殖技术的研究

翅荚木幼苗的顶芽，当年生枝条的腋芽，在MS培养基中添加6－BA0.5-1.5mg/l（单位下同）＋IBA0.05－0.1中，均产生丛生芽，在MS＋6－BA0.5-1.0 KT0.5 IBA0.10中芽增殖率最高，一株试管苗经一次继代培养，增殖系数可达16。将2－3cm的芽切成带1个腋芽的切段转移到MS或MS＋IBA0.01-0.05中，即可生根，在MS中其根的诱导率可达85.0%。若在MS中添加IBA，则随所添加的浓度的增大，生根率反而降低，将丛生芽转移继代，经40－45d可重复这种芽－苗的再生过程。     

葡萄嫩枝嫁接技术

葡萄嫩枝嫁接技术最适宜的嫁接时间为６月上旬至７月下旬，这时砧木和接穗均呈半木质化状态。嫁接砧木粗度在０．６ｃｍ以上。接穗采集后要去掉叶片，留一段叶柄，剪成长４—５ｃｍ的枝段，每个枝段只留一个芽眼。在芽上方１ｃｍ处平剪，下端削成楔形，削面长２—３ｃｍ。...     

文心兰茎尖离体培养研究

文心兰茎尖培养的研究，试验结果表明：文心兰茎尖在MS BA2mg／L NAA0．5mg／L培养基上，离体培养1个月后产生原球茎．改良KC基本培养较适原球茎的增殖；用BAI．5mg／L NAA0．2mg／L的激素配比，原球茎月增殖宰可达332．5％；CW可以减少原球茎褐死现象和促进原球茎的增殖：壮苗阶段，以附加NAA0．5% 10％香蕉汁的效果较好．水苔是良好的移栽基质，成活率在85．3％．