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副溶血弧菌和霍乱弧菌双重荧光定量PCR快速检测方法的建立与应用 总被引:2,自引:0,他引:2
建立一种基于TaqMan探针法同步定量检测副溶血弧菌和霍乱弧菌的双重荧光定量PCR方法。根据副溶血弧菌toxR基因和霍乱弧菌ompW基因设计特异性引物与TaqMan探针。toxR和ompW探针5'端分别标记FAM、CY5荧光报告基团,3'端均标记BHQ1荧光淬灭基团。结果显示:该方法的副溶血弧菌和霍乱弧菌最低检测限均达到10 CFU/m L,灵敏度高;特异性试验表明这两种细菌与其他病原菌(大肠杆菌O157、沙门氏菌、拟态弧菌、创伤弧菌)无交叉反应;批间和批内重复性实验表明变异系数均小于1.5%,说明重复性好。采用人工染菌虾肉样品,副溶血弧菌和霍乱弧菌的最低检测限分别为100 CFU/m L和50 CFU/m L,人工染菌贝类样品的最低检测限分别为50 CFU/m L和50 CFU/m L。两种细菌在虾肉中富集2 h后的最低检出限均为1 CFU/m L。结论:本研究所建立的双重荧光PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强和重复性好的特点,包括DNA提取的整个检测过程可在1至3 h内完成,是同时快速检测副溶血弧菌和霍乱弧菌的有效手段。 相似文献
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本试验旨在研究不同蛋氨酸(Met)水平对13~16周龄京红商品代蛋鸡生长性能以及后续产蛋性能的影响。选用12周龄末体重胫长相近的750只京红商品代蛋鸡,随机分为5组,每组5个重复,每个重复30只鸡。对照组饲喂Met水平为0.18%的玉米-豆粕型基础饲粮,试验组在基础饲粮水平上用0.06%、0.12%、0.18%、0.24%的Met替代等量的膨润土,使其Met水平分别达到0.24%、0.30%、0.36%、0.42%,试验期4周。饲养试验结束后统一饲粮继续观察至27周。结果表明:Met水平对末体重、平均日增重、平均日采食量和耗料增重比无显著影响(P0.05);0.30%和0.42%Met组血清中总蛋白、白蛋白和球蛋白显著高于0.18%Met组(P0.05);饲粮Met水平对血清白球比、碱性磷酸酶活性、尿酸和血氨含量无显著影响(P0.05);0.42%Met组血清中游离Met含量显著高于0.18%、0.24%、0.30%Met组(P0.05);在后续观察中,0.36%Met组京红蛋鸡的体重均匀度最高,且显著高于0.30%Met组(P0.05),后期产蛋性能高于0.42%Met组。综合分析,京红商品代蛋鸡13~16周龄Met需要量为0.36%。 相似文献
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为了观察中药复方制剂芩黄清肺散的抗炎、止咳、化痰、平喘作用,试验将动物随机分为模型组、阳性药物组、芩黄清肺散高、中、低剂量组。通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型法观察芩黄清肺散抗炎作用;通过小鼠浓氨水引咳法观察其止咳作用;通过小鼠气管酚红排泌法观察其祛痰作用;通过组织胺和乙酰胆碱豚鼠引喘模型观察其平喘作用。结果表明:芩黄清肺散能够降低二甲苯所致小鼠耳部肿胀,提高抑制率;能显著抑制浓氨水引起的咳嗽,延长咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数;能促进小鼠气管内酚红的分泌,促进痰液的排出;哮喘试验中芩黄清肺散能延长豚鼠哮喘发作潜伏期。可见芩黄清肺散具有较好的止咳、祛痰、平喘、抗炎作用。 相似文献
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本试验通过研究不同含硫氨基酸水平对7~12周龄京红商品代蛋鸡生长性能和血清生化指标的影响,以确定其含硫氨基酸的需要量。选取6周龄末体重、胫长均匀一致的京红商品代蛋鸡750只,随机分为5组,每组5个重复,每个重复30只鸡。对照(A)组饲喂含硫氨基酸水平为0.42%的基础饲粮,试验B、C、D和E组在基础饲粮水平上用0.08%、0.16%、0.24%和0.32%的蛋氨酸替代等量的膨润土,使其含硫氨基酸水平分别达到0.50%、0.58%、0.66%和0.74%,试验期6周。结果表明:1)0.58%、0.66%、0.74%含硫氨基酸组蛋鸡末体重和平均日增重显著高于0.42%与0.50%含硫氨基酸组(P0.05),同时0.66%含硫氨基酸组料重比显著低于0.50%含硫氨基酸组(P0.05),且蛋鸡血清总蛋白、球蛋白含量也显著高于其他试验组(P0.05)。2)单斜率非线性折线回归分析表明,以末体重和平均日增重为指标,7~12周龄京红商品代蛋鸡含硫氨基酸推荐需要量为0.62%。综上,7~12周龄京红商品代蛋鸡饲粮含硫氨基酸需要量为0.62%~0.66%。 相似文献
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秸秆还田对麦玉系统土壤有机碳稳定性的影响 总被引:6,自引:2,他引:4
为揭示不同秸秆还田量对华北小麦-玉米轮作系统土壤有机碳官能团结构及稳定性的影响,研究了秸秆还田5 a后土壤有机碳官能团结构、团聚体组成及有机碳含量、活性有机碳含量、土壤铁离子的变化。田间实验设置4个处理:秸秆不还田作为对照(CK)、秸秆1/3还田(S1)、秸秆2/3还田(S2)、秸秆全部还田(S3)。采用常规方法测定土壤理化性质、粒径、铁离子及土壤微生物量碳含量,13C核磁共振波谱技术(NMR)检测分析土壤有机碳官能团结构。结果表明:秸秆还田5 a后,土壤总有机碳(TOC)、2mm与2.00~0.25 mm团聚体有机碳、可溶性有机碳(DOC)、易氧化态碳(EOC)和微生物量碳(MBC)含量,均随还田量增加而逐渐增加,且不同处理增加量不同,与CK相比,S3处理显著增加了这些有机碳的含量(P0.05)。各处理土壤有机碳以烷基碳与烷氧基碳为主,其次是芳香碳与羰基碳,秸秆还田增加了烷氧基碳、羰基碳(易分解碳组分)含量,降低了烷基碳和芳香碳(难分解碳组分)含量,与CK相比,S3处理显著增加烷氧基碳含量(P0.05)而显著降低了芳香碳含量(P0.05)。与CK相比,S2、S3处理也显著降低了有机碳的芳香度、疏水碳/亲水碳、烷基碳/烷氧基碳比值(P0.05),而对脂族碳/芳香碳影响不明显。与CK相比,S3处理显著增加了2.00 mm团聚体组分,增加了2.00~0.25 mm组分,而降低了0.25~0.053 mm组分和显著降低了0.053 mm组分(P0.05)。秸秆还田对土壤游离铁、活性铁、螯合铁含量的影响不明显。有机碳官能团组成与土壤因子间的冗余分析表明土壤TOC、MBC含量、团聚体组分、铁离子的改变是导致不同处理间有机碳官能团结构存在差异的重要原因。综上所述,由于短期秸秆还田增加了活性有机碳含量、易分解有机碳组分,减少了难分解有机碳组分,降低了微团聚体物理保护作用,改变了微生物活性和铁离子络合作用,在一定程度上降低了土壤有机碳稳定性,可能导致麦玉复种系统土壤碳排放水平的增加。 相似文献