湖羊产羔性状的微卫星标记与可能生产力的关联性分析

选择位于绵羊第6号染色体上与多胎基因（Fec^B）紧密连锁的微卫星OarAE101、BM1329、BM143和OarHH55标记以及位于第4号染色体上的OarHH35标记对湖羊的产羔性状进行研究,结果显示：湖羊的5个微卫星座位都达到了高度多态水平（PIC〉0．5）,5个微卫星座位可以用于湖羊产羔性状的遗传多样性的评估。方差分析结果表明：5个基因座中OarAE101、BM143各基因型产羔数生产力之间存在极显著差异（P〈0．01）,OarHH35各基因型产羔数可能生产力之间存在显著差异（0.01〈P〈0．05）,BM1329、OarHH55各基因型产羔数可能生产力之间差异不显著（P〉0．05）。在OarAE101标记中107／113的产羔数最小二乘平均值为最大,与基因型103／113、107／107、101／111、113／113、107／111和103／103之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异不显著（P〉0．05）,但与101／101和103／107之间产羔数最小二乘平均值差异显著（O．01〈P〈0．05）,与115／115和111／111之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异极显著（P〈0．01）。在OarHH35标记中139／139的产羔数可能生产力最小二乘平均值为最大,与基因型139／141、139／127、137／125之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异不显著（P〉0．05）,但与127／127、125／125和139／125之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异极显著（P〈0．01）。在BM143标记中118／118的产羔数可能生产力最小二乘平均值为最大,与基因型118／106、118／110、106／104和112／114之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异不显著（P〉0．05）,但与118／116和102／106之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异显著（0.01〈P〈0．05）,与102／104、112／102和116／112之间产羔数可能生产力最小二乘平均值差异极显著（P〈0．01）。研究将在今后湖羊品种的标记辅助选择和分子育种中具有重要的应用价值。     

丙酮酸乙酯的微囊化与微囊中含量检测

[目的]对丙酮酸乙酯进行微囊化研究,并建立微囊化丙酮酸乙酯的反相高效液相色谱检测方法。[方法]用喷雾干燥法对丙酮酸乙酯微囊化。检测方法为:色谱柱为Tigerkin ODS柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为丙酮和乙腈的混合液(V/V=3∶2),流速为1.0 ml/min,检测波长为210 nm。样品经过水溶解、超声、流动相破壁、过滤等处理之后进样检测。[结果]微囊粉末表面光滑,无塌陷无裂缝。丙酮酸乙酯浓度在0.3～1.8 mg/ml的范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(R2=0.999 2),回收率为98.05%,RSD=1.17%。[结论]丙酮酸乙酯微囊化方法可行,微囊化丙酮酸乙酯含量检测方法能准确快速的检测微囊中丙酮酸乙酯的含量。     

湖羊GDF8区域微卫星标记遗传多样性与生长性状相关性分析

选择位于绵羊2号染色体GDF8区域可能与生长性能相关性较大的4个微卫星标记（BMS1591、TEXAN-2、FCB128、BM81124）对湖羊的生长性状进行研究。结果表明：这4个微卫星标记在湖羊中都达到了高度多态水平（PIC〉0．5）,可见这些微卫星标记可用于湖羊的遗传多样性评估。方差分析表明：标记BMSl591各基因型初生重之间存在极显著差异（P〈0．01）;在BMS1591标记中104／114的初生重最小二乘平均值为最大,与基因型94／112、94／114、98／106、102／120和106／120之间初生重的最小二乘平均值差异极显著（P〈0．01）;标记BMS1591的断奶重和6月龄重以及标记TEXAN-2、FCB128、BM81124的初生重、断奶重和6月龄重,各基因型之间差异不显著（P〉0．05）。     

湖羊BMP7基因遗传多态、表达及与羔皮毛囊性状的关联

【目的】研究BMP7基因对湖羊不同花纹形成的影响及其与毛囊性状的发育可能存在的调控机制。【方法】利用PCR-SSCP方法在205个样本中检测BMP7基因外显子1、2、3的单核苷酸多态性;通过组织学方法和显微观察法对湖羊皮肤毛囊进行组织学观察,对不同花纹皮肤组织中初级毛囊直径、次级毛囊直径、初级毛囊数、次级毛囊数进行统计分析;利用荧光定量PCR技术检测BMP7基因在大花、中花、小花间的相对表达量,用SPSS17.0软件进行差异显著性分析,探讨BMP7基因对湖羊不同花纹形成及其毛囊性状可能存在的调控机制。【结果】PCR-SSCP方法检测BMP7基因外显子1、2、3的单核苷酸多态性,结果均未发现多态性;在组织切片分析中,湖羊大花初级、次级毛囊直径均大于中花、小花,小花初级、次级毛囊直径均介于大花、中花之间;大花次级毛囊数多于中花、小花,而小花次级毛囊数介于大花、中花之间。通过差异显著性分析可知,湖羊大花与中花、小花初级毛囊直径呈极显著差异（P＜0.01）,小花与中花初级毛囊直径差异不显著（P＞0.05）;中花次级毛囊直径与大花、小花次级毛囊直径呈极显著差异（P＜0.01）,但小花次级毛囊直径与大花次级毛囊直径差异不显著（P＞0.05）;初级毛囊数大花、中花、小花间差异均不显著（P＞0.05）,但相同视野中大花初级毛囊数多于中花、小花;中花次级毛囊数与大花、小花次级毛囊数呈极显著差异（P＜0.01）,但大花、小花次级毛囊数差异不显著（P＞0.05）;qRT-PCR结果显示,在同一时期BMP7基因在大花、中花中的表达量高于小花,且在大花、小花毛囊组织中表达量差异显著（P＜0.05）;BMP7基因相对表达量与小花初级毛囊直径呈显著正相关（P＜0.05）,与小花次级毛囊数呈极显著正相关（P＜0.01）,与中花初级毛囊直径和中花次级毛囊数呈显著负相关（P＜0.05）,这与组织学与显微镜观察的结果相符。【结论】未发现BMP7基因存在单核苷酸多态性,但BMP7基因表达量与毛囊部分指标存在相关性且与组织学观察结果相一致,可初步推测BMP7基因可能参与毛囊发育,调控被毛生长。