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本研究在马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体pcPPTPRE(+)的基础上[含有报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)和人乙型肝炎病毒转录后调控元件(HARE)1,对其转录后调控元件和外源基因启动子进行优化。参考土拨鼠肝炎病毒(Woodchuck hepatitis virus,WHV)基因组序列和人巨细胞病毒增强子/鸡B—actin启动子序列(CAGp),设计合成2对引物,分别扩增WHV转录后调控元件(WARE)和CAGp片段,正向插入pcPPTPRE(+)获得重组质粒pcPPTWARE和pcPPTWCAG。将获得的EIAV转移载体pcPPTWARE和pcPPTWCAG以及pcPPTPRE(+),脂质体法分别转染人胚肾细胞HEK293和鸡胚成纤维细胞系DF-1,转染后12h、24h、36h、48h在荧光显微镜下观察特异性绿色荧光的表达。48h后收获细胞,利用流式细胞仪检测转染细胞中表达EGFP的阳性细胞。结果表明,在HEK293细胞中pcPPTWARE和pcPPTWCAG的阳性细胞平均百分率均极显著高于pcPPTPRE(+)(P〈0.01),pcPPTWCAG显著高于pcPPTWARE(P〈0.05);pcPPTWCAG的平均道数值极显著高于pcPPTPRE(+)和pcPPTWARE,pcPPTWPRE显著高于pcPPTPRE(+)。在DF-1细胞中pcPPTWARE和pcPPTWCAG的阳性细胞平均百分率均显著高于pcPPTPRE(+),而pcPPTWARE和pcPPTWCAG的平均道数值均极显著高于pcPPTPRE(+),pcPPTWCAG显著高于pcPPTWARE。本研究利用WARE和CAGp优化构建了EIAV基因转移载体pcPPTWCAG,获得了较强的基因表达能力,为以鸡为宿主进行转基因研究提供了条件。 相似文献
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大伙房水库是抚顺、沈阳等市的防洪屏障和主要水源地,第一非常溢洪道是大伙房水库除险加固工程设计的重点,本研究根据堰址的自然条件及工程地质条件诸因素,对陡槽式溢洪道和直泄式溢洪道两种形式及其分别采用挑流和底流消能方式时,进行了水力特性和经济比较,最终把陡槽式溢洪道方案作为推荐方案. 相似文献
75.
指出并分析了计提固定资产减值准备的难点,提出了转回金额的正确计算步骤,通过举例说明了如何正确计提固定资产减值准备并剖析了固定资产计提减值准备的原理。 相似文献
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于海波 《农村.农业.农民》2006,(7):40
田大妈坚定地说:以后还会管!
“哎--钱包被扔到车底下了.“7月16日上午9时许,在丰台区长辛店街上,38岁男青年赵志成因为提醒一位被偷包的女士而被小偷捅了3刀.事发后,街上人来人往,但没有一个人站出来抓小偷,愣是让小偷逃之夭夭,而被偷的那名女士也悄然离开了.…… 相似文献
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BWEL-SPF种鸡在隔离器中的育种和光照管理 总被引:1,自引:0,他引:1
1993年,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所在国内首次采用普通种鸡群(BWEL)为原材料,经疫病净化试验、生物学敏感性试验和选育培育试验等方法,用隔离器培育我国BWEL-SPF种鸡基础群。1996年,在培育出的BWEL-SPF种鸡基础群的基础上开展了我国BWEL-SPF种鸡群培育的培育研究,于2000年2月通过农业部组织的科技成果鉴定,建立了无鸡白血病等18种特定疫病病原和抗体,对新城疫等9种以上病原微生物敏感,年产160-200枚/只鸡合格SPF种蛋,各项主要遗传和生产指标达到来源品系指标,并较稳定的具有7-8个家系的BWEL-SPF种鸡群。此项目从2001年开始, 相似文献
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蓝鳃太阳鱼(Lepomis、macrochirus)作为一种养殖前景广阔的温水性鱼类.在我国东北地区进行养殖实验尚未见报道,更没有成规模养殖。通过对蓝鳃太阳鱼标本的观察与解剖,根据蓝鳃太阳鱼的有关生物学特性,表明其在东北地区进行养殖具有一定的可行性。我们通过蓝鳃太阳鱼在哈尔滨市太平区民主乡新立渔场的养殖试验状况。探讨了蓝鳃太阳鱼在高寒地区的生长成活状况。实验结果表明,在东北地区蓝鳃太阳鱼养殖成活率较为理想(单养达85%,混养达67%).能成功越冬.在6—8月份生长状况良好,而且,其在混养状态下要比单养状态下的生长速度快。本实验对养殖条件要求较为简单,易于推广。所以本文的研究为蓝鳃太阳鱼在东北地区的推广养殖提供了基础性资料。 相似文献
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