The conservation implications of spatial and temporal variability in the diurnal use of Bahamian tidal mangrove creeks by transient predatory fishes

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柑橘抗逆基因NAC83的克隆与表达分析

以柚[Citrus maxima（Burm.）Merr.]、枳[Poncirus trifoliata（L.）Raf.]和柠檬[C. limon（L.）Burm. f.]实生苗为试材,使用电子克隆和RT-PCR的方法从中克隆到3个新的NAC蛋白基因,分别命名为CmNAC83、PtNAC83和ClNAC83;并用qRT-PCR技术检测了该基因在ABA、干旱、低温和高盐胁迫处理下的时空表达。结果显示：CmNAC83、PtNAC83和ClNAC83 的cDNA序列全长均为841 bp,都含有750 bp的开放阅读框（ORF）,编码249个氨基酸;推测其蛋白分子质量分别为24.18、28.00和28.15 kD,等电点分别是9.02、9.31和9.30,且均含有NAC家族的N端保守结构域;系统进化树分析表明,该3个蛋白均属于SENU5亚族,与苹果NAC22亲缘关系较近。实时定量qRT-PCR分析显示,NAC83基因能被ABA、干旱、低温和高盐胁迫诱导表达,且在不同的柑橘种类中存在表达差异。可见柚CmNAC83、枳PtNAC83和柠檬ClNAC83是NAC基因家族的成员,可能在柑橘响应非生物胁迫的过程中起了重要作用。     

不同国家柠檬农药MRLs标准比较分析

通过对与我国有柠檬贸易关系国家（马来西亚、印度尼西亚、俄罗斯、美国、澳大利亚和南非等）制定的柠檬农药最大残留限量（MRLs）标准与我国标准的比较分析,找出我国柠檬农药MRLs标准的差距,提出完善的建议与措施,旨在为促进我国柠檬食品的安全及其国际贸易提供参考。     

果胶酶和纤维素酶对尤力克柠檬出汁率的影响

以尤力克柠檬为材料,利用果胶酶和纤维素酶酶解柠檬浆,研究2种酶对尤力克柠檬出汁率的影响,确定柠檬最佳酶解工艺为:果胶酶用量0.2%,纤维素酶0.5%,酶解时间4h,酶解温度45℃,出汁率73.45%。     

胶园间种柠檬是一项值得推广的新产业

简述云南德宏农垦2001-2007年在橡胶园间种柠檬,提高土地利用率和单位面积经济效益的实践,提出橡胶园间种柠檬可发展成为一项新产业,同时针对存在的问题给出了发展建议。     

滇西南地区柠檬苗定植前再培育及移栽技术

利用柠檬生理、生长特性结合南亚热带季风气候条件,采用柠檬苗定植前再培育,能抑制柠檬垂直根系的生长,促发侧根及须根的健壮伸长,从而使幼苗形成庞大的须根群。介绍了柠檬苗定植前再培育及移栽技术,以期为柠檬栽培提供参考。     

柠檬片真空冷冻干燥工艺初探

以新鲜柠檬为试材,研究了柠檬片真空冷冻干燥的工艺条件.试验结果表明,冻干柠檬片的最佳工艺条件为:柠檬片切片厚度6.0mm,冻干时间10h,加热板温度60℃,冻干压力80Pa.此条件下加工的冻干柠檬片具有较好的感官品质及较高的柠檬酸及VC含量,褐变度较低,可保持新鲜柠檬原有的色、香、味和营养成分.     

“北京”柠檬弥雾扦插技术研究

研究了不同扦插枝梢类型、不同扦插月份和扦插枝梢带叶与否对“北京”柠檬弥雾扦插繁殖生根效果的影响。试验结果表明：“北京”柠檬半木质化、带1～2片叶绿枝在4～10月份苗床大棚弥雾扦插效果较好,插枝平均生根成活率在93％以上。     

香水柠檬RHF2A的克隆与互作蛋白的筛选

【目的】以香水柠檬（Citrus limon (L.) Burm. F.）为研究对象,分析两个RHF2A的时空表达规律,利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补试验（BiFC）筛选、验证其互作蛋白,为深入研究RHF2A在香水柠檬自交不亲和过程中的分子作用机制奠定基础。【方法】从前期转录组和泛素修饰组（未公开）筛选获得2个E3泛素连接酶RHF2A（RING-H2 Zinc Finger2A）基因RHF2A-1、RHF2A-2,并克隆其全长序列,通过生物信息学分析2个RHF2A的序列和蛋白质结构,预测其启动子顺式作用元件,构建35S-RHF2A-GFP融合蛋白表达载体用于亚细胞定位分析,采用实时荧光定量PCR分析两个RHF2A的时空表达模式,构建酵母双杂诱饵载体从香水柠檬酵母文库筛选互作蛋白。构建BiFC载体,在洋葱活体细胞内对目标蛋白进行互作验证。【结果】从香水柠檬克隆获得RHF2A-1、RHF2A-2,ORF全长分别为1 161和1 134 bp;NCBI结构域预测发现其具有Ring/U-box结构域。启动子分析发现其具有花粉特异性表达相关元件POLLEN1LELAT52、GTGANTG10。组织表达分析发现RHF2A-1在花粉特异性表达,RHF2A-2在叶中特异性表达;时空表达分析结果显示,RHF2A-1在自交柱头表达量从第1天开始升高,第3天达到峰值,是杂交柱头表达量的5倍以上。亚细胞定位显示RHF2A-1和RHF2A-2定位在细胞核。经过Uniprot网站预测其互作蛋白显示RHF2A能与KRP6、AT3G57370、UBA1、FBL17、SK11蛋白相互作用,推测其参与自交不亲和泛素化反应途径、配子体发育调控、花粉的生长发育等生物学过程。通过酵母双杂交技术筛选出72个克隆,对其测序并进行Blast比对后排除重复克隆,最终得到ABCF3等20个候选互作蛋白。经过一对一互作验证、双分子荧光互补实验确定RHF2A-1与ABCF3-2存在互作关系。【结论】RHF2A-1的时空表达规律与自交不亲和过程中花粉在雌蕊上的萌发规律相吻合;筛选得到柠檬授粉过程中直接影响花粉生长发育的互作候选蛋白,初步证明RHF2A-1在自交不亲和过程中具有重要作用。     

铁锌元素对矫治柠檬缺铁黄叶的效应研究

以两种铁源和供铁方式以及增加锌元素等,对缺铁黄叶的柚砧尤力克柠檬(Citrus Limon)进行复绿矫治研究。结果表明,尿素铁+硫酸锌,硫酸亚铁+硫酸锌进行叶面喷施和尿素铁+硫酸锌,硫酸亚铁+柠檬酸进行埋瓶浸根,叶片复绿效果较好,并有助于提高果实产量和品质。试验还对复绿的机理和供铁、锌元素对其他矿质元素的影响进行了探讨。